平行五波长高效液相色谱指纹图谱全息整合法定量鉴定杞菊地黄丸的整体质量

建立了杞菊地黄丸(QijudihuangPill,QJDHP)平行五波长(PFW)高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并依据系统指纹定量法结合全息整合法定量鉴定了杞菊地黄丸的整体质量。采用反相HPLC法,以丹皮酚(POL)为参照物峰,分别于203、228、265、280和326nm下检测,分别确定了51、49、52、49和47个共有指纹峰,建立了QJDHP的PFW-HPLC指纹图谱。分别以权重法、均值法和投影参数法整合5个波长下各样品的定性定量全信息,结果基于5个波长综合信息用系统指纹定量法鉴定11批QJDHP样品,其中有8批质量为好,1批为较好,质量一般为2批。评价时以均值法最为简捷和准确。本实验结果表明,平行多波长指纹图谱整合法是基于从全信息角度整体定性和定量鉴定中药质量的有效可信方法,是对HPLC-二极管阵列检测(DAD)三维指纹图谱的简化定量处理,其整体综合定量鉴定结果具有可靠性。

平行五波长高效液相色谱指纹图谱全息整合法定量鉴定补中益气丸整体质量

目的建立补中益气丸(Buzhong Yiqi Wan,BZYQW)平行五波长HPLC指纹图谱,用全息整合法鉴定补中益气丸整体质量。方法采用RP-HPLC法,以橙皮苷(HI)为参照物峰,在203、228、265、280、326 nm下检测,分别确定了82、87、61、68、48个共有指纹峰,建立BZYQW平行五波长HPLC指纹图谱。分别以权重法、均值法和投影参数法整合五波长下各样品的定性定量全信息,并用系统指纹定量法(SFQM)鉴定了10批BZYQW的质量等级。结果 10批BZYQW,用平均值法评价S3和S5的质量等级是Ⅶ级(次);用权重法评价S3的质量级别是Ⅷ级(劣);用投影参数法评价S3、S5和S6的质量级别是Ⅶ级(次)。其余质量级别均≤Ⅵ(一般)。结论平行多波长指纹图谱全信息整合法是基于从多维全信息角度整体定性和整体定量鉴定中药质量的有效可信方法 ,可作为补中益气丸质量控制的依据。

平行五波长高效液相色谱指纹定量法测定柴胡舒肝丸化学指纹归属度和药效物质工艺收率

目的用柴胡舒肝丸(CHSGW)平行五波长HPLC指纹图谱研究其化学指纹归属度和药效物质工艺收率。方法以水煎混合样品指纹图谱为评价标准,采用归属度pi、逸出度qi、宏定性相似度Sm和宏定量相似度Pm进行化学指纹归属的整体定性定量分析,用指纹定量法测定CHSGW药效物质工艺收率。结果以S1模拟样为参照,按化学指纹贡献S16黄芩应为君药,S7甘草和S22大黄是臣药。用指纹定量法在五波长下评价出3批市售样品质量均较差。结论平行五波长指纹定量法更能够客观、准确地定量描述单味药对CHSGW化学指纹的贡献率和整体定性定量评价药效物质工艺收率,为CHSGW质量控制提供了新参考。

用双标定量指纹法定桂附地黄丸平行五波长高效液相色谱对照指纹图谱标准

目的用双标定量指纹法研究桂附地黄丸(Guifu Dihuang Wan,GFDHW)对照指纹图谱(RFP)来实现指纹图谱标准的复原。方法采用HPLC等吸收双波长法测定了桂附地黄丸中没食子酸、5-羟甲基糠醛、芍药苷、马钱苷和丹皮酚含量。在210、230、246、265和280nm 5个特征检测波长处建立GFDHW平行五波长指纹谱;以没食子酸和丹皮酚为双参照物峰,采用双标定量指纹法恢复GFDHW-RFP。结果以GFDHW中5组分含量测定结果和平行五波长指纹谱鉴定结果分别聚类分析比较不同厂家产品质量差异,结果以后者更为准确可靠。建立了GFDHW双标定量指纹法技术标准。结论基于多指标定量分析和平行五波长高效液相指纹谱的双标定量指纹法能够确定RFP的标准制剂和实现实时随行定量检测GFDHW指纹图谱,这是GFDHW现代化的有效新方法。

基于全时段多波长融合特征定量指纹图谱的满药仙灵脾颗粒质量控制方法研究

目的建立全时段多波长融合特征定量指纹图谱,为仙灵脾颗粒质量控制提供科学依据。方法选取270 nm、327 nm、353 nm 3个波长,建立10批仙灵脾颗粒的高效液相(HPLC)指纹图谱,确定18个共有峰,通过对照品指认出8个成分;指纹图谱与多指标成分含量测定结合,建立全时段多波长融合特征定量指纹图谱,并将8个成分进行相对于内标物柚皮苷的含量测定;同时选取5个批次的仙灵脾颗粒,对其8个成分进行绝对定量,确定建立的含量测定方法的误差率。结果建立了全时段多波长融合特征定量指纹图谱,运用其对仙灵脾颗粒指认出的成分进行相对定量,其结果与绝对定量相比,误差率小于5%。结论所建立的方法准确可靠,可用于仙灵脾颗粒的质量控制,并为中药复方的质量评价提供参考。

灯红补阳还五颗粒指纹图谱及有效成分含量研究

目的研究灯红补阳还五颗粒(DBHG)的指纹图谱,筛选其质量标志物,并建立测定有效成分含量的方法。方法采用高效液相色谱(HPLC)法。使用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立10批(S1~S10)DBHG的指纹图谱,评价其相似度,并对共有峰进行药味归属分析、聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)以及正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),以变量重要性投影(VIP)值>1为标准筛选质量标志物;采用同一HPLC法测定10批样品中红景天苷、酪醇、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、野黄芩苷、毛蕊异黄酮的含量。结果从10批样品的指纹图谱中,共获得25个共有峰,指认了6个共有峰,分别为红景天苷、酪醇、芍药苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、野黄芩苷、毛蕊异黄酮;10批样品相似度均大于0.9,其中10个共有峰为灯盏细辛特有成分。CA、PCA均可将DBHG聚为2类,S4~S5、S7样品为一类,其余样品为一类。16(野黄芩苷)、12、15(毛蕊异黄酮葡萄糖苷)、13(芍药苷)、14号峰对应的成分为DBHG的质量标志物。10批样品中红景天苷、酪醇、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、野黄芩苷、毛蕊异黄酮的平均含量分别为1.64、0.45、0.31、0.73、0.15 mg/g。结论成功建立了DBHG的HPLC指纹图谱和红景天苷等5个有效成分的含量测定方法,筛选得到5个质量标志物,可用于该制剂的质量控制。

三级系统指纹定量法评价丹参五波长HPLC指纹图谱

目的建立丹参五波长HPLC指纹图谱,用三级系统指纹定量法鉴定丹参整体质量。方法采用RP-HPLC法,以丹酚酸B(SAB)为参照物,于254、265、280、290、326 nm下检测,分别确定了45、48、39、36、21个共有指纹峰,建立了丹参五波长HPLC指纹图谱。分别以权重法、均值法和投影参数法整合五波长下各样品的定性定量全信息,基于综合信息用三级系统指纹定量法鉴定10个产地丹参的质量等级。结果 8批药材质量基本合格,2批药材质量明显不合格。结论基于多波长整合图谱的三级系统指纹定量法能够对中药系统的化学指纹进行整体定性、定量分析,是评价中药质量的便捷有效方法,可作为丹参质量控制的依据。

愈康降糖胶囊五波长高效液相色谱数字化定量指纹图谱研究

目的建立愈康降糖胶囊(YKJTC)五波长HPLC指纹图谱,同时测定尿囊素、马钱苷、葛根素、丹酚酸B、小檗碱、人参皂苷Rb_1含量。方法采用RP-HPLC法建立15批愈康降糖胶囊203、236、250、280和320 nm五波长HPLC指纹图谱,以葛根素为参照物峰来确立共有指纹峰,以9级系统指纹定量法全面评价其质量,将五波长指纹图谱按均值法生成对照指纹图谱评价样品质量,再按均值法整合五波长下的宏定性相似度(Sm)、9级宏定量相似度(P9)和指纹均化性变动系数(α),重新评价15批YKJTC的质量。采用均值法、色谱指纹图谱指数权重和信息熵权重对五波长评价结果进行整合,以及HPLC法同时测定7组分含量。结果 236 nm波长下确定了46个共有指纹峰,建立了YKJTC数字化指纹图谱。用9级系统指纹定量法鉴定15批YKJTC中1批为质量极好(1级),1批为很好(2级),5批为好(3级),1批为良好(4级),3批为中(5级),4批为一般(6级)。采用均值法、色谱指纹图谱权重和信息熵权重对五波长评价结果进行整合。除了S03、S04、S05和S06等级稍差,整合前后样品质量等级均在5级以内,无异常样品检出。结论 15批YKJTC质量均一性良好,采用五波长指纹图谱法可准确评价中药复方质量均一性。

五波长高效液相色谱指纹谱定量鉴定速效救心丸

目的建立速效救心丸五波长HPLC指纹谱(FW-HPLC-FP),综合鉴定速效救心丸质量。方法用均值法和主成分整合法分析五波长下各样品定性定量信息,用系统指纹定量法鉴定了12批样品。结果以藁本内酯为参照物峰,根据速效救心丸中化学成分的最大紫外吸收选择检测波长为265 nm、276 nm、290 nm、300 nm和310 nm,并分别指认了29、31、29、27和24个共有指纹峰。以系统指纹定量法鉴定了12批速效救心丸样品质量差异。结论所建立方法快捷、有效和可靠,可作为速效救心丸整体质量控制参考。

五波长高效液相色谱指纹图谱和紫外指纹图谱联用评价二妙丸质量

目的建立二妙丸（Ermiao pill，EMP）平行五波长HPLC定量指纹图谱（PFW-HPLC—FP），并与紫外定量指纹图谱（wFP）联用，把PFW-HPLC—FP整合后再与UV-FP进行等权融合用以综合评价EMP质量。方法采用RP—HPLC法，记录EMP在246、265、290、326、345nm5个平行波长下色谱图，以小檗碱为参照物峰。分别确立55（246nm）、57（265nm）、54（290nm）、44（326nm）和41（345nm）5个共有指纹峰。以系统指纹定量法全面鉴定EMP质量，采用均方开方法（SRAS）整合5波长下的品和Pm及α，并重新评价12批EMPs质量。用紫外定量指纹图谱和一阶导数定量指纹图谱基于系统指纹定量法进行质量评级。最后把PFW．HPLC—FP的sRAs结果和UV-FP结果等权整合来评价EMP质量。结果PFW-HPLC．FP的SRAS结果和UVFP等权整合后鉴定12批EMPs的S3和S7质量（1级）极好；S1、S9、S10、S11和S12质量（2级）很好；S2、S4、S5、S6和S8质量（3级）好。结论由一元五维波长HPLC定量指纹图谱与一元全区段（190～400nm）连续紫外定量指纹图谱联用构成二元色谱一光谱指纹图谱，按均值法整合后鉴定中药质量既能突出紫外吸收大的化学成分作用，也能避免漏检紫外吸收小的化学组分的贡献，鉴定结果优于简单一元指纹图谱对质量评价的准确度。

高效液相色谱-线性指纹定量法评价人参归脾丸的三波长指纹图谱

以样品指纹向量与对照指纹向量的多元化学组分间存在线性函数关系为基础,引入相关系数r、斜率a、截距b及线性定性相似度SL、线性定量相似度ML等概念,建立线性指纹定量法(linearly quantified fingerprint method,LQFM)模型以定性、定量控制中药质量。用高效液相色谱-二极管阵列检测法(HPLC-DAD)同时测定了10批人参归脾丸(Renshen Guipi Wan,RSGPW)分别在203、228和326 nm下的高效液相色谱指纹图谱,运用LQFM理论模型,鉴定RSGPW质量。LQFM能显著区别不同来源的产品,同一厂家产品质量控制一致。鉴定结果与已知的系统指纹定量法评价结果对比,LQFM对中药多元化学成分的复杂系统能实现客观的定性、定量评价。多波长指纹图谱能最大限度地兼顾中药各成分的紫外吸收特征,对中药质量控制具有更全面和可靠的特点。

三波长融合指纹图谱结合6组分定量和主成分分析评价银翘解毒片的质量

建立了三波长融合高效液相色谱指纹图谱,并结合6组分定量和主成分分析(PCA)评价25批银翘解毒片的质量一致性。采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)分别于230、279、327 nm下检测。运用多波长融合指纹图谱技术建立银翘解毒片三波长融合指纹图谱,采用系统指纹定量法对其进行定性和整体定量评价。结果鉴别出25批银翘解毒片样品完全合格且区分良好。同时测定6组分含量,与指纹图谱结合,从整体和局部角度评价银翘解毒片质量。此外,运用PCA法对融合指纹图谱进行分析,通过主成分得分图可以明显区分来自两个厂家的25批银翘解毒片样品。方法综合性较强且有效,为科学评价与有效控制银翘解毒片的质量提供了可靠的参考。

基于三波长融合谱的系统指纹定量法鉴定龙胆泻肝丸的真实质量

建立了龙胆泻肝丸(Longdanxiegan pill,LDXGP)三波长融合高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,以系统指纹定量法全面鉴定LDXGP的质量。采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),运用多波长融合指纹图谱技术对色谱图进行处理,以黄芩苷为参照物峰,确立了63个共有指纹峰,以宏定性相似度为参量对12个厂家的12批LDXGP进行聚类分析,确定用其中10批生成对照指纹图谱(RFP),以此RFP为标准用系统指纹定量法评价12批LDXGP的质量。结果鉴别出9批质量完全合格,1批含量明显偏高,2批化学成分数量和分布比例不合格。基于多波长融合技术的系统指纹定量法是评价中药真实质量的可靠方法。

丹参四波长串联定量指纹图谱与抗氧化活性谱相关研究

目的建立丹参(Danshen,DS)四波长HPLC指纹图谱和四波长串联指纹图谱,结合9个Markers定量分析和抗氧化活性研究来评价丹参药材质量的一致性。方法用高效液相色谱法采集30批DS在270、280、290、326 nm的指纹图谱和在线DAD 190~400 nm数据,采用系统指纹定量法(SQFM)评价各批次丹参药材质量,并基于Sm、Pm和α参数评价DS质量一致性。采用紫外分光光度(UV)法测定30批DS样品的IC50数据,用IC50倒数值与290 nm指纹峰面积进行相关分析。结果对四波长下定量指纹图谱用均值法整合,除RFP外,有6批质量极好(1级),8批质量很好(2级),13批质量好(3级),1批质量良好(4级),1批质量中(5级),1批质量一般(6级)。定量测定到9个Markers:原儿茶酸(PHA)、原儿茶醛(PHD)、丹参素钠(PPA)、咖啡酸(CFA)、迷迭香酸(RMA)、紫草酸(LSA)、丹参酮2A(T2A)、丹酚酸B(SAB)和丹酚酸A(SAA),证明其中7种具有很强的抗氧化能力。用四波长串联HPLC指纹评价丹参质量的结果与均值法整合四波长HPLC指纹图谱的评价结果基本一致。结论 30批DS质量均一性良好,用四波长串联HPLC指纹的评价结果与均值法整合四波长HPLC指纹图谱的评价结果基本相当,多波长串联指纹图谱为中药生产质量控制提供了一种便捷定量指纹图谱控制方法,同时结合抗氧化活性谱分析为丹参质量一致性评价提供一种新方法。

五波长高效液相色谱指纹图谱和红外指纹图谱联合鉴定复方丹参片质量

目的建立复方丹参片(compound Danshen tablet,CDST)五波长HPLC指纹图谱(HPLC-FP),测定其红外定量指纹图谱(IR-FP)和一阶导数定量指纹图谱(D-IR-FP),先把五波长HPLC-FP整合后再与IR-FP进行等权整合用以综合评价其质量。方法采用RP-HPLC法,记录254、265、280、290和326 nm 5个波长下色谱图,以丹酚酸B为参照物峰,确立40个共有指纹峰。以系统指纹定量法全面鉴定其质量,将五波长测得100个指纹图谱按均值法生成对照指纹图谱评价样品质量,分别在每个波长下进行评价,再按方均开方值法整合5个波长下的Sm和Pm及α,并重新评价20批CDST质量。用IR-FP和一阶导数定量指纹图谱基于系统指纹定量法进行质量评级。最后把HPLC-FP和IR-FP等权整合。结果 HPLC-FP和IR-FP等权整合后鉴定20批CDSTs的S9质量(1级)极好;S8,S13和S18质量(2级)很好;S4、S6和S16质量(4级)较好;其余13批质量(3级)均好。结论多波长HPLC-FP结合IR-FP联合鉴定中药质量即能突出紫外吸收化学成分也能表达饱和化学键成分对质量评价的贡献作用。

五波长高效液相指纹谱与紫外指纹谱联用评价六味地黄丸质量均一性研究

目的建立浓缩六味地黄丸(CLWDHP)五波长高效液相色谱指纹图谱,测定紫外定量指纹图谱和其一阶导数定量指纹图谱。方法先将五波长HPLC指纹图谱整合,再分别和2种紫外指纹图谱整合,基于系统指纹定量法综合评价其质量均一性。采用RP-HPLC法,记录203、236、274、300、326 nm 5个波长下色谱图,以马钱苷为参照物峰来确立共有指纹峰。以系统指纹定量法全面鉴定其质量,将五波长指纹图谱按均值法生成对照指纹图谱评价样品质量,再按方均开方法整合五波长下S m和P m及α,并重新评价22批CLWDHPs质量。用紫外定量指纹谱和一阶导数定量指纹谱基于系统指纹定量法进行质量评价,最后把HPLC和紫外指纹谱整合。计算各整合方法下质量均匀度。结果 HPLC-FP和UV-FP整合后鉴定S2、S10、S12、S13、S14、S19和S22质量极好(1级),S1、S4、S5、S6、S7、S15、S16和S17质量很好(2级),其余7批质量好(3级)。各方法所得宏定性相似度均匀度K值均<10,宏定量相似度均匀度K值均<20。结论 22批六味地黄丸(浓缩丸)质量均一性很好,采用五波长指纹谱和紫外指纹谱联用可准确评价中药复方质量均一性。

三波长定量指纹谱结合4种化合物定量测定银翘解毒丸对照指纹图谱标准

目的建立双标定量指纹法精确恢复银翘解毒丸对照指纹图谱(RFP)标准,以实现动态指纹图谱标准的校正和复原。方法用RP-HPLC法对银翘解毒丸(YQJDP)中绿原酸、咖啡酸、连翘苷和牛蒡苷4组分进行定量分析。建立228、265和280 nm下YQJDP-HPLC指纹图谱,采用均值法整合三波长下定性定量全信息,应用六级系统指纹定量法对其进行评价。选择绿原酸和牛蒡苷为双参照物峰(双标),采用双标定量指纹法恢复YQJDP-RFP。结果三波长整合指纹图谱评价结果如下:S3、S4、S6和S8质量为极好(1级),S2、S5、S7和S9质量为很好(2级),DS1质量中(5级),S1、DS3、DS4、WS1和WS2质量次(7级),DS2质量劣(8级)。含量测定结果与指纹图谱评价结果很一致。在此基础上建立YQJDP双标定量指纹法技术标准。结论基于多指标定量分析和多波长HPLC指纹谱的双标定量指纹法能够找到产生RFP的标准制剂和实现实时随行定量检测YQJDP指纹图谱。

柴胡安心胶囊平行四波长高效液相色谱指纹图谱研究

目的建立柴胡安心胶囊(CHANCs)的四波长高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。方法采用HPLC法,分别于254,275,290,330 nm波长下对样品进行检测,建立CHANCs平行四波长高效液相色谱指纹图谱,以均值法整合各样品的色谱信息,结合系统指纹定量法区分8批样品的质量差异。结果以葛根素为参照指纹峰,分别标定了63,65,53,27个共有峰。8批CHANCs中1批(S7)质量好,2批(S1,S3)质量很好,5批(S2,S4,S5,S6,S8)质量极好。结论平行多波长指纹图谱联合系统指纹定量法鉴定CHANCs的质量稳定、可靠。

基于双波长HPLC指纹谱和其融合谱的系统指纹定量法鉴定甘草质量

目的建立甘草双波长HPLC指纹图谱及其融合谱,用系统指纹定量法鉴定其质量。方法采用RP-HPLC法,运用双波长融合谱技术分别对10批产地甘草提取具有代表性和互补性的203和254 nm的局部色谱图,融合生成对照指纹图谱(RFP)。用系统指纹定量法通过对双波长谱及其融合谱的评价,实现对10批不同产地甘草真实质量的鉴别。并对甘草化学指纹进行破坏性试验考察。结果基于203 nm HPLC指纹谱与融合谱的系统指纹定量法评价结果基本一致,用主成分分析和F值证明了融合谱优于此双波长HPLC指纹图谱可用于甘草药材质量控制。结论203和254 nm及融合谱的含量相似度Pm有一定波动是由于不同波长谱反映的化学成分的信号大小有一定的差异,导致评价的结果有出入。基于此双波长融合谱的系统指纹定量法的评价结果反映化学指纹信息全面、真实可靠,可清晰准确鉴别甘草真实质量。

平行多波长色谱指纹图谱均值评价法的不确定度和可靠度研究

目的建立平行多波长色谱指纹谱均值法(PMW-FP-AM)的不确定度和可靠度评价理论,并用以评价单批二妙丸(Ermiao Wan,EMW)平行六波长指纹谱均值法(PSW-FP-AM)结果与均值法(AM)对应标准谱的不确定度和可靠度。方法采用RP-HPLC法测定二妙丸平行六波长HPLC指纹图谱(EMW-PSW-HPLC-FP),以均值法和系统指纹定量法综合鉴定11批EMW质量。结果以小檗碱为参照物峰,分别确定53(254nm)、54(265nm)、51(284nm)、57(305nm)、53(326nm)和47(340nm)个共有指纹峰,建立了EMW-PSW-HPLC-FP。用PSW-FP-AM鉴定S2、S6和S10(Ⅰ级)质量最好,S7、S8和S9(Ⅱ级)质量很好,S5和S11(Ⅲ级)质量好,S1、S3和S4(Ⅵ级)质量一般。评价出EMW-PSW-FP-AM对应标准的定性定量及均化性可靠度均>0.97,表明标准谱反映的化学指纹数量和含量分布比例与整体含量信息的可靠度极高。S2、S5、S6、S7、S8、S9和S10的定性定量信息可靠度(0.918～0.984)极高,S11定性定量信息可靠;S1、S3和S4的定性定量信息的可靠度(0.778～0.881)中等。结论所建立方法能准确反映PMW-FP-AM结果所代表质量信息的不确定性,评价PMW-FP-AM标准和单批指纹图谱所表征的中药质量的定性和定量信息的可靠程度。