输尿管不全梗阻大鼠输尿管平滑肌损伤及肌球蛋白表达变化的临床意义

目的观察大鼠输尿管不全梗阻3周内输尿管形态、平滑肌细胞结构及肌球蛋白表达变化,为临床判断输尿管不全梗阻患者的输尿管功能提供依据。方法选择SD大鼠120只,随机分为对照组30只、假手术组45只、模型组45只。模型组参照腰大肌隧道包埋法制备右侧输尿管不全梗阻模型,假手术组假手术处理,对照组不予处理。模型组造模1、2、3周,观察各组输尿管及肾脏形态,测量右侧输尿管直径,采用HE染色观察输尿管平滑肌组织细胞结构变化,采用免疫组化SP法检测输尿管平滑肌肌球蛋白表达,采用qRT-PCR法检测输尿管平滑肌肌球蛋白重链mRNA相对表达量。结果模型组造模1、2、3周近端输尿管逐渐增粗,肾脏体积逐渐增大、张力逐渐升高;右侧输尿管直径逐渐增加,且均大于对照组和假手术组(P均<0.01)。HE染色结果显示,模型组近端输尿管梗阻时间越长,平滑肌细胞肌层越薄、细胞越少、纤维增生越明显。模型组造模1、2周输尿管平滑肌肌球蛋白表达量及肌球蛋白重链mRNA相对表达量均高于对照组和假手术组,造模3周均低于对照组和假手术组(P均<0.01);造模1、2、3周,模型组平滑肌肌球蛋白表达量及肌球蛋白重链mRNA相对表达量各时间点两两比较P均<0.01。结论输尿管不全梗阻时间越长平滑肌损伤越重;梗阻超过2周将出现输尿管功能不可逆性损伤。

c-fos在CCK-8抗LPS所致的肺动脉平滑肌细胞损伤中的变化

目的 :观察c -fos在八肽胆囊收缩素 (CCK - 8)减轻脂多糖 (LPS)所致的肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)损伤中的变化。方法 :贴块法培养大鼠PASMC。应用电镜技术和生化方法 ,观察细胞形态和测定细胞丙二醛 (MDA)含量及乳酸脱氢酶 (LDH)释放率 ;台盼蓝染色法记录PASMC蓝染率的变化 ;免疫细胞化学技术检测细胞内c -fos蛋白的表达情况。结果 :CCK - 8可减轻LPS引起的细胞超微结构损伤 ;CCK - 8可降低LPS引起的细胞台盼蓝摄取率、MDA含量与LDH释放率的增高 ;LPS可轻微上调PASMC内c-fos蛋白表达 ,CCK - 8可使该上调作用显著上升。结论 :CCK - 8可减轻LPS所致的PASMC损伤 ;CCK - 8可能通过使c -fos蛋白表达上调来发挥其抗损伤作用。

miR-335-5p通过靶向调控GRK4对ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞损伤的影响及其机制

目的研究miR-335-5p对ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞损伤的影响及其机制。方法用浓度为50 mg/ml的ox-LDL培养基培养HA-VSMC细胞,作为ox-LDL处理组,以不添加ox-LDL培养的细胞作为对照(Con)组;设置miR-NC组,miR-335-5p组、anti-miR-NC组、anti-miR-335-5p组、ox-LDL+miR-NC组、ox-LDL+miR-335-5p组、ox-LDL+si-NC组、ox-LDL+si-GRK4组、ox-LDL+miR-335-5p+pcDNA组、ox-LDL+miR-335-5p+pcDNA-GRK4组。qRT-PCR检测miR-335-5p和GRK4 mRNA表达;Western印迹检测蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1β含量;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果ox-LDL能促进HA-VSMC细胞中GRK4表达,抑制miR-335-5p表达,诱导炎症因子TNF-α、IL-1β释放(P<0.05)。过表达miR-335-5p和抑制表达GRK4炎症因子TNF-α、IL-1β释放减少,细胞凋亡率降低。miR-335-5p靶向调控GRK4的表达,GRK4过表达逆转了miR-335-5p过表达对ox-LDL诱导的HA-VSMC细胞损伤的作用。结论ox-LDL能够诱导HA-VSMC细胞损伤,miR-335-5p通过抑制TNF-α、IL-1β分泌和GRK4的表达对HA-VSMC细胞发挥保护作用。

葛根素抑制家兔髂动脉球囊损伤后再狭窄

观察家兔髂动脉球囊损伤后葛根素抑制损伤部位平滑肌细胞增殖的药效。复制球囊损伤家兔髂动脉造成血管狭窄模型 ,实验分为 5 0mg (kg·d)葛根素治疗组、10 0mg (kg·d)葛根素治疗组和手术对照组 ,通过体外超声定期检测血管腔直径 ,病理切片观察血管内膜和中膜面积。结果发现 ,球囊损伤术后第 5周 5 0mg (kg·d)葛根素治疗组的血管直径 (1.6 6± 0 .4 1mm)和 10 0mg (kg·d)葛根素治疗组的血管直径 (1.5 9± 0 .17mm)显著高于对照组(1.13± 0 .4 3mm)。病理切片结果发现 10 0mg (kg·d)葛根素治疗组内膜 /中膜面积比 (36 %± 18% )显著低于对照组(12 4 %± 6 4 % )。结果提示 ,葛根素对球囊损伤术后血管平滑肌细胞增殖有一定抑制作用。

慢性乙型肝炎肝组织损伤的相关因素研究

目的 研究慢性乙型肝炎（CHB）合并非酒精性脂肪肝（NAFLD）患者的肝损伤与肝脏脂联素及a-平滑肌肌动蛋白（a—SMA）表达的相关性，并探讨CHB患者发生NAFLD的机制。方法对94例CHB合并NAFLD患者（病例组）进行肝活检，与119例单纯CHB患者（对照组）进行比较，包括血清肝脏生化学及病毒学指标；对肝活检样本进行组织学及脂联素、a-SMA免疫组织化学染色并测量积分吸光度值。结果病例组血清ALT、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白水平均高于对照组（Z=3．425、4．488、4．858、2．265，P〈0．05）；HBVDNA定量及HBeAg状态在两组间差异无统计学意义（Z=0．825，X^2=0．323，P〉0．05）。脂联素表达在病例组与脂变、炎症及纤维化程度均无明显相关性（r=0．032、-0．107、-0．133，P〉0．05）；而在对照组与炎症及纤维化程度呈负相关（r=-0．223、-0．259，P〈0．05）。a-SMA表达在病例组与炎症及纤维化程度呈明显正相关（r=0．323、0．355，P〈0．05）；在对照组无相关性（r=0．172、0．155，P〉0．05）。结论NAFLD的发生主要与代谢因素有关，而与病毒因素无关；脂联素与CHB合并NAFLD）的肝损伤无直接关系；a-SMA可能是判断CHB合并NAFLD患者肝脏炎症及纤维化程度的重要指标；NAFLD可能促进了CHB患者肝损伤的进展。

黄芪多糖对冲击波碎石治疗后大鼠输尿管的保护作用

目的观察黄芪多糖对体外冲击波碎石治疗诱发的大鼠(购自辽宁长生生物技术有限公司)输尿管平滑肌损伤的修复作用。方法30只大鼠随机分为5组,分别为对照组、模型组、黄芪多糖低、中、高剂量组,每组6只,除对照组外,其余各组大鼠建立肾结石模型并采用体外冲击波碎石治疗,黄芪多糖低中高剂量组大鼠分别按照20、40、80 mg/kg腹腔注射给予黄芪多糖,对照组及模型组腹腔注射给予大鼠等量生理盐水,每天1次,连续给药14 d,测定各组大鼠输尿管平滑肌收缩力、收缩频率、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)水平,实时定量聚合酶链反应(PCR)检测大鼠输尿管平滑肌毒蕈碱型3(M3)受体mRNA水平,蛋白质印迹法(Western blot)检测大鼠输尿管平滑肌B淋巴细胞瘤-2基因(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)水平,对照组与模型组比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析,多组间两两比较采用LSD检验。结果黄芪多糖低、中、高剂量组大鼠收缩力[(0.39±0.11)、(0.46±0.14)、(0.57±0.16)g]及收缩频率[(14.21±2.62)、(16.73±1.47)、(17.49±2.14)次/分]、SOD活性[(40.35±3.82)、(53.59±3.17)、(66.80±4.15)U/mg蛋白]、M3受体mRNA水平(1.03±0.24、1.73±0.48、2.46±0.35)、bcl-2水平(0.83±0.08、1.17±0.15、1.44±0.19)明显高于模型组[(0.18±0.07)g、(11.31±2.85)次/分、(21.46±2.71)U/mg蛋白、0.65±0.14、0.61±0.12],MDA水平[(1.77±0.14)、(1.21±0.27)、(0.71±0.11)nmol/mg蛋白]及bax水平(1.13±0.10、0.86±0.14、0.71±0.09)明显低于模型组[(3.27±0.07)nmol/mg蛋白、1.58±0.23],各项指标变化差异均有统计学意义(F=11.281、16.461、131.831、44.872、25.504、169.905、26.883,P<0.05)。结论黄芪多糖能够提高体外冲击波碎石治疗诱发的大鼠输尿管平滑肌收缩力、收缩频率、SOD活性、M3受体mRNA水平及bcl-2水平,降低输尿管平滑肌MDA水平及bax水平,进而发挥对输尿管平滑肌的修复作用。