虎杖苷调节YAP1/TAZ信号通路对缺氧性肺动脉高压新生大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

目的 探究虎杖苷(PD)对缺氧性肺动脉高压(HPH)新生大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖与凋亡的影响及其作用机制。方法 将新生大鼠随机分为6组:对照组、模型组、PD低剂量组、PD中剂量组、PD高剂量组、PD高剂量+Hippo通路抑制剂(PD高剂量+XMU-MP-1)组,每组10只。缺氧2周后,检测各组大鼠右心室收缩压(RVSP)和右心室肥厚指数(RVHI),苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理学变化,并计算肺动脉管壁厚度占总厚度的百分比(WT%)和管壁面积占总面积的百分比(WA%)。分离各组新生大鼠PASMCs,分为NC组、低氧(Hypoxia)组、PD低剂量组、PD中剂量组、PD高剂量组、PD高剂量+XMU-MP-1组。CCK-8和EdU检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫印迹(Western blot)检测肺组织和PASMCs中Yes相关蛋白1(YAP1)、PDZ结合域的转录共刺激因子信号通路(TAZ)、哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白(Bax)蛋白表达。结果 与对照组相比,模型组大鼠肺动脉管壁明显增厚,管腔变窄,RVSP、RVHI、WT%、WA%、YAP1、MST1、TAZ蛋白表达显著升高(均P<0.05);与模型组相比,PD低、中、高剂量组大鼠肺动脉增厚减少,管腔变大,RVSP、RVHI、WT%、WA%、YAP1、MST1、TAZ蛋白表达显著降低,且PD各组间差异存在剂量依赖性(均P<0.05);XMU-MP-1可逆转这一结果。与NC组相比,Hypoxia组细胞A_(450nm)值、EdU阳性率、YAP1、MST1、TAZ、Bcl-2蛋白表达显著升高,凋亡率、Bax蛋白表达显著降低(均P<0.05);与Hypoxia组相比,PD低、中、高剂量组细胞A_(450nm)值、EdU阳性率、YAP1、MST1、TAZ、Bcl-2蛋白表达显著降低,凋亡率、Bax表达显著升高,且PD各组间有剂量依赖性(均P<0.05);XMU-MP-1可逆转这一结果。结论 PD可能通过抑制YAP1/TAZ信号通路抑制HPH新生大鼠PASMCs增殖,促进凋亡。

模拟失重下缝隙连接蛋白43对血管平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

目的探究模拟失重下缝隙连接蛋白43(Cx43)对血管平滑肌细胞增殖及凋亡的影响。方法将人主动脉平滑肌细胞(HASMCs)作为研究对象,分为正常重力组(Con组)、模拟失重组(SMG组),并建立细胞模拟失重模型。两组细胞培养48 h后采用qRT-PCR和Western blotting检测HASMCs中Cx43的表达变化情况;加入缝隙连接蛋白抑制剂18-α-甘草次酸(18α-GA)后,两组再分成Con组、正常重力加抑制剂组、SMG组、模拟失重加抑制剂组(SMG+inhibitor组)。采用Western blotting检测模拟失重对HASMCs中的增殖相关蛋白增殖细胞核抗原(PCNA)以及凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(BAX)等蛋白水平表达的影响,采用EdU检测HASMCs的增殖能力,采用流式检测HASMCs的凋亡情况。采用免疫荧光检测尾部悬吊大鼠颈动脉平滑肌细胞中Cx43的表达情况。结果SMG组HASMCs回转失重培养48 h后,与Con组相比,HASMCs中Cx43的mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。SMG+inhibitor组中的PCNA蛋白表达水平显著下降(P<0.05),Bcl-2蛋白水平显著降低(P<0.05),BAX水平显著增高(P<0.05);与SMG组相比,SMG+inhibitor组HASMCs中EdU阳性细胞比率显著下降(P<0.05);流式结果表明,SMG+inhibitor组中HASMCs中的凋亡率显著升高(P<0.05)。尾吊大鼠免疫荧光结果表明,尾吊大鼠与正常大鼠相比,颈动脉平滑肌细胞中Cx43表达显著增多。结论Cx43在模拟失重条件下促进HASMCs的增殖,抑制HASMCs的凋亡。

高肺血流量对大鼠肺动脉压及肺动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

目的 :建立左向右分流所致肺动脉高压的大鼠模型 ,探讨高肺血流量对肺血流动力学及肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响。方法 :采用腹主动脉 -下腔静脉分流术建立左向右分流的大鼠模型 ,观察术后 6周和 1 1周肺血流动力学 ,右心室肥厚和肺动脉舒张反应的改变。采用免疫组织化学和原位缺口末端标记方法对 1 1周组大鼠肺血管平滑肌细胞进行增殖和凋亡状态的研究。结果 :术后 6周与 1 1周大鼠肺动脉收缩压、肺动脉平均压、右心室 (RV)与左心室加室间隔 (LV +S)的比值较同龄对照组明显增加 ,而且 1 1周分流组肺动脉收缩压较 6周分流组进一步增高。在 1 1周分流组大鼠中 ,乙酰胆碱 (ACh)产生的肺动脉环舒张反应较对照组明显减弱 ,而硝普钠(SNP)产生的肺动脉环舒张百分比无明显变化。 1 1周分流组大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖指数 (PI)、凋亡指数(AI)、PI/AI比值明显高于 1 1周对照组大鼠肺动脉平滑肌细胞。结论 :腹主动脉 -下腔静脉分流术可导致肺动脉高压形成。高肺血流量引起的内皮依赖性肺血管舒张功能失调对肺动脉高压的形成有重要的影响 ,肺动脉平滑肌细胞增殖的增加和凋亡的相对减少在肺动脉高压的发生中起重要作用。该模型简单、可靠、重复性好。

硫化氢对自发性高血压大鼠主动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

目的 探讨气体分子硫化氢 (H2 S)对自发性高血压大鼠主动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的影响及其作用机制。方法 4周龄雄性自发性高血压 (SHR)鼠及韦斯达 克陀鼠 (WKY)各自随机分为对照组、+硫氢化钠(NaHS)组、+PPG组 ,5周后应用免疫组织化学方法检测细胞增殖核抗原 (PCNA)、NF κB、Bcl 2、Fas、caspase 3的表达水平 ,应用原位缺口末端标记法 (TUNEL)检测细胞凋亡情况。结果 SHR对照组大鼠较WKY对照组大鼠增殖指数 (PI)及凋亡指数 (AI)均增高 ;SHR +NaHS组大鼠较SHR对照组大鼠PI降低、AI增高 ;SHR +PPG组大鼠AI降低。WKY +PPG组大鼠较WKY对照组大鼠PI增高。SHR对照组大鼠主动脉Bcl 2及NF κB表达均较WKY对照组降低 ,caspase 3表达升高。SHR +NaHS组大鼠主动脉Bcl 2及NF κB水平低于SHR对照组 ,而SHR+PPG组大鼠主动脉Bcl 2及NF κB水平高于SHR对照组。SHR +NaHS组大鼠主动脉caspase 3水平较SHR对照组高 ,而SHR +PPG组大鼠主动脉caspase 3水平低于SHR对照组。WKY +NaHS组及WKY +PPG组大鼠主动脉平滑肌细胞的各项凋亡相关因子表达与WKY对照组相似。H2 S供体或PPG干预组Fas水平与相应对照组相比无明显改变。结论 H2 S可抑制平滑肌细胞增殖 ,并可能通过下调凋亡抑制因子Bcl 2及NF κB水平 ,最终激活效应因?

大黄虫丸拆方对动脉粥样硬化家兔血管平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

目的研究大黄虫丸拆方对动脉粥样硬化(AS)模型家兔胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增殖与凋亡的影响。方法采用免疫性内皮损伤合并高脂饲料喂养的方法建立家兔AS模型,通过SP免疫组化法检测增殖细胞核抗原(PCNA)在VSMC中的表达,缺口末端标记法(TUNEL)观察VSMC的凋亡情况。结果与模型对照组比较,大黄虫丸拆方各功效组分均可使AS模型家兔胸主动脉VSMC中PCNA阳性细胞显著减少(P<0.01),而凋亡阳性细胞数显著增加(P<0.01)。结论大黄虫丸各功效组分通过抑制VSMC增殖、诱导其凋亡,从而调节VSMC增殖和凋亡之间的平衡,发挥抗AS作用,其中拆方1号是主要组分。

内源性一氧化碳对培养的肺动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的调节

目的 探讨内源性一氧化碳 (CO)对低氧性肺血管平滑肌细胞 (PASMC)增殖与凋亡的影响及机制。方法 体外培养Wistar大鼠PASMC ,进行低氧并予以血红素氧合酶抑制剂卟啉锌 9(zincprotoporphyrinIX ,ZnPP 9)处理 ,分为常氧 12h组 (N1组 )、常氧 2 4h组 (N2组 )、低氧 12h组 (H1组 )、低氧 2 4h组 (H2组 )、低氧 12h +ZnPP组 (H1+ZnPP组 )、低氧 2 4h +ZnPP组 (H2 +ZnPP组 ) ,采用流式细胞术、免疫细胞化学方法检测PASMC增殖与凋亡情况。结果 1.碳氧血红蛋白 (HbCO)检测 :采用双波长法测定细胞培养液中HbCO的吸光度 ,用以代替培养液中CO的相对含量。低氧 12h培养液中HbCO较常氧时显著增高 (P <0 .0 1) ,至 2 4h恢复至常氧水平 (P >0 .0 5 ) ;而低氧同时进行干预 ,H1+ZnPP及H2 +ZnPP两组HbCO水平均下降 ,且明显低于单纯低氧组 (P <0 .0 1) ,两组与常氧组相比亦有差异 (P <0 .0 0 1)。 2 .流式细胞仪检测PASMC增殖指数 (PI)与凋亡指数 (AI) :H1组PI较N1组下降 (P <0 .0 1) ,H2组则较N2组增高 (P <0 .0 0 1) ;H1+ZnPP组较H1组PI显著增高 (P <0 .0 0 1) ,H2 +ZnPP组与H2组比则无明显变化 (P >0 .0 5 ) ;H1组AI低于H2组 (P <0 .0 1) ,H1+ZnPP组AI高于H1组 (P <0 .0 0 1) ,H2 +ZnPP组则低于H2组 (P <0 .0 0 1)。

补肾煎对去势兔动脉粥样硬化血管平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

观察补肾煎对去势兔动脉粥样硬化血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响及机制。将 2 7只纯种新西兰雌兔随机分为 :A组 (卵巢切除 )、B组 (未切除卵巢 )、C组 (卵巢切除 +补肾煎 ) ,均给予高脂饮食 ,同时注射牛血清白蛋白 0 2 5g/kg ,造成动脉粥样硬化模型 ,12周时比较动脉形态学变化、MTT法测定各组培养血管平滑肌细胞增殖活性、电镜观察、原位末端标记法及流式细胞仪了解各组平滑肌细胞凋亡情况。结果 :C组兔主动脉内膜增生低于A组 ;C组培养平滑肌细胞增殖低于A组及B组 ;C组培养平滑肌细胞凋亡高于A组及B组。结论 :补肾煎可能通过抑制平滑肌细胞的增殖及增加其凋亡而减轻去势兔动脉粥样硬化的形成。

前列通瘀提取液对前列腺平滑肌细胞增殖与凋亡的作用

目的：研究前列通瘀提取液对体外培养前列腺基质平滑肌细胞增殖与凋亡的作用。方法：分别以1、2、10、50、100×10%-5g／L 5种不同浓度前列通瘀提取液作用体外培养前列腺基质平滑肌细胞，采用MTT和TUNEL法分别测定抗增殖指数和凋亡指数。结果：5种不同浓度前列通瘀提取液作用48h后抗增殖指数分别为50．61％、53．52％、56．92％、65．53％、72．94％，抗增殖效果随着浓度增大而增大。100×10^-5g／L前列通瘀提取液作用24、48，72h后凋亡指数与对照组比较差异无显著性。结论：（1～100）×10^-5g／L前列通瘀提取液体外作用前列腺基质平滑肌细胞具有显著的抗增殖作用。

木贼提取物对大鼠动脉粥样硬化早期血管平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

目的研究木贼正丁醇提取物对大鼠动脉粥样硬化(AS)早期主动脉平滑肌细胞增殖及凋亡的影响。方法选用雄性SD大鼠,随机分为正常对照、模型、阳性药对照及提取物组。复制食饵性AS早期模型,同时给予提取物预防性给药,以吉非罗齐为阳性药对照。实验9 w,观察主动脉壁病理形态学变化,流式细胞术定量检测主动脉壁平滑肌增殖及凋亡率。结果木贼正丁醇提取物组平滑肌凋亡率明显高于模型组(P<0.01),增殖指数低于模型组(P<0.01)。结论木贼正丁醇提取物可促进AS早期平滑肌凋亡,抑制其增殖,具有阻断AS早期病变进展的作用。

血管紧张素Ⅱ对血管平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

目的:研究血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ熏AngⅡ)对血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecells熏VSMCs)增殖规律及凋亡的影响。方法:用MTT、细胞计数和3H鄄TdR掺入法研究不同浓度和作用时间下AngⅡ对VSMCs增殖的影响;用流式细胞技术研究AngⅡ对VSMCs周期与凋亡的影响;用透射电镜观察AngⅡ作用下VSMCs超微结构的变化。结果:AngⅡ能促进VSMCs增殖,在一定范围内,其作用强度与AngⅡ浓度及作用时间呈正相关;AngⅡ在高浓度(10-4mol/L)时,使VSMCs凋亡率增加;AngⅡ促使细胞周期由G0/G1向S/G2鄄M期转变,使细胞由收缩表型向合成表型转变。结论:AngⅡ对VSMCs的促增殖作用具有剂量和时间依赖性熏大剂量AngⅡ有诱导VSMCs凋亡的倾向。

L-精氨酸对高肺血流量大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

探讨L 精氨酸 (L Arginine ,L Arg)对高肺血流量所致肺动脉高压平滑肌细胞增殖与凋亡的干预作用。 18只雄性SD大鼠随机分为对照组、分流组和分流 +L 精氨酸 (L Arg)组。对分流组和分流 +L Arg组大鼠行腹主动脉 下腔静脉分流术。观察术后 11周大鼠肺动脉平均压 (mPAP)和右心室肥厚的改变 ,采用免疫组织化学方法研究肺动脉平滑肌细胞PCNA和Fas的表达 ,并通过原位缺口末端标记方法 (TUNEL)检测大鼠肺动脉平滑肌细胞的凋亡。结果表明分流组大鼠mPAP、右心室 (RV)与左心室加室间隔 (LV +S)的比值 ,肺中、小型动脉平滑肌细胞增殖指数(PI) ,凋亡指数 (AI) ,PI AI比值明显高于对照组大鼠 (P <0 0 5 ) ,同时 ,分流后肺动脉平滑肌细胞Fas表达增高。然而 ,分流 +L 精氨酸组大鼠mPAP、RV LV +S明显低于分流组 (P <0 0 5及 0 0 1) ,并且L Arg减少了肺中、小型动脉平滑肌细胞的增殖 ,促进了凋亡 (P <0 0 1) ,wviycL Arg组大鼠PI AI比值较分流组明显降低 (P <0 0 1) ,同时 ,L Arg使分流大鼠肺动脉平滑肌细胞Fas表达明显增强。以上结果提示 ,L 精氨酸通过抑制肺动脉平滑肌细胞的增殖 ,促进其凋亡 ,从而对高肺血流量所致肺动脉高压的形成有重要的调节作用。

盐酸地尔硫对血管平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨合贝爽对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法将VSMC随机分为五组,分别为空白组、模型组(AngⅡ10-7mol/L)和模型+合贝爽1、2、3组(剂量分别为10-5、10-6、10-7mol/L),应用MTT法检测VSMC的生长率,TUNEL法检测凋亡率,RT-PCR检测Bcl-2、Bax、Fas和P53 mRNA的表达。结果合贝爽抑制VSMC增殖,促进VSMC凋亡,抑制抗凋亡基因Bcl-2的表达,促进促凋亡基因Bax、Fas和P53的表达。结论合贝爽使VSMC增殖减少,凋亡增加,其机制可能与抑制抗凋亡基因Bcl-2表达、促进促凋亡基因Bax、Fas和P53表达有关。

反义TR和p21双基因共表达对人主动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的作用

目的观察携带反义凝血酶受体(ATR)或/和p21的单、双基因重组腺病毒伴随病毒(rAAV)载体对人主动脉平滑肌细胞(ASMC)增殖与凋亡的影响。方法以携带ATR或/和p21的单、双基因rAAV感染人ASMC。半定量RT-PCR检测各基因的整合与表达;MTT法测定感染不同时间点的细胞存活率;流式细胞术检测细胞周期与凋亡细胞数目的变化;吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色检测凋亡细胞的比率。结果单、双基因在ASMC中均获得整合,且双基因发生了共表达;病毒感染4d时,ATR组、p21组和AP双基因组的细胞存活率与对照组相比分别降低了16.7%、21.6%和29.4%;三组的G0/G1期细胞数分别为(61.8±2.9)%、(82.5±4.0)%和(80.4±6.1)%;凋亡细胞数为(4.8±0.5)%、(5.7±0.1)%和(9.2±0.9)%;AO/EB染色显示的凋亡细胞比率分别为:对照组(1.5±0.8)%、ATR组(7.2±3.3)%、p21组(10.7±5.6)%、AP组(18.3±2.7)%。结论(1)双基因共表达对抑制细胞增殖和诱导凋亡的作用均较单基因具有较强的生物学效应。(2)为再狭窄的基因治疗提示了更优化的途径。

动脉内膜损伤后平滑肌细胞增殖与凋亡及相关基因表达

目的 :探讨动脉内膜损伤后狭窄的发生机制。方法 :用 2 4只新西兰大白兔建立腹主动脉下端内膜损伤后狭窄模型 ,采用原位末端标记法 (TUNEL)、免疫组化和原位杂交方法 ,检测增殖内膜中血管平滑肌 (VSMCs)增殖、凋亡及相关基因c fos、c myc、p5 3和PCNA的表达。 结果 :术后 1～ 2周PCNA达到高峰 ,与 4周～ 12周组间差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,TUNEL在术后4个月内保持低水平 ,损伤后 4个月内VSMCs凋亡低于增殖水平。术后 1～ 2周 ,c fos、c mycmRNA表达强阳性 ,在 3个月后未见表达。p5 3只在 1周内有弱阳性而其余各时间点未见表达。 结论 :VSMCs增殖和凋亡的失衡与动脉内膜损伤后狭窄密切相关 ,c fos和c myc参与了VSMCs凋亡和增殖的调节 。

基质细胞衍生因子-1及其受体对大鼠主动脉血管平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

目的研究基质细胞衍生因子-1(SDF-1)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖与凋亡的影响。方法选用体外培养的大鼠主动脉VSMC,并分为正常对照组、ox-LDL组[动脉粥样硬化(AS)模型]、SDF-1组(AS模型+SDF-1)、SDF-1+12G5组(AS模型+SDF-1+CXCR4单克隆抗体)和12G5组(AS模型+CXCR4单克隆抗体),应用MTT法测VSMC细胞增殖,TUNEL法测细胞凋亡率,RT-PCR法测凋亡基因bax、bcl-2mRNA的表达。结果ox-LDL组的增殖率0.38±0.01,明显高于正常对照组0.28±0.02(P<0.01),明显低于SDF-1组0.44±0.02(P<0.01),与SDF-1+12G5组和12G5组比较差异无显著性(P>0.05);ox-LDL组的凋亡率24.2±2.4,高于正常对照组19.8±2.7和SDF-1组20.7±2.8(P<0.05),而与SDF-1+12G5组和12G5组比较差异无显著性(P>0.05);ox-LDL组bcl-2和bax的比值明显低于正常对照组和SDF-1组(P<0.01),而与SDF-1+12G5组和12G5组差异无显著性(P>0.05)。结论SDF-1可明显促进ox-LDL诱导的VSMC增殖,并抑制细胞凋亡;SDF-1及其受体CXCR4构成的生物学轴可能通过bcl-2/bax途径影响VSMC凋亡。

γ-干扰素对平滑肌细胞增殖与凋亡及基质金属蛋白酶活性的影响

目的 :通过研究γ 干扰素对平滑肌细胞增殖和凋亡以及对基质金属蛋白酶 (MMPs)活性的影响 ,了解其对粥样斑块稳定性的影响。 方法 :①大鼠血管平滑肌细胞体外培养 ,加入不同浓度的γ 干扰素 (10U/ml、10 0U/ml、2 0 0U/ml) ,四甲基偶氮唑唑 (MTT)方法检测细胞的增殖 ,流式细胞仪检测细胞的凋亡。②大鼠腹腔巨噬细胞培养 ,加入不同浓度的γ 干扰素 ,用以明胶为底物的聚丙烯酰胺凝胶电泳酶谱法测定上清液中MMPs的活性。 结果 :γ 干扰素可以抑制平滑肌细胞增殖 ,促进其凋亡 ,其作用随着浓度的增加而增强。γ 干扰素可使巨噬细胞产生的MMPs活性增强。 结论 :粥样斑块中γ 干扰素由活化的T淋巴细胞产生 ,可以通过减少斑块内平滑肌细胞数量和增加纤维帽中细胞外基质的降解增加粥样斑块的不稳定性。

γ粒子核素支架影响血管平滑肌细胞增殖与凋亡的实验研究

目的:观察γ粒子钯-103[103Pd]核素支架对损伤血管中膜平滑肌细胞增殖与凋亡的影响。探讨核素支架防治支架内再狭窄的作用机制。方法:选用雄性新西兰兔50只,随机分为普通支架组及核素支架组,设正常对照。分别于术后3、7、14、28及56d取材,进行病理形态学、免疫组化(增殖细胞核抗原PCNA)、细胞凋亡(TUNEL)及原位杂交(bcl-2 mRNA及bax mRNA)的观察。结果:①光镜下发现,核素支架组管腔狭窄程度明显低于普通支架组,术后第56d最显著(P<0.01);②免疫组化显示,术后3-28d核素支架组PCNA表达均低于普通支架组,7d为表达高峰,16.35%±0.79%vs24.36%±0.55%(P<0.01)。③TUNEL法检测发现术后3-28d,核素支架组的平滑肌细胞凋亡较普通支架组更明显,术后第7d达峰值,14.72%±0.53%vs12.42%±1.13%(P<0.01)。④PCNA阳性率与TUNEL法测得的细胞凋亡阳性率比率PCNA/apoptosis(P∶A)显示,核素支架组P∶A的值在术后3-28d均显著小于普通支架组(P<0.05)。⑤原位杂交测定凋亡相关基因bcl-2 mRNA及bax mRNA表达并计算其比值显示,普通支架组术后第3、14、28d均大于对照组(P<0.01),核素支架组与对照组无显著差异(P>0.05)。术后第3-28d,核素支架组的比值均小于普通支架组(P<0.05)。结论:γ粒子核素支架通过抑制平滑肌细胞的增殖,促进凋亡,使增殖与凋亡的比率降低,从而减轻再狭窄的程度。

缺氧性肺动脉高压发病中肺动脉平滑肌细胞增殖与凋亡变化

目的 研究缺氧性肺动脉高压发病中肺动脉平滑肌细胞增殖与凋亡变化。方法 常压缺氧法复制大鼠缺氧性肺动脉高压模型 ,用右心导管法测量平均肺动脉压 ,称量法计算右心室肥大指数 ,HE染色结合形态计量分析进行缺氧性肺血管重塑观察 ,Tunel法行肺动脉平滑肌细胞凋亡检测。结果 缺氧 7d大鼠平均肺动脉压开始升高 ,肺动脉出现缺氧性肺血管重塑 ;缺氧 14d及 2 1d平均肺动脉压进一步升高 ,缺氧性肺血管重塑更明显 ,右心室肥大指数增加。对照组及缺氧 3d、7d、14d、2 1d组肺动脉平滑肌细胞凋亡指数差异无显著意义。平均肺动脉压与WA % (血管壁横断面积与血管横断面积比值 )及右心室肥大指数呈正相关 ,WA %与肺动脉平滑肌细胞凋亡指数之间无直线相关关系。结论 缺氧性肺动脉高压发病中肺动脉平滑肌细胞增殖同时不伴有凋亡水平的显著变化。

腹主动脉瘤发病中平滑肌细胞增殖与凋亡的关系

探讨在腹主动脉瘤形成过程中细胞周期调控下的细胞增殖与死亡的关系。选取豚鼠—大鼠异种移植腹主动脉瘤模型 ,以平滑肌细胞α 肌动蛋白、增殖细胞核抗原抗体免疫组织化学检测和原位末端DNA标记法分别作为血管平滑肌细胞定性定位、细胞增殖与凋亡分析方法 ,利用计算机图像分析技术动态观测术后 1、2、3、4周阳性细胞灰度值和百分比。结果发现 ,1～ 2周 ,移植腹主动脉直径已有中度扩张 ,细胞增殖指数大于细胞凋亡指数 ;3～4周 ,移植物呈显著扩张 ,细胞凋亡指数大于细胞增殖指数 ;移植组血管平滑肌细胞凋亡与移植动脉直径呈现显著正相关。证明细胞增殖和凋亡贯穿于腹主动脉损伤重构的全过程 。

转录调节因子Ets-1在大鼠血管平滑肌细胞增殖与凋亡中的作用

目的:研究转录调节因子Ets-1对大鼠血管平滑肌细胞增殖与凋亡的影响及其可能的机制。方法:用定量细胞DNA片段的方法观察大鼠血管平滑肌细胞增殖与凋亡。用W estern印迹法检测磷酸化视网膜母细胞瘤(RB-P)蛋白表达。结果:Ets-1抑制大鼠血管平滑肌细胞凋亡。反义P21WAF1/CIP1能够阻断Ets-1的抗凋亡作用,并抑制Ets-1诱导的平滑肌细胞增殖。Ets-1能够上调RB-P蛋白表达,反义P21WAF1/CIP1可以阻断Ets-1诱导的RB-P蛋白表达。结论:在大鼠血管平滑肌细胞中,Ets-1通过P21WAF1/CIP1旁路发挥抑制凋亡和促进增殖作用。