分化抑制因子3作为缺血性脑卒中诊断标志物的研究及其与免疫浸润的关系

目的明确分化抑制因子3(Id3)能否作为缺血性脑卒中(IS)潜在的诊断标志物,并研究免疫细胞浸润在IS病理中的作用。方法从基因表达综合数据库中下载IS数据集。首先使用R语言软件识别差异表达基因并进行功能相关分析。然后结合最小绝对收缩与选择算子、支持向量机的特征递减消除算法和加权基因共表达网络分析算法筛选IS的诊断标志物并进一步验证,通过受试者工作特征曲线评估标志物对IS的诊断价值。最后,利用反卷积算法评价IS组织中免疫细胞浸润情况,分析诊断标志物与浸润免疫细胞的相关性。结果本研究总共确定了165个差异表达基因,发现Id3可能是IS的诊断标志物(受试者工作特征曲线下面积0.839,95%置信区间:0.750~0.920)。免疫细胞浸润分析表明,中性粒细胞、初始CD_(4)^(+)T淋巴细胞、初始B细胞、CD_(8)^(+)T淋巴细胞、静息CD_(4)^(+)记忆T淋巴细胞、活化CD_(4)^(+)记忆T淋巴细胞、静息树突状细胞、静息肥大细胞、嗜酸性粒细胞与IS的发生进展可能存在关系。结论Id3可能是IS潜在的诊断基因,免疫细胞浸润对IS的发生发展有重要影响。

Smoothelin是一种胃肠道平滑肌肿瘤的特异性标志物

Smoothelin是一种新的细胞骨架平滑肌特异性蛋白，几乎特异性地表达于终末分化（收缩的）的平滑肌细胞。与其他平滑肌蛋白标志物如calponin、desmin、α-平滑肌肌动蛋白、平滑肌肌球蛋白和h-钙调素结合蛋白相反，smoothelin很少表达于增殖的（缺少分化的）平滑肌细胞中。作者首先分析了整个胃肠道中smoothelin表达，结果发现整个胃肠道肌层平滑肌细胞强的胞质和核smoothelin表达，

MYOCARDIN的表达和在平滑肌细胞分化中的作用

目的在用血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)联合20%胎牛血清(FBS)诱导骨髓间充质干细胞(BM-SC)向平滑肌细胞(SMC)分化过程中,通过对促血管SMC分化因子myocardin和平滑肌分化标志物基因α-actin,SM-22等表达的研究,探讨myocardin在促血管SMC分化中的重要作用。方法采用骨髓干细胞培养基和贴壁法从小鼠骨髓中分离BMSC,然后细胞分为两组,诱导其向SMC分化:(1)20%FBS单独诱导;(2)PDGF-BB(50ng/ml)联合20%FBS诱导BMSC。分别于诱导0d,4d,8d,12d后用逆转录-聚合酶链反应法(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和免疫组化法检测细胞myocardin,α-actin,SM-22的mRNA表达和蛋白表达情况.结果RT-PCR和免疫组化结果显示在对小鼠BMSC的诱导过程中,检测出了myocardin,同时还有平滑肌分化标志物基因α-actin,SM-22等的表达。0d,4d,8d两诱导组细胞的myocardin,α-actin,SM-22的mRNA和蛋白表达水平随着诱导时间延长而增强(P<0.05),而诱导8d及12d时表达基本趋于稳定,与SMC相比无明显统计学差异(P>0.05);并且各项指标的表达水平在PDGF-BB与20%FBS联合诱导时比20%FBS单独诱导表达增强。不同诱导组之间统计学比较有差异(P<0.05)。结论PDGF-BB联合20%FBS可有效诱导BMSC向SMC分化,myocardin在此过程中起着关键性作用,且PDGF-BB,20%FBS两者联合诱导比20%FBS单独诱导作用要强。

血清饥饿可诱导人血管平滑肌细胞再分化

体外培养的分化型血管平滑肌细胞 (vascularsmoothmusclecells ,VSMC)以特异性标志基因表达、长梭形外观及对兴奋剂刺激产生收缩反应为其表型特征 .以血清饥饿法培养处于超汇合 (overconfluence)状态的人VSMC ,观察其分化型标志基因表达活性及其与细胞形态特征和收缩反应性之间的关系 ,探讨细胞生存环境对VSMC基因表达及表型的影响 .研究显示 ,生长至超汇合的VSMC由含血清培养转为血清饥饿后 ,收缩蛋白如SMα肌动蛋白 (SMα actin)、SM2 2α、h1 calponin、肌球蛋白重链 (MHC)SM1和SM2亚型的表达活性明显上调 ,证实血清饥饿诱导的收缩蛋白基因表达和血清应答因子 (serumresponsefactor ,SRF)与CArG顺式元件结合活性的增强有关 .同时 ,血清饥饿还可激活参与VSMC分化调节的转录调控因子SmLIM、Gax和分化相关蛋白HRG 1基因的转录 .随着血清饥饿培养时间的延长 ,VSMC逐渐形成多层、束状、成极性排列的形式 ,对兴奋剂刺激产生的收缩反应明显增强 .结果表明 ,超汇合状态的去分化型VSMC脱离血清刺激后 。

膀胱上皮分化标志物Uroplakins的研究进展

本文简述了Uroplakins的发现及其作为膀胱上皮终端分化标志物的证据、它们在刚性斑中的结构及可能的加工定位过程 ,并探讨了 (Ups)与膀胱炎症及膀胱癌的相关性 ,最后讨论了将Ups组织特异性启动子用于转基因研究的现状与前景。

肿瘤标志物的研究及临床应用进展

肿瘤标志物是肿瘤细胞本身存在或分泌的特异性物质,迄今所知的肿瘤标志物中,绝大多数不但存在于恶性肿瘤中,而且也存在于良性肿瘤、胚胎组织,甚至正常组织中。因此,这些肿瘤标志物并非恶性肿瘤的特异性产物,但在恶性肿瘤患者中明显增多。肿瘤的预防、诊断和治疗是目前医学领域研究的重大课题。肿瘤发生的机制非常复杂,涉及到基因内(genetic)和基因外(epigenetic)的变化及与环境的相互作用。在肿瘤的发生和发展过程中,癌基因和抑癌基因的变化一直是研究的重点,因为各种肿瘤中都基本上能发现癌基因和抑癌基因的改变。细胞因子及其受体在细胞信号转导和细胞的增殖和分化过程中起着重要作用,在肿瘤细胞的快速增殖中,必然引起细胞因子及其受体表达和分布的变化。在肿瘤免疫过程中,免疫相关的因子也会发生量的变化。肿瘤表面抗原是研究进展较快的指标。

GFP转基因鼠肌卫星细胞系的构建及基因介导成骨分化的实验研究

目的评价肌卫星细胞(Muscle satellite cells,MSCs)体内外成骨分化的能力,探讨肌卫星细胞作为骨组织工程新的种子细胞的可能性。方法取新生绿色荧光蛋白转基因小鼠颌面部肌肉,采用酶消化法分离出MSCs,体外原代及传代培养,经腺病毒介导的人骨形成蛋白2(Ad-BMP2)基因转染后,行成骨细胞标志物的活性检测及细胞化学染色,并进行细胞体外矿化及体内成骨的检测。结果转染后细胞碱性磷酸酶(ALP)组织化学染色呈阳性;骨钙素(OC)免疫细胞化学染色呈阳性且OC活性增强(p<0．05);21天后见钙结节形成;转染后的细胞与材料复合物植入裸鼠后肢肌肉内, 4周后见骨组织形成。结论体外培养的肌卫星细胞体内外可以成骨分化,可以成为骨组织工程的新的种子细胞。

CDC27基因在系统性红斑狼疮中的表达和临床意义

目的探讨细胞分化周期蛋白27(CDC27)基因在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞上的表达及临床意义。方法应用反转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)检测32例SLE患者和21例对照者外周血单个核细胞上cdc27的表达,比较两组之间cdc27的表达水平,分析其与SLE临床和治疗的关系,且采用受试者工作特征(ROC)曲线分析其诊断效能。结果SLE组患者外周血单个核细胞的cdc27水平显著低于对照组,差异有统计学意义(Z=126.0,P<0.001),且与C-反应蛋白(CRP)(rs=-0.462,P=0.009),血沉(ESR)(rs=-0.358,P=0.048)、单核细胞数量(rs=-0.386,P=0.029)呈负相关。治疗后SLE患者外周血单个核细胞cdc27表达水平上调(P=0.005)。SLE组患者和对照组ROC曲线下面积(AUC)为0.813(95%CI:0.681~0.944;P<0.001),敏感性为81.25%,特异性为80.95%。结论SLE患者外周血单个核细胞上cdc27的表达水平下调,且与SLE患者的炎症水平以及治疗密切相关,可能作为SLE的潜在诊断指标之一。

DNA表观遗传修饰的研究进展-基因组的第六碱基

近期的研究发现,哺乳动物细胞的正常DNA中普遍存在一类新的碱基组成成分,即5-羟甲基胞嘧啶(5-hydroxymethyl cytosine,5-hmC)。这种刚刚开始被人们深入认识的碱基修饰形式,被称作是基因组的第六碱基。本文主要介绍关于5-hmC的形成机制、组织特异性分布、在细胞分化和表达调控等生理过程中的作用,以及作为表观遗传标志物与肿瘤等疾病的关系方面的研究进展。此外,我们对现阶段关于甲基化及羟甲基胞嘧啶的检测方法在基因组学研究中的进展进行了归纳和总结。

基于加权基因共表达网络分析的BRAF突变分化型甲状腺癌预后标志物筛选

目的:构建鼠类肉瘤滤过性病毒致癌同源体B1 (v-raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1,BRAF)基因突变分化型甲状腺癌的基因共表达网络并筛选预后标志物,加强此类患者的术前风险评估。方法:从肿瘤基因组图谱数据库下载甲状腺癌与癌旁组织样本的基因转录组表达数据及临床资料。用加权基因共表达网络分析来构建BRAF基因突变调控的基因共表达模块,通过模块的表型相关性分析找到有临床意义的模块,并在模块中筛选BRAF基因突变的分化型甲状腺癌特异性的预后标志物。结果:成功构建3个分化型甲状腺癌中BRAF基因突变调控的基因共表达模块,其中2个模块与颈部淋巴结转移分期相关。在这两个模块中找到与分化型甲状腺癌预后相关的基因有9个:SLC26A4、SOD3、KIT、GNAI1、FN1、ITGA2、IQGAP2、SORBS2和ITGA3;且FN1和ITGA3的高表达与BRAF基因突变分化型甲状腺癌患者无病生存期缩短有关。结论:建立分化型甲状腺癌中BRAF基因突变调控的基因共表达模块与颈部淋巴结转移分期之间的联系,筛选出FN1和ITGA3是BRAF基因突变的分化型甲状腺癌的特异性预后标志物。

单克隆抗体与基因探针在肿瘤诊断中的应用

一、肿瘤标志物研究的历史发展:数十年来人们致力于寻找恶性肿瘤所特有的成分。以期应用于肿瘤的诊断,但未能达到预期目的。经研究发现:有些成分虽非恶性肿瘤所独有,但其存在,对某种肿瘤性质的判明却有帮助,可视为肿瘤性质的标志,提出了肿瘤标志物的概念。肿瘤标志物研究的历史,可分为四个阶段:1.

人脐带间充质干细胞的分离培养及多向分化潜能研究

建立人脐带间充质干细胞的分离培养方法,并鉴定其生物学特性及多向分化潜能。采集健康产妇足月剖宫产中的胎儿脐带组织,通过组织块贴壁法进行原代培养,分别采用流式细胞仪和RT-PCR方法检测细胞表面标志物和多能性相关基因的表达,通过向成脂、成骨、成软骨分化,鉴定其多向分化潜能。结果显示:脐带组织贴壁培养14 d,可见组织块周围出现大量贴壁生长的梭形样细胞,获得的细胞高表达间充质干细胞表面标志物CD44、CD105,低表达造血细胞表面标志物CD34、CD45;同时表达多能性相关基因Oct4和Nanog,经组织染色和RT-PCR鉴定,其具有向成脂、成骨和成软骨分化的潜能。人脐带间充质干细胞可在体外扩增培养,表达多能性相关基因,并具有多向分化潜能,可作为种子细胞用于组织工程。

基底硬度对MSCs细胞Lamin A与成骨分化关系的影响

目的探讨基底硬度对骨髓间充质干细胞LaminA与成骨分化关系的影响。方法(1)探讨Lamin A对不同硬度基底上MSCs成骨分化的影响:分别在硬度不同的基底上接种MSCs,利用基因干扰技术降低Lamin A表达,干扰组为实验组,未处理组为对照组。培养3 d后利用蛋白免疫印迹法检测骨分化标志物碱性磷酸酶(ALP)、Runx 2和骨桥蛋白(OPN)的表达。

大鼠阴茎海绵体肌源性于细胞向平滑肌细胞分化的研究

我们已经在大鼠阴茎海绵体组织中检测到干细胞标志物Sca-1以及肌源性标志物Desmin的表达，并在细胞水平予以验证。我们传代培养大鼠阴茎海绵体肌源性干细胞（MDSCs），观察其平滑肌细胞的分化潜能。

抗黑色素瘤分化相关基因5抗体阳性皮肌炎合并间质性肺病研究进展

抗黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)抗体阳性皮肌炎(DM)由于合并快速进展型间质性肺病(RPILD),死亡率很高。目前已确定了多种预后相关因素,如初始用力肺活量(FVC)%分级、抗MDA5抗体滴度、血清铁蛋白、涎液化糖链抗原-6(KL-6)水平以及CD4+CXCR4+T细胞百分比,可评估间质性肺病(ILD)严重程度和对治疗的反应,以及潜在的生存预测价值。目前对该病的治疗在很大程度上仍然是对以往的经验性总结,“三联疗法”(高剂量糖皮质激素联合他克莫司和静脉注射环磷酰胺)和基于Janus激酶(JAK)抑制剂的治疗,是抗MDA5抗体阳性DM-ILD目前主要的治疗方案,并得到了最近发表文献数据的支持。然而,对于抗MDA5抗体阳性DM-ILD患者,特别是晚期患者,仍迫切需要更好的治疗方案。该文就病因和发病机制、临床特征和预后、预后影响因素及治疗方法进行了综述。

肺栓塞继发慢性血栓栓塞性肺动脉高压的发病机制及最新进展

慢性血栓栓塞性肺动脉高压(chronic thromboembolic pulmonary hypertension, CTEPH)是一种肺动脉压力超过正常值的肺血管疾病,肺栓塞(pulmonary embolism, PE)发生血栓不溶解是继发CTEPH的主要原因,而细胞代谢、免疫炎症反应及基因突变等因素诱导了肺动脉的重塑。对于易PE继发CTEPH的患者,发现BMPR2突变及转录因子FoxO1变化对肺动脉重塑也起着重要作用。目前已知的重要失调通路有TGF-β和PI3K,仍需要进一步的深入研究其他通路,充分了解导致CTEPH的过程。本文总结了既往关于CTEPH相关的文献,对其主要的发病机制进行表述,为寻找CTEPH的个体化治疗需要的靶点提供参考。

幽门螺杆菌抗体分型联合肿瘤标志物检测与不同分化程度胃癌的关系

目的探索幽门螺杆菌(Hp)抗体分型联合肿瘤标志物[癌胚抗原(CEA)+糖类抗原72-4(CA72-4)+糖类抗原19-9(CA19-9)]检测对低、中、高度分化胃癌的诊断价值。方法 HP抗体分型采用免疫印迹法,肿瘤标志物采用化学发光法,对经病理确诊的胃癌患者(低分化23例,中分化36例,高分化38例)及胃良性病变对照组(34例)进行血清学水平的HP抗体分型以及肿瘤标志物检测。结果 HP抗体分型联合肿瘤标志物检测对低分化、高分化胃癌的检测灵敏度分别为67%及56%;对中分化胃癌的检测特异性为84%,对低、中、高分化胃癌的检测准确性分别为60%、70%和49%,与单独用肿瘤标志物对胃癌的检测水平相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HP抗体分型联合肿瘤标志物检测对不同分化程度的胃癌有一定的临床指导意义。

p53在结肠癌中的表达及临床意义

目的 :研究 p5 3在结肠癌中的表达 ,探讨 p5 3在结肠癌中的表达与结肠癌发生、发展及预后的关系。 方法 :选用结肠癌组织标本 33例及相应的癌旁正常组织标本 33例 ,通过免疫组织化学检测 p5 3在结肠癌组织及癌旁正常组织中的表达 ,分析 p5 3在结肠癌中的表达与结肠癌临床病理参数之间的关系。 结果 :p5 3在结肠癌组的阳性表达率为 6 0 6 % ,在癌旁正常组织组的阳性表达率为 15 1%。两者之间存在显著差异 (P <0 0 1) ;对p5 3在结肠癌中的阳性表达与结肠癌的Dukes分期及癌细胞的分化程度作相关性分析 ,结果显示 ,p5 3的阳性表达与Dukes分期有关 (P <0 0 5 ) ,p5 3的阳性表达与癌细胞分化程度有关 (P <0 0 5 ) ;结论 :研究证明了结肠癌组织中 p5 3存在异常高表达 ,较癌旁正常组织明显增高 ,结肠癌组织中 p5 3的阳性表达与结肠癌Dukes分期及癌细胞分化程度有明显相关性。说明p5 3的突变在结肠癌的形成和发展中起了促进作用 ,同时说明 p5 3有可能作为结肠癌发生、发展及预后的肿瘤标志物。

食管癌与微小RNA关系研究进展

食管癌（EC）是世界恶性肿瘤和癌症死亡的常见原因[1]。尽管EC的诊断和治疗已得到快速发展,但其平均5年生存率仅保持在10%~20%[2]。评估EC预后和建立合理的治疗方案显得十分重要。因此,有必要找到食管癌的肿瘤分子标志物。人类基因组计划结束后,人们发现编码蛋白质的基因只占总基因组的2%。