固本平喘方对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠气道MUC5AC水平的影响

目的使用固本平喘方对香烟烟雾暴露联合气管滴注脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、猪胰弹性蛋白酶(porcine pancreatic elastase,PPE)造模大鼠进行干预,以主要分泌性黏蛋白5AC(mucin5AC,MUC5AC)作为评价指标,测定肺组织MUC5AC含量、蛋白表达、mRNA表达,评价各组气道黏液分泌强度。方法将64只SPF级SD大鼠适应性饲养1周后,随机取52只进行造模,造模成功后取50只随机分为模型组(蒸馏水)、地塞米松组(0.15 mg·kg-1)及固本平喘方高(28 g·kg-1)、中(14 g·kg-1)、低(7 g·kg-1)剂量组,每组10只,另取10只大鼠为对照组(蒸馏水)。15 d后处死大鼠并收集标本。HE染色观察大鼠肺组织病理学变化;ELISA法检测肺组织MUC5AC水平;RT-PCR检测肺组织MUC5AC mRNA表达水平;Western blot检测肺组织MUC5AC蛋白表达;免疫荧光检测肺组织MUC5AC表达分布态势。结果模型组大鼠肺组织结构显著破坏,肺泡腔内及肺间质见大量炎性浸润;地塞米松组及固本平喘方各剂量组可见肺泡腔受损程度及组织炎性浸润程度减轻。与对照组比较,其余各组MUC5AC含量均升高(P<0.05);与模型组比较,地塞米松组及固本平喘方各剂量组MUC5AC含量及MUC5AC mRNA表达均下降(P<0.05),地塞米松组及固本平喘方高、中剂量组MUC5AC蛋白表达降低(P<0.05)。肺组织免疫荧光可见,MUC5AC在模型组中呈现强表达,在地塞米松组中呈现较弱表达,在固本平喘方低、中、高剂量组中,表达强度依次减弱。结论固本平喘方可改善慢性阻塞性肺疾病模型大鼠的肺组织病理损伤,有效减少MUC5AC含量、下调MUC5AC mRNA表达、降低MUC5AC蛋白表达,改善大鼠气道黏液高分泌状态。

止咳平喘方结合穴位贴敷辅治咳嗽变异性哮喘痰邪蕴肺型临床研究

目的:观察止咳平喘方结合穴位贴敷辅治咳嗽变异性哮喘(CVA)痰邪蕴肺型的疗效。方法:96例按随机数字表法分为两组各48例。两组均行常规西医联合穴位贴敷治疗,观察组加用止咳平喘方治疗,连续治疗2周。结果:观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后观察组咳嗽、咽痒、喉中痰鸣、大便不实评分与CRP、PCT、WBC、IL-6、CD8^(+)低于对照组而CD3^(+)、CD4^(+)高于对照组(P<0.05)。两组不良反应比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:止咳平喘方结合穴位贴敷辅治CVA痰邪蕴肺型效果较好,且无严重不良反应。

基于TLR2/NF-κB信号通路探讨平喘方及拆方改善哮喘小鼠气道重塑作用机制

目的基于TLR2/NF-κB信号通路研究平喘方及拆方改善卵清蛋白诱导的哮喘小鼠气道重塑的作用机制。方法将75只SPF级BALB/c雄性小鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组、平喘方组和平喘祛瘀方组,每组15只。除空白组外,其余组小鼠于第1日和第14日采用卵清蛋白联合氢氧化铝凝胶腹腔注射致敏,第21~27日连续予5%卵清蛋白雾化激发哮喘,每次雾化激发1 h后灌胃相应药液,连续7 d,空白组和模型组予等量蒸馏水灌胃。末次给药24 h后取材,HE染色观察小鼠肺组织病理变化,Masson染色观察肺组织支气管周围胶原纤维沉积,RT-qPCR检测肺组织平滑肌肌球蛋白重链(SM-MHC)、钙调蛋白(Calponin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Toll样受体2(TLR2)、核因子(NF)-κB抑制因子α(IκBα)、NF-κBp65 mRNA表达,Western blot检测肺组织纤维连接蛋白1(FN1)、E钙黏蛋白(E-cadherin)、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、TLR2、IκBα、NF-κBp65蛋白表达。结果与空白组比较,模型组小鼠支气管管腔狭窄,炎性浸润明显,肺间质可见大量胶原纤维沉积,肺组织SM-MHC、Calponin、IκBαmRNA表达显著降低(P<0.01),α-SMA、TLR2、NF-κBp65 mRNA表达显著升高(P<0.01),FN1、CollagenⅠ、TLR2、NF-κBp65蛋白表达显著升高(P<0.01),E-cadherin、IκBα蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,地塞米松组、平喘方组及平喘祛瘀方组小鼠肺组织病理损伤减轻,炎性浸润及胶原纤维沉积减少,肺组织SM-MHC、Calponin、IκBαmRNA表达显著升高(P<0.01,P<0.05),α-SMA、TLR2、NF-κBp65 mRNA表达显著降低(P<0.01,P<0.05),FN1、CollagenⅠ、TLR2、NF-κBp65蛋白表达显著降低(P<0.01,P<0.05),E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.01),地塞米松组IκBα蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论平喘方及拆方能明显改善哮喘小鼠气道重塑,其机制可能与抑制TLR2/NF-κB信号通路相关。

二陈桑贝止咳平喘方辅助治疗儿童咳嗽变异性哮喘痰邪蕴肺证临床观察

目的:观察二陈桑贝止咳平喘方辅助治疗儿童咳嗽变异性哮喘痰邪蕴肺证的临床疗效。方法:收集2021年6月—2021年12月就诊于新疆医科大学附属中医医院儿科门诊咳嗽变异性哮喘痰邪蕴肺证的患儿共64例,采用随机信封法分为试验组、对照组,每组32例。试验组采用二陈桑贝止咳平喘方口服和孟鲁司特钠咀嚼片嚼服联合用药,对照组采用孟鲁司特钠咀嚼片嚼服。记录并观察首诊和第4周治疗后CDS评分、中医证候及症状积分和肺功能变化。结果:试验组临床总有效率96.7%(29/30)高于对照组86.7%(26/30)(P<0.05)。与治疗前相比,治疗后两组CDS评分、中医证候积分及肺功能(FEV1%、PEF%)均有改善(P<0.05),且试验组改善更显著(P<0.01);其中咳嗽、咯痰、咽痒不适及睡眠症状积分试验组优于对照组(P<0.01),胸闷气促、饮食症状积分比较两组无明显差异(P>0.05)。两组均未出现严重不良反应。结论:二陈桑贝止咳平喘方辅助治疗儿童咳嗽变异性哮喘痰邪蕴肺证有效,无严重不良反应,值得进一步研究及推广应用。

加用二陈桑贝止咳平喘方治疗痰热壅肺型小儿急性支气管炎疗效观察

[目的]观察加用二陈桑贝止咳平喘方治疗痰热壅肺型小儿急性支气管炎的临床疗效。[方法]选取痰热蕴肺型急性支气管炎患儿90例,随机分为对照组和观察组各45例。对照组采用阿莫西林克拉维酸钾颗粒口服,观察组在对照组治疗基础上加用中药二陈桑贝止咳平喘方口服,两组疗程均为7 d。比较两组疗效,同时观察两组患儿治疗前后中医症状积分变化情况,记录两组不良反应发生情况。[结果]观察组总有效率为93.33%,明显高于对照组的75.56%(P<0.05)。两组治疗7 d后,中医症状总积分均较治疗前降低,且观察组降低更显著(P<0.05)。[结论]加用二陈桑贝止咳平喘方可以提高痰热壅肺型小儿急性支气管炎临床疗效,缓解咳嗽、咯痰等症状,值得临床推广应用。

疏肝平喘方通过转化生长因子-β_(1)/Smad信号通路对哮喘小鼠免疫平衡的影响

目的:阐明疏肝平喘方对哮喘小鼠维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)/叉头框蛋白P3(Foxp3)以及辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的干预作用,对转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))/Smad信号通路的影响。方法:建立空白对照组、哮喘模型组、疏肝平喘组及地塞米松组实验动物模型。酶联免疫吸附试验检测肺组织匀浆中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17A(IL-17A)和TGF-β_(1)水平,流式细胞仪检测肺组织中Th17/Treg细胞量,蛋白质印迹法检测肺组织中RORγt、Foxp3的蛋白表达,以及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织TGF-β_(1)、Smad2、Smad3、Smad7的mRNA表达水平。结果:疏肝平喘方能够降低哮喘小鼠肺组织IL-6、TGF-β_(1),与地塞米松比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),调节IL-10、IL-17A,与地塞米松组相当(均P>0.05);Th17/Treg细胞量,RORγt、Foxp3的蛋白表达量,与地塞米松相当(均P>0.05)。与哮喘模型组比较,疏肝平喘方组、地塞米松组的TGF-β_(1)、Smad2、Smad3的mRNA表达水平下降,而Smad7的mRNA表达水平升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:疏肝平喘方在改善气道炎症方面,和地塞米松疗效相当,是通过TGF-β_(1)/Smad信号通路,从而调节哮喘小鼠的Th17/Treg免疫平衡。

燥湿祛痰平喘方联合西药治疗痰浊阻肺型支气管哮喘30例疗效分析

目的:探讨自拟燥湿祛痰平喘方对支气管哮喘(BA)痰浊阻肺证的临床效果。方法:纳入BA痰浊阻肺证患者共计60例,随机分成两组各30例。对照组行常规治疗措施;观察组在对照组基础上采取自拟燥湿祛痰平喘方治疗。两组连续治疗4周。比较两组疗效、哮喘控制测试量表(ACT)评分、哮喘相关症状评分、肺功能改善情况。结果:治疗4周后,观察组总有效率与对照组相比显著提升(P<0.05);两组ACT评分明显增加,但观察组增加更显著(P<0.01);两组哮喘症状评分显著减少,但观察组减少更显著(P<0.01);两组第1秒用力呼气容积(FEV1)、FEV1/用力肺活量(FVC)明显增加,且观察组增加更显著(P<0.01)。结论:自拟燥湿祛痰平喘方治疗BA痰浊阻肺证的疗效显著,能控制哮喘症状,改善肺功能。

一气周流理论下的温肺降逆平喘方辅助治疗小儿支气管哮喘发作期的效果观察

目的:分析一气周流理论下的温肺降逆平喘方辅助治疗小儿支气管哮喘发作期的效果。方法:纳入113例支气管哮喘发作期患儿为观察对象,按随机数字表法分为两组。对照组56例给予布地奈德治疗,观察组57例增加温肺降逆平喘方治疗。对比两组患儿临床疗效、肺功能指标、炎症相关指标因子。结果:观察组总有效率高于对照组,且患儿肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、呼气流量峰值(PEF)水平均高于对照组(P<0.05);治疗后,观察组患儿血清白细胞介素4(IL-4)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、血清胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)水平均低于对照组(P<0.05)。结论:一气周流理论下的温肺降逆平喘方辅助治疗小儿支气管哮喘发作期效果确切,能够调节TSLP水平,改善炎症相关因子水平。

小儿平喘方对儿童咳嗽变异性哮喘肺功能的保护作用及机制研究

目的:探讨小儿平喘方对儿童咳嗽变异性哮喘(CVA)肺功能的保护作用及其作用机制。方法:选取2022年1月至10月嘉兴学院附属嘉兴市第二医院收治的CVA患儿120例,随机分为对照组(n=60)与观察组(n=60)。对照组给予常规西药治疗,观察组加用自拟小儿平喘方治疗,疗程4周。对比两组临床疗效,治疗前后评价中医证候积分,检测肺功能指标(FVC、FEV_(1)、FEV_(1)/FVC、PEF)及血清炎症因子(IL-4、IL-13、TNF-α、TGF-β_(1)、EOS)、免疫球蛋白(IgA、IgE、IgM)。结果:治疗2、4周,观察组的中医证候积分显著低于对照组(P<0.05)。治疗4周后,观察组的咳嗽缓解时间、咳嗽控制时间显著短于对照组,咳嗽复发率及咳嗽复发频次显著低于对照组(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后两组患者FVC、FEV_(1)、FEV_(1)/FVC、PEF、IL-4、IL-13、TNF-α、TGF-β_(1)、EOS、IgA、IgM、IgE均显著改善(P<0.05),且观察组各指标改善程度均显著优于对照组(P<0.05)。观察组的总有效率(98.33%)显著高于对照组(81.67%)(P<0.05)。结论:小儿平喘方治疗儿童CVA有利于提高疗效,降低咳嗽复发风险,保护肺功能,其机制可能与抗炎及免疫调节有关。

小儿平喘方治疗小儿支气管哮喘急性发作患儿的临床效果及对肺功能的影响

目的探究小儿支气管哮喘急性发作患儿应用小儿平喘方治疗的临床效果及对肺功能的影响。方法选取2020年1月至2021年12月苏州市中西医结合医院的82例小儿支气管哮喘急性发作患儿作为研究对象,采取随机数字表法将其分为对照组(41例)和观察组(41例)。对照组患儿采用布地奈德混悬液治疗,观察组患儿采用布地奈德混悬液^(+)小儿平喘方治疗。比较两组患儿的临床疗效、临床症状评分、肺功能、免疫功能相关指标、血清炎症因子以及不良反应。结果观察组患儿的治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患儿治疗后的喘息、咳嗽、哮鸣音等临床症状评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患儿治疗后的第一秒用力呼气容积(FEV1)、一秒率(FEV1/FVC)、最大呼吸流量(PEF)水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患儿治疗后的CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患儿治疗后的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患儿的不良反应总发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论小儿支气管哮喘急性发作患儿予小儿平喘方治疗,疗效优良,能够有效改善患儿肺功能,且安全有效,推荐使用。

止哮平喘方联合子午流注针灸辅治老年支气管哮喘急性发作临床观察

目的:观察止哮平喘方联合子午流注针灸辅治老年支气管哮喘(BA)急性发作的临床效果。方法:90例按随机数字表法分为两组各45例。两组均予以常规西药治疗,观察组加用止哮平喘方联合子午流注针灸治疗。结果:总有效率观察组高于对照组(P<0.05)。观察组用力肺活量(FVC)、呼气峰值流速(PEF)、1s用力呼气容积(FEV1)、FEV1/FVC均高于对照组(P<0.05),白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平均低于对照组(P<0.05),喘息、呼吸困难、咳嗽及哮鸣音消失时间短于对照组(P<0.05)。结论:止哮平喘方联合子午流注针灸辅治老年BA急性发作可提高治疗效果,且安全。

疏肝平喘方治疗小儿咳嗽变异性哮喘的临床研究

目的观察疏肝平喘方治疗小儿咳嗽变异性哮喘(CVA)肝气犯肺证的临床疗效。方法将88例咳嗽变异性哮喘肝气犯肺证患儿随机分为2组,治疗组与对照组各44例,治疗组以疏肝平喘方颗粒剂口服,对照组以顺尔宁口服,2组均治疗2周,比较治疗前后2组咳嗽症状、中医证候积分、外周血嗜酸性粒细胞(EOS)百分比、血清总免疫球蛋白E(总IgE)、血清白介素-6(IL-6)。结果 2组疗效比较,治疗组优于对照组(P<0.05)。2组治疗后日间咳嗽程度、夜间咳嗽程度均较治疗前有所改善(P<0.05~0.01),治疗后2组差异无统计学意义(P>0.05)。2组治疗后主要证候积分,次要证候积分、证候积分较治疗前有所改善(P<0.05~0.01),2组次要证候积分、证候总积分比较有显著性差异(P<0.05~0.01),治疗组优于对照组。对照组气促、咳痰、鼻涕、喷嚏、睡眠较治疗前有所改善,差异有统计学意义(P<0.05~0.01),治疗组气促、咳痰、鼻涕、喷嚏、睡眠、食欲、大便较治疗前有所改善,差异有统计学意义(P<0.01),治疗组对咳痰、鼻涕、喷嚏、食欲、大便症状的改善上优于对照组(P<0.01)。2组治疗后EOS百分比、总IgE、IL-6均较治疗前有所改善(P<0.01),2组间EOS百分比具有显著性差异(P<0.01)。结论疏肝平喘方对小儿CVA具有良好的临床疗效,能够减轻咳嗽症状,改善中医证候,抑制气道炎症,其机制值得进一步研究。

平喘方对支气管哮喘模型小鼠气道重建的影响

目的:通过研究平喘方对支气管哮喘模型小鼠外周血和支气管肺泡灌洗液(bronchoalveo larlavage fluid,BALF)巨噬细胞炎性蛋白-1α(macrophage inflammatory protein-1α,MIP-1α)和免疫球蛋白E(immuno-globulin E,IgE)含量及CD86分子表达的影响,探索平喘方对小鼠支气管哮喘模型气道重建的作用机制。方法:采用卵清白蛋白腹腔注射和雾化吸入致敏,建立BALB/c小鼠支气管哮喘模型。50只雄性BALB/c小鼠随机分为空白对照组、哮喘模型组、地塞米松组和平喘方小剂量、常规剂量组,每组10只。造模后4周,予相应药物灌胃治疗8周。用亲和素-生物素复合物酶联免疫吸附测定法检测外周血和BALF中MIP-1α水平;用酶联免疫吸附测定法检测血清和BALF中IgE水平;直接免疫荧光流式细胞术检测外周血和BALF中CD86+、CD3-CD86+细胞百分率;利用普通光学显微镜观察支气管哮喘模型小鼠肺组织病理学改变。结果:模型组外周血和BALF中MIP-1α、IgE含量及CD86+、CD3-CD86+细胞百分率均明显高于空白对照组(P<0.01);治疗8周后,各治疗组外周血和BALF中MIP-1α、IgE含量和CD86+、CD3-CD86+细胞百分率均明显低于模型组(P<0.01);各治疗组之间两两比较,外周血和BALF中MIP-1α和IgE含量差异无统计学意义(P>0.05),平喘方小剂量组外周血中CD3-CD86+细胞百分率高于地塞米松组(P<0.05)。肺组织病理显示,各治疗组细支气管壁上胶原纤维较模型组明显减少。结论:平喘方能降低支气管哮喘模型小鼠MIP-1α和IgE水平,下调CD86分子表达,这可能是平喘方减轻支气管哮喘模型小鼠的症状,改善支气管哮喘气道炎症的作用机制之一。

温阳益气化痰平喘方治疗支气管哮喘慢性持续期45例临床观察

目的:探讨温阳益气化痰平喘方对支气管哮喘慢性持续期的临床疗效。方法:将符合标准的90例支气管哮喘慢性持续期患者随机分为两组,对照组45例,给予沙美特罗氟替卡松粉吸入剂吸入治疗;治疗组45例,在对照组基础上加用温阳益气化痰平喘方。于治疗前后分别观察患者临床症状、体征并评分,检测治疗前后肺功能的变化及安全性指标。结果:治疗组和对照组临床总有效率分别为93.3%和88.9%;中医证候总有效率分别为93.3%和80.0%,治疗组优于对照组(P<0.05);两组FEV1%、PEF治疗前后比较有差异,治疗组优于对照组,有统计学意义(P<0.05),安全性指标检测无异常。结论:温阳益气化痰平喘方能有效改善支气管哮喘慢性持续期患者临床症状、体征和肺功能,且无明显毒副作用。

中药止哮平喘方抗哮喘豚鼠模型气道炎症的实验研究

[目的] 探讨中药止哮平喘方(主要由法半夏、瓜蒌皮、薤白、白芍、柴胡、黄芩、麻黄、枳壳、射干、甘草等中药组成)对哮喘豚鼠模型气道炎症的影响。[方法]复制卵蛋白致敏哮喘模型,观察支气管及肺的病理学改变;测量全血及肺泡灌洗液(BALF)中血细胞计数;免疫组织化学法测定外周血单核细胞(PBMC)中CD_4^+、CD_8^+T细胞的含量。[结果]病理研究显示哮喘模型组豚鼠气道周围大量炎性细胞浸润,以嗜酸性粒细胞(EOS)和淋巴细胞为主。哮喘模型组全血及BALF中炎性细胞数显著高于正常组(P<0.01);中药大剂量组和西药对照组炎性细胞数均显著降低(P<0.05或P<0.01)。哮喘模型组CD_4^+T细胞高于正常组(P<0.05);中药大剂量组和西药对照组CD_4^+ T细胞均有下降(与哮喘模型组比较,P<0.05)。[结论] 中药止哮平喘方能降低气道及外用血炎性细胞的数量,具有抗气道炎症的作用;降低CD_4^+细胞数量,相对增加CD_8^+ T细胞,使CD_4^+/CD_8^+恢复正常状态,从而起到调节其紊乱的免疫功能状态的作用,这可能是止哮平喘方抗气道炎症的作用机理之一。

止哮平喘方对哮喘大鼠气道高反应性的影响

目的探讨止哮平喘方对哮喘大鼠模型气道高反应性的影响。方法 SD大鼠60只,随机分正常对照组、哮喘模型组、地塞米松治疗组、止哮平喘方小、中和大剂量组,每组10只。采用卵蛋白(OVA)致敏和激发方法复制哮喘大鼠模型,观察给药后各组大鼠的症状积分、肺溢流量和离体气管条对乙酰胆碱的收缩反应。结果哮喘模型大鼠出现明显哮喘症状,其症状积分明显高于其他各治疗组(P<0.05,P<0.01)。止哮平喘方各治疗组大鼠肺溢流量变化值均明显低于哮喘模型组(P<0.05,P<0.01)。止哮平喘方各治疗组大鼠气管螺旋条对乙酰胆碱的收缩反应均明显低于哮喘模型组(P<0.05,P<0.01)。结论止哮平喘方可以通过松弛气道平滑肌,降低气道高反应性而发挥平喘作用。

平喘方对支气管哮喘小鼠肺组织microRNA126与GATA-3表达的影响

目的通过观察平喘方(麻黄、苦杏仁、紫苏子、桃仁、莱菔子、黄芩等)对支气管哮喘模型小鼠肺组织中microRNA126与GATA-3表达的影响,阐释平喘方改善气道炎症的作用机制。方法采用10%鸡卵白蛋白腹腔注射致敏和5%卵白蛋白雾化吸入激发,建立BALB/c小鼠支气管哮喘模型。40只雄性BALB/c小鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组和平喘方组,每组10只,治疗4周后采集小鼠肺组织,用光学显微镜观察小鼠肺组织的病理学改变。用聚合酶链式反应测定肺组织中microRNA126与GATA-3 mRNA的表达量。结果平喘方可以有效降低microRNA126,负向调控GATA-3的表达量,减轻支气管哮喘模型小鼠的症状,其作用与地塞米松组相当。结论平喘方对microRNA126的干预可能是降低GATA-3的一个切入点,从而达到抑制TH2过度表达,改善气道炎症。

从祛瘀化痰法探讨平喘方及拆方对哮喘小鼠Th1/Th2免疫失衡的干预机制

目的研究平喘方及拆方干预哮喘小鼠Th1/Th2免疫失衡的作用机制,并探究"化痰"与"祛瘀"两种治法干预气道炎症的疗效。方法对60只BALB/c雄性小鼠按随机数字表分为空白对照组、哮喘模型组、地塞米松组、平喘方组、拆方1(祛瘀方)组、拆方2(化痰方)组共6组,每组10只,运用卵蛋白(OVA)和氢氧化铝腹腔注射致敏并雾化吸入激发,建立小鼠支气管哮喘模型,末次激发后给药7 d并杀检取材,运用HE染色观察各组小鼠气道及肺组织病理改变,酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠肺泡灌洗液(BALF)中白介素4(IL-4)、干扰素γ(INF-γ)、白介素17(IL-17)、白介素10(IL-10)表达,蛋白质印迹法法(Western Blot)检测肺组织中转录因子GATA结合蛋白3(GATA-3)、T盒子转录因子(T-bet)蛋白表达。结果与空白组比较,模型组病理染色显示炎症细胞侵润明显,管壁及肺组织结构受到破坏,周围组织伴有炎性物质渗出,IL-4、IL-17、GATA-3表达增高(P<0.05),INF-γ、IL-10、T-bet表达减低(P<0.05)。与模型组对比,平喘方及拆方组可显著减少病理染色中的气道炎症程度,减低IL-4、IL-17、GATA-3表达(P<0.05),升高INF-γ、IL-10、T-bet表达(P<0.05),拆方组间比较祛瘀方在改善气道病理优于化痰方,在降低IL-4、IL-17、GATA-3因子水平具有优于化痰方的统计学趋势。结论:平喘方及拆方可减少哮喘小鼠IL-4、IL-17、GATA-3表达,升高INF-γ、IL-10、T-bet表达,改善Th1/Th2免疫失衡,祛瘀与化痰两种治法相比较,祛瘀法在改善气道炎症方面疗效较优。

平喘方对支气管哮喘模型小鼠巨噬细胞炎性蛋白-1α水平及CD86分子表达的实验研究

目的通过研究哮喘模型小鼠巨噬细胞炎性蛋白-1α水平及CD86分子表达的影响,探索平喘方防治支气管哮喘的作用机制。方法通过对BALB/C小鼠用卵蛋白等腹腔注射致敏、雾化吸入激发,建立支气管哮喘小鼠模型。150只BALB/C小鼠随机分为5组,在激发哮喘7d、14d、21d时,用双抗体夹心ABC-ELISA法检测外周血和BALF中巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)水平,直接免疫荧光流式细胞术检测外周血和BALF中CD86+、CD3-CD86+细胞百分率,观察肺组织病理学改变。结果哮喘激发7d:各治疗组外周血和BALF中MIP-1α水平、CD86+细胞百分率均明显低于模型组(P<0.01);外周血CD3-CD86+细胞百分率明显均明显低于模型组(P<0.01);哮喘激发14d:各治疗组外周血和BALF中CD3-CD86+细胞百分率均明显低于模型组(P<0.01);平喘方常规剂量组、地塞米松组外周血和BALF中MIP-1α水平均明显低于模型组(P<0.01);哮喘激发21d:各治疗组外周血和BALF中MIP-1α水平、CD3-CD86+细胞百分率均明显低于模型组(P<0.01)。肺组织病理显示,各治疗组细支气管壁结构完好,管腔内少量炎性渗出物,管周少量炎细胞浸润。肺组织胶原染色图像分析显示,各治疗组面积与光密度乘积较模型组明显减少(P<0.01)。结论平喘方能显著降低MIP-1α水平、下调CD86分子表达、减轻气道黏膜上皮损伤,减少气道炎细胞浸润,减轻支气管壁及周围间质充血、水肿,具有减轻哮喘发病症状,改善哮喘气道炎症的作用。

平喘方对哮喘模型小鼠气道平滑肌内TLR4mRNA和蛋白及相关炎症因子水平的影响

目的：通过研究平喘方对哮喘模型小鼠支气管平滑肌Toll样受体4（Toll-likereceptors,TLRs） mRNA及蛋白和肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BA LF）中白介素6（Interleukin 6,IL-6）、白介素10（Interleukin 10,IL-10）、白介素17（Interleukin 17,IL-17）因子水平的影响,进一步探索平喘方治疗哮喘和干预气道炎症的作用机制。方法：对40只BALB/c雄性小鼠用卵蛋白（ovalbumin,OVA）和氢氧化铝腹腔注射致敏并雾化吸入激发,建立小鼠支气管哮喘模型。40只小鼠随机分为空白对照组、哮喘模型组、地塞米松组、平喘方组4组,每组10只。给药期间记录并观察各组小鼠基本情况,给药28天后取材,运用逆转录PCR法（Realtime-PCR）及蛋白质印迹法法（Western Blot）检测哮喘模型小鼠支气管平滑肌TLR4的mRNA和蛋白水平表达,酶联免疫吸附法（Elisa）检测BALF中IL-6、IL-17、IL-10的因子水平。结果：治疗28d后,哮喘模型组TLR4mRNA水平高于明显高于其他各组（P 〈0. 01）;空白组水平与平喘方组mRNA水平无差异（P〉 0. 05）。哮喘模型组TLR4蛋白WB灰度值高于平喘方组（P 〈0. 05）;平喘方组TLR4蛋白WB水平高于地塞米松组（P 〈0. 05）。哮喘模型组IL-6、IL-17因子水平明显高于其他组（P 〈0. 01）;平喘方组IL-6、IL-17因子水平明显高于地塞米松组（P 〈0. 01）。哮喘模型组IL-10因子水平明显低于其他组（P 〈0. 01）;空白组IL-10水平明显高于其他组（P 〈0. 01）;平喘方组IL-10与地塞米松组因子水平无差异（P〉 0. 05）。结论：平喘方可以减少气道平滑肌内TLR4mRNA的表达,以降低TLR4蛋白水平,进而影响肺内炎症因子IL-6、IL-17、IL-10的分泌,缓解哮喘模型小鼠的气道炎症。