应用平板显色法测定单宁酶活力

为直观、批量、准确测定单宁酶的活力,以单宁酸为底物,溴甲酚绿为显色剂,采用平板显色法测定单宁酶的活力.对单宁酸浓度、溴甲酚绿浓度、琼脂浓度、酶加量以及反应时间的分析结果显示,平板组成为1%单宁酸、0.001%溴甲酚绿、3%琼脂,酶加量为30μL,40℃下反应24 h,透明圈清晰度最高,获得标准曲线的决定系数为98%,验证反应结果显示该方法准确、稳定.

Chrom ID ESBL显色平板对产ESBLs肠杆菌科细菌筛选作用的评估

目的评估新的产色培养基Chrom ID ESBL在检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌中的可靠性。方法用2组肠杆菌科细菌进行评估,一组为285株上海地区检出的临床分离株,这些菌株已用美国临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐的确证试验确认了是否产ESBLs,另一组28株产ESBLs肠杆菌科细菌,在以前的研究工作中已确认了这些菌株的产酶特性和ESBLs基因型别。结果Chrom ID ESBL能有效地检测产ESBLs的肠杆菌科细菌。结论Chrom ID ESBL是一种可靠的产ESBLs肠杆菌科细菌的筛选培养基。

一种B群链球菌显色平板临床应用研究

目的评估B群链球菌显色平板的临床应用价值。方法 1 510份孕妇阴道分泌物标本同时接种B群链球菌显色平板和血平板,以VITEK2COMPACT鉴定结果为准。结果血平板培养检出152株B群链球菌阳性,B群链球菌显色平板检出155株B群链球菌阳性,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 B群链球菌显色平板能够满足临床检测需要,操作方便,准确可靠,具有较强的临床应用价值。

显色平板在孕晚期孕妇B族链球菌筛查中的应用及B族链球菌耐药性分析

目的:评价B族链球菌(group B Streptococcus,GBS)显色平板在孕晚期孕妇GBS筛查中的效果及对阳性菌株进行耐药性分析,为新生儿GBS感染合理抗菌药物预防、治疗提供依据。方法:收集南方医科大学坪山总医院2020年4-12月产科门诊孕35~37周孕妇的阴道/直肠拭子1143份,放入GBS肉汤管进行增菌,然后分别接种GBS显色平板和血琼脂平板,对培养出的疑似菌落采用VITEK-2全自动细菌鉴定仪进行鉴定,对鉴定为GBS菌株进行药敏试验。结果:显色平板检出146株GBS,阳性率为12.77%;血琼脂平板检出115株GBS,阳性率为10.06%,两种方法的阳性率比较,差异有统计学意义(χ^(2)=4.16,P<0.05)。GBS对青霉素、万古霉素2种药物的敏感率均为100%,对利奈唑胺敏感率为99.32%,对四环素、红霉素、克林霉素、左旋氧氟沙星的耐药率分别是82.88%、63.01%、56.85%、19.18%。结论:显色平板可有效避免其他细菌的干扰,筛查GBS阳性率显著高于血琼脂平板,适合推广应用;青霉素仍可作为分娩期预防和治疗GBS感染的首选用药;克林霉素耐药率较高,应根据药敏试验结果选择用药。

用于检测水中重金属离子的平板移界显色电泳方法的建立

目的建立一种针对水中重金属离子的快速、准确、低成本的定量检测方法,为水质卫生监督监测提供简便、实用的方法。方法利用超分子显色剂对重金属离子进行特异性选择、显色的原理,自行设计平板移界显色电泳装置,并利用该装置检测水中重金属离子浓度。结果检测时,特定的超分子选择反应体系特异性地结合被测样品中的重金属离子后,在平板直流电泳中显色基团会移动并聚集到电泳槽内某一区域,发生肉眼可见的变化;显色区域的面积与被测重金属离子浓度存在相关性。结论成功设计了平板移界显色电泳装置,利用该装置实现了对水中镉离子的快速定量检测,单一样品的检测时间约为10 min,并可获得准确结果。

念珠菌显色平板的配制及其临床应用评价

目的:利用酶显色底物配制念珠菌显色平板,并评估其临床应用中的符合率、敏感性与特异性。方法:基础培养基沙保罗琼脂联合酶显色底物(H012、H026、H092),经过优化实验筛选最适宜配方,制备念珠菌显色平板,对112株临床分离株进行分离鉴定,并与API ID 32C鉴定结果比较。结果:白色念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌和克柔念珠菌在配制的显色平板中分别呈现绿色、紫色、蓝灰色和粉红色,48h鉴定结果与API ID 32C总体符合率98.0%,敏感性与特异性分别达98.0%、99.4%。结论:本实验室配制的念珠菌显色平板灵敏度强、特异性高,更经济合理,能简便快捷地初步鉴别常见念珠菌,符合临床标本检测需求。

尿道菌显色平板的敏感性与特异性验证

尿道菌显色平板是在普通培养基的基础上添加人工合成的特异性的酶底物,经目的菌酶系统的酶解作用释放出显色原而显色。具有生化反应和分离培养同时进行等特点,从而大大缩短了细菌鉴定时间。笔者对其敏感性和特异性进行了验证,并就其临床实验室应用情况介绍如下。

B群链球菌显色平板的初步应用评价

B群链球菌（group B streptococcus,GBS）为围产期母婴感染的主要致病菌之一。GBS传统检测方法费时费力,且存在假阴性。本研究旨在对一种新型的B群链球菌显色平板进行应用评价,现将结果报道如下。1材料与方法1.1研究对象选取2014年1~10月沈阳市妇婴医院产科门诊就诊的35~37孕周进行GBS筛查的孕妇共计1 108例,分别采集阴道分泌物标本。

PCR法和显色平板法检测B族链球菌的临床对比研究

目的探讨妊娠晚期孕产妇生殖道B族链球菌(GBS)的定植情况,并通过比较聚合酶链式反应(PCR)法和显色平板法鉴定GBS的特异性及灵敏度,得到适合实验室快速检测GBS的方法。方法 594例孕周35~40周的孕晚期妇女,取其阴道下段1/3处分泌物样本各两份,同时进行PCR法检测和显色平板法检测,并对结果进行质谱检测确认,比较两种方法的GBS检测阳性率及特异性和灵敏度。结果 594例孕晚期孕妇样本,PCR法和显色平板法检测结果一致的阳性共38例,不一致的共15例,经质谱检测确认,其中9例确认为GBS,另外6例分别为3例化脓性链球菌,2例解没食子酸链球菌,1例溶血性葡萄球菌。此次研究594例样本中确认GBS阳性47例,阳性率7.9%。PCR法检测阳性43例,阳性率为7.2%,经质谱确认,其中5例与显色平板法不一致,3例为化脓性链球菌,2例解没食子酸链球菌;显色平板法检测阳性48例,阳性率8.1%,其中10例与PCR法不一致,经质谱确9例为GBS,1例为溶血性葡萄球菌。两种方法的GBS检测阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。显色平板法灵敏度100.0%高于PCR法的80.9%,差异具有统计学意义(P<0.05);显色平板法特异性99.8%与PCR法的99.1%比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PCR法和显色平板法虽均能检出GBS,但显色平板法对于GBS的筛查有更高的阳性率和灵敏度。临床工作中采用显色平板培养的方法能提高GBS的检出率。

安图弧菌显色平板检验副溶血性弧菌的评价

目的评价安图弧菌显色平板检验副溶血性弧菌的可靠性。方法安图弧菌显色平板检验副溶血性弧菌与国标检验副溶血性弧菌的结果进行比较。结果安图弧菌显色平板与国标[1]检验结果相符。结论安图弧菌显色平板检验副溶血性弧菌的结果可靠。

GBS显色平板在基层医院的临床应用

目的 评价B群链球菌（GBS）显色平板在孕产妇中筛查GBS的临床应用价值.方法 2017年1月至6月孕产妇阴道/肛门拭子标本681份,同时接种于血平板（BAP）和GBS显色平板.结果 GBS显色平板的检出率、敏感性分别为7.34％、100％,优于血平板7.05％、96％,特异性一致均为99.84％.结论 GBS显色平板能够满足基层医院临床检测需求,操作方便,判断直观可靠,具有较强的临床应用价值.

耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌感染特征及改良显色平板筛查性能评价

目的了解耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)感染特征,并对改良显色平板在其筛查中的性能进行评价。方法收集2021年至2022年本院临床分离出的48株CRE菌株,同时选取20株碳青霉烯类药物敏感肠杆菌科细菌用于特异度的研究。采用PCR方法检测48株CRE菌株与20株碳青霉烯类药物敏感肠杆菌科细菌KPC、IMP、OXA-48、NDM、TEM的携带情况。分别制备三种改良显色平板,对比分析不同平板在耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌筛查中的性能。结果48株临床分离的CRE菌株中,主要为肺炎克雷伯菌(75.00%,36/48)。主要分离自痰液标本(56.25%,27/48),其他依次来源于血液标本、中段尿标本、肺泡灌洗液标本、胸腹腔积液标本、导管尖端标本、分泌物标本、脑脊液标本。29株分离自重症监护病房,8株分离自呼吸科,3株分离自神经外科,肾内科、普外科各2株,烧伤科、血液科、骨科、肿瘤科各1株。36株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌中,28株检出KPC型基因,4株检出NDM型基因,2株检出IMP型基因,2株检出KPC+NDM型基因。5株耐碳青霉烯类大肠埃希菌中,3株检出NDM型基因,2株分别检出KPC型基因、IMP型基因。2株耐碳青霉烯类奇异变形杆菌中,1株检出KPC型基因,1株检出NDM+TEM型基因。2株耐碳青霉烯类产酸克雷伯菌中,1株检出NDM型基因,1株检出NDM+TEM型基因。2株耐碳青霉烯类产气肠杆菌中,1株检出KPC型基因,1株检出NDM型基因。1株耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌检出NDM型基因。20株碳青霉烯类药物敏感肠杆菌未检出耐药基因。44株在美罗培南改良显色平板上生长,敏感度为91.67%,特异度、阳性预测值均为100%。42株在亚胺培南改良显色平板上生长,敏感度为87.5%,特异度、阳性预测值均为100%,阴性预测值为76.92%。46株在厄他培南改良显色平板上生长,敏感度为95.83%,特异度为95%,阳性预测值为97.87%,阴性预测值为90.48%。结论临床分离的CRE菌株中,以肺炎克雷伯菌为主,主要分离自痰液标本、重症监护病房。

显色双层平板法定量检测即食水产品中副溶血性弧菌

本研究参照GB 4789.2—2016、GB 4789.7—2013中方法,使用具备计数和显色功能的培养基,分别对副溶血性弧菌标准菌株、调味杂色蛤肉、腌青虾和冰鲜八爪鱼样品进行副溶血性弧菌检测。实验结果显示,在显色双层平板上副溶血性弧菌菌落呈淡紫色,调味杂色蛤肉、腌青虾和冰鲜八爪鱼样品人工染菌样品实验与3%NaCl NA平板的结果无显著差异。结果表明,本研究建立的显色双层平板方法具备灵敏度高、快速、操作简便等优点,适合用于即食水产制品中副溶血性弧菌直接定量检测,能够如实反映即食水产品受污染的情况。

1株高产甘油酸菌株的筛选与鉴定

利用平板显色法,从腐烂的水果中筛选出1株能够转化甘油产生甘油酸的菌株。根据生理生化、形态学鉴定以及16S rDNA基因序列结果的分析,确定该菌株的生物学分类地位。该菌株属于醋酸杆菌科(Acetobacteraceae)葡萄糖酸杆菌属(Gluconobacter)日本葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter japonicus),将其命名为HD1025。初步发酵试验表明,该菌株能够以150 g/L甘油为底物生产49.47 g/L的甘油酸。

一株产木质素降解酶真菌的分离与鉴定

从自然界中分离到一株产木质素降解酶真菌。平板显色反应显示,该菌株具有产多种木质素降解酶的能力,并通过酶活力测定得到证实。为确定该菌株的分类地位,对其ITS序列进行了扩增并测序,并利用MEGA4.0生物学软件计算其与同属其它菌株的遗传距离并构建系统发育树,在分子水平上确定它们之间的亲缘关系。试验结果表明,该菌株的ITS序列与Irpex lacteus乳白耙菌序列相似度达99%,且与Irpex lacteus XSD-2亲缘关系最近。

改良显色平板在筛查碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌中的性能评价

目的碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(CRE)的感染是威胁人类健康的重要卫生问题。建立一种快速、准确的筛查方法是应对这种威胁的关键措施;本研究旨在制备快速检测CRE的改良显色平板并对其性能进行评价。方法以传统的PCR方法为参考方法,用临床标本分离出的49株CRE及24株非CRE对3种改良显色平板的敏感度和特异度进行评价;其中,21株CRE用于三种改良平板的检测限评价。结果亚胺培南改良显色平板的敏感度为83.7%(41/49),特异度为100%(24/24)。美罗培南改良显色平板的敏感度为87.8%(43/49),特异度为100%(24/24);厄他培南改良显色平板的敏感度为93.9%(46/49),特异度为95.8%(23/24)。结论三种改良显色平板均具有较高的敏感度与特异度,且操作简便,无需昂贵的仪器,对人员技术要求低;厄他培南改良显色平板相对于美罗培南与亚胺培南改良显色平板,其还具有检测限低的特点,更适用于临床的推广应用。

探讨常规微生物学检验方法中影响念珠菌检验结果准确性的因素

目的为了探讨常规微生物学检验方法中影响念珠菌检验结果准确性的因素。方法利用常规方法将16株念珠菌进行分离、培养、鉴定,同时对其中8株念珠菌进行DNA序列分析,确定了念珠菌的分子型别。结果不同分子型号的念珠菌显色平板初步鉴定结果不一样,科玛嘉显色平板只能对白念珠菌作初步鉴定;利用ATB仪器对念珠菌进行鉴定时,以达到准确的鉴定结果,最好将板条放28e孵育24h,DADE4h快速酵母菌鉴定系统对临床常见酵母菌的鉴定结果与ATB一致;16株念珠菌分子分型结果中只有2株不适合自动化仪器鉴定结果。结论念珠菌检验结果准确性主要靠培养基、培养温度和时间稳定来完成。

影响念珠菌检验结果因素的探讨

目的探讨常规微生物学检验方法中影响念珠菌检验结果准确性的因素。方法用常规方法分离、培养、鉴定14株念珠菌并对其中10株作DNA序列分析,确定分子型别。结果不同品牌的念珠菌显色平板初步鉴定结果不同,科玛嘉显色平板只能对白念珠菌作初步鉴定;用ATB仪器鉴定时,为了得到准确的鉴定结果最好将板条放30℃孵育48 h,DADE 4 h快速酵母菌鉴定系统对临床常见酵母菌的鉴定结果与ATB一致;10株念珠菌分子分型结果中只有1株不支持自动化仪器鉴定结果。结论培养基、培养温度和时间都是影响念珠菌检验结果准确性的因素。

ChromID ESBL选择性显色平板对产ESBLs肠杆菌科细菌筛选效果的评价

目的评价ChromID ESBL选择性显色平板对产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌的筛选效果。方法选取临床分离的371株肠杆菌科细菌进行ESBLs的检测,用ChromID ESBL选择性显色平板做筛选试验,同时用纸片确证法做确证试验,采用Kappa检验对两者结果进行一致性分析。结果两种方法对371株肠杆菌科细菌ESBLs检测的总Kappa值为0.761。ChromID ESBL选择性显色平板法的总灵敏度为95.2%,总特异度为83.5%。对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌分别统计,其Kappa值分别为0.832、0.514、0.778;ChromID ESBL选择性显色平板法对其检测灵敏度分别为95.7%、91.3%、100.0%,特异度分别87.6%、72.9%、90.9%。另外有6株大肠埃希菌在该显色平板上显非特征色。结论 ChromID ESBL选择性显色平板对产ESBLs肠杆菌科细菌的筛选效果与纸片确证法总体的一致性较好,其灵敏度和特异度较高,可应用于临床。但该显色平板对产ESBLs肺炎克雷伯菌的筛选效果与纸片确证法一致性一般,其特异度也较低;对大肠埃希菌存在一定的假阴性,对于该显色平板上生长的绿色和白色菌落需要作进一步鉴定确认。