新生儿遗传代谢性疾病筛查干血斑制备及储存影响因素研究

目的:探讨不同制备温度、紫外线污染及不同储存温度对新生儿遗传代谢性疾病筛查干血斑中氨基酸和肉碱含量影响。方法:通过标准化制备干血斑,利用Waters-TQD串联质谱仪,采用非衍生化法对干血斑中氨基酸及肉碱含量进行测定,比较分析不同制备温度、紫外线污染及不同储存温度条件下干血斑中氨基酸及肉碱含量的变化。结果:首先,与25℃制备相比,4℃制备时干血斑中精氨酸(ARG)含量无显著性差异,但是37℃制备干血斑时,血斑中精氨酸(ARG)含量增加,且有统计学差异(P<0.05)。干血斑中精氨酸(ARG)含量与鸟氨酸(ORN)含量4℃制备与37℃制备时存在统计学差异(P<0.05)。其次,与25℃制备相比,25℃制备过程中受到紫外线污染的干血斑中精氨酸(ARG)含量高且具有统计学差异(P<0.05)。最后,在4℃、-20℃及-80℃条件下对制备的干血斑保存90d时,4℃密封储存干血斑时,氨基酸中甘氨酸(GLY)、蛋氨酸(MET)、鸟氨酸(ORN)以及肉碱中乙酰肉碱(C2)、丁酰肉碱(C4)均有显著性降低(P<0.05),但是游离肉碱(C0)表现出显著性升高(P<0.05)。结论:新生儿遗传代谢性疾病筛查干血斑制备过程中温度变化对于干血斑中精氨酸(ARG)与鸟氨酸(ORN)含量影响显著,但是制备温度及紫外线污染对血斑中肉碱含量影响未有统计学差异。同时,-20℃条件对制备的干血斑密封保存能很好保证干血斑中氨基酸及肉碱含量的稳定性,满足日常实验检测质控需求。