平板划线法分离微生物纯种的一个经验

纯种分离,是任何微生物学实验中最常用的技术。纯种分离方法有两类,一是单细胞(或孢子)分离,二是单菌落分离。后者因方法简便,且不需要特殊的仪器设备,所以是一种常规的分离方法。通过形成单菌落以获得纯种的具体方法甚多,如平板划线分离法,平板表面涂布分离法,以及浇注平板培养基作稀释分离的方法等。其中最常用的为平板划线分离法。这种方法是把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞,通过在固体培养基平板表面作多次的由点到线的划线稀释,从而得到许多独立分布的细胞,再经适当培养后,每一细胞就发展成一个菌落。

酶标仪分光光度法在微生物耐性研究上的应用

微生物在环境中的耐性是该微生物在相应环境发挥作用的重要基础。为了获得一种用于微生物耐性分析的快速简便方法,传统平板分离法和酶标仪分光光度法被用于评估其在细菌和链霉菌紫外耐受水平检测中的差异,并分析了酶标仪分光光度法在微生物其他耐性水平检测中的适用性。结果显示,两种检测方法均能体现细菌和链霉菌对紫外线的耐受水平,前者经过稀释、涂布、培养、菌落计数,获得的是菌株在紫外线照射后的存活浓度,而后者经过接种96孔培养板、培养、吸光度检测,获得的是菌株经紫外线照射后的生长曲线,并从生长曲线获知菌株的生长速率、增殖能力等信息。此外,酶标仪分光光度法同样适用于细菌对pH和盐的耐受水平分析,对于链霉菌耐受性分析有一定的适用性。酶标仪法除了能获得与平板分离法相似的耐性水平检测外,还能获得菌株在不同耐性水平上的增殖潜力,且在操作上比平板分离法省时、省力,可用于微生物耐性分析、高通量筛选等研究工作。

木聚糖酶产生菌的选育

经过两步平板分离法,筛选到1株木聚糖酶高产菌,三角瓶发酵培养后,测得该菌的酶活力为0.2535U/mL,酶最适反应温度为60℃,最适反应的pH值为6.0。