便塞通合剂对便秘大鼠模型AQP3表达的影响

目的:采用复方地芬诺酯灌胃建立慢性便秘大鼠模型,观察便塞通合剂对慢性便秘模型大鼠AQP3表达的影响。方法:健康SD大鼠60只,随机分为5组,空白对照组、模型组、麻仁丸治疗组、莫沙比利治疗组、便塞通合剂治疗组。模型组及各治疗组采用配制好的含复方地芬诺酯10 mg/kg混悬液4 mL灌胃,建立大鼠慢性便秘模型。正常对照组则以等量生理盐水替代复方地芬诺酯进行灌胃。模型建立后,治疗组分别以麻仁丸、莫沙比利和便塞通合剂灌胃治疗。治疗结束后,采用免疫组织化学SP法检测正常对照组、模型组及治疗各组AQP3在结肠的分布和表达情况,应用彩色病理图像分析系统对阳性表达的平均光密度值(MD)进行半定量比较分析。结果:①发现在正常对照组和慢传输便秘模型组大鼠的结肠黏膜层均有AQP3表达;②模型组AQP3平均光密度值高于空白对照组,两组比较有显著差异(P<0.05)。③与模型组相比,便塞通合剂治疗组能能抑制AQP3在大鼠结肠黏膜层的表达(P<0.05)。结论:便塞通合剂能抑制AQP3在大鼠结肠黏膜层的表达,其表达降低可能导致结肠对水分的吸收减少和(或)肠液分泌增加,从而治疗慢性便秘。

IgA肾病患者肾组织内synaptopodin的表达对肾功能评价的临床意义

目的观察synaptopodin在IgA肾病患者肾组织中的表达,并探讨其在肾功能评价中的意义。方法分析202例IgA肾病患者的肾活检组织标本,按Lee分级系统分为Ⅰ～Ⅴ5级,采用99mTc-DTPA清除率测定肾小球滤过率。对选取的样本经抗人synaptopodin单克隆抗体间接免疫荧光染色。用免疫荧光显微镜观察及图像分析软件定量分析肾组织中synaptopodin的表达情况,测量平均光密度值,然后进行统计学分析。结果 5级IgA肾病患者肾组织中synaptopodin所表达的平均光密度值组间差异有统计学意义(P<0.01),病理组织中synaptopo-din所表达的平均光密度值与肾小球滤过率呈正相关(r=0.962,P<0.01)。结论与传统的评估指标比较s,yn-aptopodin在Ⅰ～Ⅴ级IgA肾病肾脏病理组织中的表达逐渐减少,其表达与肾小球滤过率呈正相关。synaptopodin在肾组织中的表达可评价肾功能的变化。

ABC-ELISA检测华支睾吸虫抗体的动态研究

本文报道了用ABC-ELISA观察人工感染华支睾吸虫家兔血清特异性抗体的变化。结果表明,抗体最早出现阳性时间在感染后第14d,轻、重感染组抗体高峰时间分别在第10周和第8周,以后呈下降趋势。抗体水平与虫卵计数呈直线正相关,重感染组平均阳性时间提前,平均光密度值(OD)高。实验结果还表明,抗体应答表现与宿主个体反应性有关,但主要取决于感染度。

散血明目片对兔视网膜静脉阻塞后视网膜组织中诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的探讨活血通脉利水明目之散血明目片对兔视网膜静脉阻塞(RVO)模型的干预作用。方法取健康有色家兔18只分为3组,每组6只,分别为:正常对照组、模型组、散血明目片组。造模后14天用空气栓塞法将动物处死,采用免疫组化法观察视网膜组织中诱导型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase,iNOS)的表达情况。结果 3组的平均光密度值和平均灰度值的组间比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。平均光密度值越低,其对应的iNOS表达就越弱;平均灰度值越低,其对应的iNOS表达就越强。结论散血明目片可以减弱兔RVO模型由于缺氧而诱导的视网膜iNOS表达,从而减轻NO过量生成对视网膜神经细胞造成的毒害作用。

皂化技术在粘液染色中的应用

皂化技术在粘液染色中的应用田玉旺，丁华野，邢惠清，黄成南，李景仁北京军区总医院病理科北京１００７００北京卫戍区２９２医院病理科粘液的存在与否以及不同的染色反应在病理工作中常常可以做为鉴别和诊断某些疾病和病变的重要依据。在常规粘液组织化学染色中，显示胃...

血红素氧合酶-1在结直肠癌中的过表达与意义

目的:检测血红素氧合酶-1(heme oxygenase,HO-1)在良、恶性结直肠组织中的表达情况,探讨其在结直肠肿瘤发生发展中的作用。方法:采用免疫组化的方法检测118例结直肠癌、17例结直肠炎性息肉及20例结直肠癌周围正常组织患者的石蜡标本中HO-1的表达情况,使用图像分析系统测定阳性细胞的平均光密度值。结果:结直肠癌组织HO-1的平均光密度值随着肿瘤分化程度提高而上升,结直肠癌组织HO-1的平均光密度值高于炎性息肉及直肠癌周围良性组织,差异有统计学意义(P<0.05)。结直肠癌组织HO-1的平均光密度值与性别、TNM分期及淋巴结转移无关。结论:HO-1在结直肠癌中呈现高表达,与结直肠良性病变及癌变存在相关性,可能与结直肠癌的发生、发展及预后有关联。

不同保存时间宫颈液基细胞制作的蜡块对免疫组织化学染色的影响

免疫组织化学技术在病理组织检查中已得到普遍应用,提高了病理组织诊断的准确性[1]。但在免疫组织化学染色过程中存在多种因素影响其结果的稳定性及准确性,如样本的固定、保存时间和染色操作等。在日常工作中,胸、腹腔积液等体液的细胞蜡块制作技术以及免疫组织化学染色已被广泛应用,利用宫颈液基细胞(TCT)样本细胞蜡块制作技术的应用报道也逐渐增多。

NRF2/HO-1因子与结直肠肿瘤TNM分期的相关性研究

目的:检测NRF2、血红素氧合酶-1(heme oxygenase,HO-1)在结直肠癌、转移淋巴结及肝脏转移灶中的表达情况,探讨它们在结直肠肿瘤发生发展及转移(TNM分期)中的作用。方法:采用免疫组化的方法检测84例结直肠癌、6例结直肠炎性息肉、10例正常肝脏组织的石蜡标本中的NRF2、HO-1因子表达情况,使用图像分析系统测定阳性细胞平均光密度值。结果:根据NRF2/HO-1因子在肠癌中的表达情况得出散点图的Pearson相关性=0.876,提示两因子显著相关;结直肠癌组织NRF2/HO-1的平均光密度值高于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05);结直肠癌组织NRF2/HO-1的平均光密度值随着临床病理分期程度和病理分化程度的提高而升高(P<0.05);在结直肠组织及转移淋巴结中NRF2/HO-1的平均光密度值都按照N分期(N1-N2)逐渐递增(P<0.05);在肝脏转移灶中NRF2/HO-1的平均光密度值高于正常肝脏组织(P<0.05);NRF2/HO-1的平均光密度值与年龄、性别、T分期无关。结论:NRF2/HO-1在结直肠癌、转移淋巴结及肝脏转移灶中呈现高表达,可能与结直肠恶性肿瘤发生发展存在关系,是判断结直肠癌的发生、发展及预后的有效指标。

黄芪增液汤对便秘大鼠结肠AQP9的表达影响

目的:采用复方地芬诺酯灌胃建立津亏便秘大鼠模型,观察黄芪增液汤对便秘模型大鼠水通道蛋白-9(Aquaporin 9,AQP9)表达的影响。方法:健康(Sprague-Dawley,SD)大鼠50只,随机分为5组,空白组、模型组、伊托必利组、黄芪增液汤高、中、低剂量组。模型组及各治疗组采用限水+复方地芬诺酯灌胃复制津亏便秘模型,造模成功后,模型组以0.9%氯化钠注(NaCl)灌胃,每日1次。治疗组分别给予设定剂量和配比的增液汤和莫沙必利,每日1次(剂量依体质量而定),连续12天。治疗结束后,采用免疫组织化学链霉亲和素-生物素复合物(Strept Avidin-biotin Complex,SABC)法检测空白组、模型组及治疗各组AQP9在结肠的表达情况,应用彩色病理图像分析系统对阳性表达的平均光密度值(Density Mean,MD)进行半定量比较分析。结果:①AQP9在各组大鼠结肠黏膜均有表达,主要表达于杯状细胞胞膜,部分杯状细胞淡然,染色呈棕褐色,胞核无染色;②模型组AQP9表达显著降低,着色浅,MD值显著下降,与空白组比较差异有统计学意义(P<0.05);③伊托必利组、中药高、中、低剂量组均较模型组细胞阳性表达量高,各组与空白组比较表达量低,MD值差异有统计学意义(P<0.05);④中药低、中剂量组、伊托必利组两两比较,表达量无统计学意义(P>0.05),中药高剂量组表达量较低、中剂量组、伊托必利组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:①便秘大鼠结肠黏膜AQP9表达量显著降低,这可能是肠道液体分泌减少,导致便秘"津亏"的根源所在。②黄芪增液汤能上调便秘大鼠结肠黏膜AQP9表达,尤其以黄芪增液汤高剂量组升高明显,提示黄芪增液汤可能是以通过提高结肠AQP9表达来达到其对便秘"增液行舟"机制的。

反义RhoC基因对胆管癌QBC939细胞株基质金属蛋白酶-9的抑制作用

目的 探讨反义RhoC基因对胆管癌QBC939细胞株的金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响.方法 通过质粒转染的方法向QBC939细胞中转染反义RhoC cDNA真核表达载体pcDNA 3.1Hyp(+)质粒,RT-PCR和Western-Blot检测MMP-9在QBC939细胞、转染空载体的QBC939细胞(QBC939-V)、转染反义RhoC的QBC939细胞(QBC939-AS)的mRNA和蛋白相对表达量.结果 对照组细胞QBC939中MMP-9 mRNA和蛋白的平均光密度值分别为(0.265±0.059)和(0.242±0.063),QBC939-V细胞中MMP-9 mRNA和蛋白的平均光密度值分别为(0.257±0.039)和(0.303±0.031),而反义RhoC cDNA质粒转染组细胞中MMP-9 mRNA和蛋白的平均光密度值分别为(0.125±0.062)和(0.095±0.043);对照组中MMP-9 mRNA和蛋白的平均光密度值均高于反义RhoC转染组,统计学分析表明在QBC939-AS组和对照组之间,MMP-9的平均光密度值差异有统计学意义(P<0.05).结论 反义RhoC基因在QBC939细胞株中可以抑制MMP-9表达.

不同切应力下血管内皮整合素αVβ_3的表达

目的对离体培养血管施加不同水平切应力,观察不同时间点整合素αVβ3(αVβ3-Integrin)的表达水平。方法 (1)建立血管体外应力培养系统,检测不同切应力时流场的稳定性;(2)将家兔50只按完全随机分组方式分为两组(n=25):低切应力组(5 dyn/cm2)和正常切应力组(20 dyn/cm2),每组再完全随机等分为2 h、4 h、8 h、16 h和24 h共5个时间点(n=5),取兔降主动脉并将其置于应力培养系统进行离体培养,采取免疫组织化学染色法观察两组5个不同时间点的整合素αVβ3表达部位及强度。结果建立的体外血管应力培养系统运行稳定,能够提供实验所需的各种切应力。低切应力组的整合素αVβ3在5个时间点都有较高程度的表达,并在16 h时达到高峰,其平均光密度值[MOD=(1.995±0.194)×10-2]明显增高(P<0.05);正常切应力组随时间的增加逐渐减少,2 h[(0.059±0.005)×10-2]、4 h[(0.049±0.002)×10-2]时分别与其他时间点相比差异有统计学意义(P<0.05)。低切应力组的整合素αVβ3MOD值与正常切应力组相同时间点比较明显增高(P=0.000)。结论低切应力可引起αVβ3明显表达,而正常切应力抑制αVβ3的表达。

Hif-1α、VEGF和iNOS在大通牦牛肺组织中表达的相关性分析

为阐明高原牦牛适应低氧环境时肺脏血管低氧相关因子在不同发育阶段表达变化的特点,试验选取1日龄、30日龄、180日龄和成年四个发育阶段的大通牦牛,运用免疫组织化学方法,对低氧诱导因子1α(Hif-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在肺脏组织中的表达进行测定。结果表明:随着年龄增长,大通牦牛肺脏组织中Hif-1α的阳性率表现为先升高后降低再升高的特点,各发育阶段之间差异显著(P<0.05);Hif-1α的平均光密度值表现为先升高后降低再升高的趋势,除1日龄和180日龄差异不显著(P>0.05)外,其余各发育阶段之间差异显著(P<0.05)。肺脏组织中VEGF的阳性率和平均光密度值均表现为先降低再升高的趋势,各发育阶段之间差异显著(P<0.05)。iNOS的阳性率表现为先降低再升高的趋势,各发育阶段之间差异显著(P<0.05);平均光密度值随着年龄增长,表现为先降低再逐渐升高的趋势,除180日龄与其他各发育阶段均差异显著外(P<0.05),其余各发育阶段之间差异不显著(P>0.05)。说明Hif-1α对下游基因的调控和下游基因的转录、翻译可能不同步。

免疫组化检测绵羊肺腺瘤中醛缩酶A的表达

本研究应用免疫组织化学方法检测了绵羊肺腺瘤和正常肺组织中醛缩酶A的表达情况。通过采用Image-Pro Plus图像分析软件对醛缩酶A表达的光密度和阳性单位(PU)进行定量测试。结果显示,醛缩酶A在正常肺组织的支气管上皮细胞、个别肺泡上皮细胞和肺腺瘤的肿瘤细胞的细胞质中均有明显表达,醛缩酶A在绵羊肺腺瘤组的平均光密度值明显高于正常绵羊肺组织组(P<0.05),醛缩酶A在OPA组的PU值(阳性单位)极显著高于正常绵羊肺组织组(P<0.01)。表明醛缩酶A在OPA中过表达。