晚期非小细胞肺癌患者手术标本人源核苷酸平衡转运体1蛋白表达与吉西他滨化疗敏感度的相关性分析

目的 评价非细小细胞肺癌（NSCLC）患者术后人源核苷酸平衡转运体1（hENT1）蛋白表达水平与吉西他滨化疗敏感度的相关性。方法筛选2007—2011年浙江金华广福医院肿瘤内科收治的经病理确诊为NSCLC并行手术切除后患者47例，完全随机分为GP组和NP组，GP组23例选用吉西他滨联合顺铂化疗，顺铂80 mg/m^2，第 1-3 天静脉滴注，吉西他滨 800-1 250 mg/m^2，第1、8天使用；NP组24例选用长春瑞滨联合顺铂化疗，顺铂用法同前，长春瑞滨 25 mg/m^2，第1、8天使用。对47例患者手术切除肺癌组织蜡块标本采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶连结法检测hENT1蛋白表达水平。术后实施2周期以上吉西他滨或长春瑞滨化疗，随访患者的生存期，评价hENT1蛋白表达水平与2种化疗方案疗效相关性。结果GP组hENT1高表达患者13例，无进展生存期为（28±18）个月，中位无进展生存期32个月；NP组hENT1高表达患者14例，无进展生存期为（24±16）个月，中位无进展生存期22个月，差异均有统计学意义（P=0.042，P=0.037）。GP组hENT1低表达患者（10例）中位总生存期35个月,NP组hENT1低表达患者（10例）中位总生存期34个月比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论对于NSCLC患者， hENT1蛋白表达程度与吉西他滨的化疗敏感性相关。

阿糖胞苷作用下白血病细胞膜人核苷转运体1基因表达变化研究

目的检测肿瘤细胞膜上人平衡型核苷转运体1(human equilibrative nucleoside trans-porter 1,hENT1)基因表达及其变化,探索影响阿糖胞苷(Ara-C)治疗急性白血病(AL)疗效的相关因素。方法根据目前临床采用的低剂量、中剂量和大剂量Ara-C(HD-AraC)治疗时所能达到的血浆药物浓度,分别采用0.5～100μmol/L中的6种不同剂量(0.5、1.0、5.0、15、50、100μmol/L)体外作用于白血病细胞株Jurkat和NB4,经4～48 h的5个时间段(4、8、12、24、48 h)作用后,采用定量RT-PCR方法测定hENT1 mRNA表达及其变化。结果 (1)Jurkat和NB4细胞的hENT1mRNA原始相对表达量(ΔCt值)分别为5.21±0.02和5.34±0.05,两者差异无显著性(P>0.05)。(2)在较低剂量Ara-C(0.5～15μmol/L)作用下,hENT1 mRNA表达恒定,与阴性对照组差异无显著性(P>0.05);但在高浓度Ara-C(50μmol/L和100μmol/L)作用48 h后,Jurkat和NB4细胞的hENT1 mRNA表达明显增强,ΔCt分别为2.02±0.17和2.19±0.02,与对照组(5.21±0.02)比较差异均有显著性(P<0.05)。(3)同一种细胞在50μmol/L和100μmol/L两个剂量组的hENT1mRNA表达增高程度,差异无显著性(P>0.05);分别来源于ALL和AML的Jurkat和NB4细胞的表达量间差异亦无显著性(P>0.05)。结论 HD-AraC处理48 h后,Jurkat和NB4细胞的hENT1mRNA表达可明显提高,有利于药物进入细胞,以增强抗白血病效应,推测临床HD-AraC疗法采用48～72 h的疗程是必要的。

人类平衡型核苷转运蛋白1高表达晚期非小细胞肺癌患者术后应用不同剂量吉西他滨治疗的临床效果观察

目的 观察晚期非小细胞肺癌（NSCLC）中人类平衡型核苷转运蛋白1（hENT1）高表达患者应用不同剂量吉西他滨治疗的临床效果.方法 选取2008年7月至2013年12月于浙江金华广福医院行晚期NSCLC手术后,病理确诊晚期NSCLC患者,采用免疫组织化学SP法检测肺癌组织中hENT1抗体的表达水平.62例hENT1高表达患者入组,按随机数字表分组法分为对照组（30例）和观察组（32例）.对照组采用常规剂量吉西他滨（1 000 mg/m2）联合顺铂进行化疗,观察组用低剂量吉西他滨（250 mg/m2）联合顺铂进行化疗,观察2组近期疗效、化疗不良反应.采用生活质量调查核心量表QLQ-C30和肺癌专用量表QLQ-LCl3比较2组化疗后生活质量.结果 对照组和观察组近期有效率和疾病控制率差异无统计学意义[43.3％ （13/30）比46.9％ （15/32）,76.9％ （23/30）比81.2％（26/32）]（x2 =0.08,x2 =0.20,P＞0.05）.观察组Ⅲ、Ⅳ度白细胞减少、血小板减少及恶心、呕吐发生率低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;除角色功能外,观察组化疗后总体生活评分及躯体功能、情绪功能、认知功能、社会功能、经济状况各项评分均优于对照组[（54±20）分比（54±16）分,（72±25）分比（62 ±20）分、（85 ±20）比（72±19）分、（76±28）分比（62±25）分、（61 ±24）分比（49 ±30）分、（36±24）分比（56±21）分],差异均有统计学意义（均P＜0.05）.观察组除乏力症状外其他症状评分均优于对照组（P＜0.05）.结论 对于晚期NSCLC术后hENT1高表达患者,在保证化疗效果的同时,相对于常规剂量吉西他滨,低剂量用药可有效降低化疗过程中不良反应,提高患者的生活质量.

切除修复交叉互补基因1、核糖核苷酸还原酶M1亚基和3型β微管蛋白分子检测指导晚期非小细胞肺癌个体化治疗的临床效果

目的探讨切除修复交叉互补基因1（ERCC1）、核糖核苷酸还原酶M1亚基（RRMl）和3型β微管蛋白（TUBB3）分子检测在指导晚期非小细胞肺癌（NSCLC）个体化治疗的临床效果。方法将2013年1～11月秦皇岛市第二医院胸外科住院治疗的48例经病理确诊的晚期NSCLC患者分为实验组（20例）和对照组（28例）。实验组采用SYBR荧光实时定量PCR检测方法检测患者胸水或静脉血中ERCC1、RRM1和TUBB3的表达量，根据表达情况选择化疗方案：对照组则均采用顺铂与吉西他滨联合治疗。经过2个周期治疗后比较两组的疗效、不良反应及疾病进展、生存获益情况。结果实验组的总有效率和总控制率均显著高于对照组（P〈0．05）；实验组和对照组治疗后的PS评分均显著高于治疗前（P〈0．05），但两组治疗后的PS评分、PS评分改善率差异均无统计学意义（P〉0．05）；两组间不良反应发生率差异无统计学意义（P〉0．05），且两组间不同系统的不良反应严重程度差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论实时定量PCR技术检测病理组织的ERCC1、RRM1和TUBB3表达水平用于指导晚期NSCLC患者个体化治疗，可提高治疗有效率和疾病控制率，但在改善生活质量和减少不良反应发生效果不显著．建议进一步探索标志物指导下更为有效的化疗方案。

南非2型口蹄疫病毒VP1基因的核苷酸及其氨基酸序列分析

VP1基因的遗传衍化关系是口蹄疫病毒分型的依据,而且许多重要的抗原位点也都位于VP1蛋白上。为了对南非2型口蹄疫病毒(SAT2-FMDV)VP1的编码基因序列及其氨基酸序列进行分析,为南非2型口蹄疫的诊断及疫苗设计提供理论基础,试验从NCBI下载大量的南非1/2/3型口蹄疫病毒(SAT1/2/3-FMDV)的1D2A2B基因片段,通过序列分析选择相似性较低的序列代表SAT1/2/3,将选中的代表序列连接于p UC57载体上进行合成,再对合成的含目的序列的穿刺菌进行划板、挑单克隆、摇菌、提质粒,得到重组质粒初步进行酶切鉴定后进行测序,测序正确后采用DNAStar软件包对这些合成序列进行分析。结果表明:SAT2-FMDV VP1的编码基因核苷酸序列变异度较大;虽然SAT2口蹄疫病毒VP1蛋白上主要抗原位点位置与其他血清型的差异性并不大,但是关键氨基酸已发生变化。

原发性开角型青光眼视神经损伤患者血浆内皮素-1水平与核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎症复合体及炎症因子和眼动脉血流的相关性

目的探讨原发性开角型青光眼(POAG)视神经损伤患者血浆内皮素-1(ET-1)水平与外周血巨噬细胞中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症复合体、血清炎症因子水平及眼动脉血流的关系。方法选择2018年2月至2020年2月焦作市人民医院收治的117例POAG视神经损伤患者为研究对象,依据视野的平均缺损(MD)分为轻度损伤组(MD<7 dB,43例)、中度损伤组(7≤MD≤12 dB,35例)和重度损伤组(MD>12 dB,39例),比较3组患者血浆ET-1水平、血清白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-12、IL-18、IL-1β水平、外周静脉血巨噬细胞中NLRP3、凋亡相关微粒蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1)水平及眼动脉收缩期最大流速(PSV)、舒张末期血流速度(EDV)、阻力指数(RI),并分析血浆ET-1水平与外周血巨噬细胞中NLRP3炎症复合体、血清炎症因子水平及眼动脉血流的关系。结果3组患者血清IL-2、IL-4、IL-6水平比较差异无统计学意义(P>0.05);重度损伤组和中度损伤组患者血浆ET-1及血清IL-18、IL-1β水平显著高于轻度损伤组(P<0.05),重度损伤组患者血浆ET-1及血清IL-18、IL-1β水平显著高于中度损伤组(P<0.05);重度损伤组和中度损伤组患者血清IL-12水平显著低于轻度损伤组(P<0.05),重度损伤组患者血清IL-12水平显著低于中度损伤组(P<0.05)。重度损伤组和中度损伤组患者外周血巨噬细胞中NLRP3、ASC、caspase-1水平显著高于轻度损伤组(P<0.05),重度损伤组患者外周血巨噬细胞中NLRP3、ASC、caspase-1水平显著高于中度损伤组(P<0.05)。重度损伤组和中度损伤组患者眼动脉PSV、RI显著高于轻度损伤组,眼动脉EDV显著低于轻度损伤组(P<0.05);重度损伤组患者眼动脉PSV、RI显著高于中度损伤组,眼动脉EDV显著低于中度损伤组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,POAG视神经损伤患者血浆ET-1水平与血清IL-18、IL-1β及外周血巨噬细胞中NLRP3、ASC、caspase-1水平和眼动脉PSV、RI呈显著正相关(P<0.05),与眼动脉EDV呈显著负相关(P<0.05),与血清IL-12水平无显著相关性(P>0.05)。结论POAG患者血浆ET-1水平与视神经损伤程度呈显著正相关,且与外周血巨噬细胞中NLRP3炎症复合体、血清炎症因子水平及眼动脉血流状态有相关性,检测血浆ET-1水平可为POAG患者的病情评估及临床治疗提供参考。

CpG寡脱氧核苷酸对外周血单个核细胞功能的影响：1型糖尿病患者与健康者对照

背景:有研究表明CpG寡脱氧核苷酸可增强外周血单个核细胞的功能,但对1型糖尿病患者的影响至今少有报道。目的:观察CpG寡脱氧核苷酸对1型糖尿患者患者与健康志愿者外周血单个核细胞γ干扰素、白细胞介素12,10表达的影响。方法:将1型糖尿病患者与健康志愿者的外周血单个核细胞根据刺激物不同分为空白对照组、CpG寡脱氧核苷酸组。用RT-PCR法检测外周血单个核细胞γ干扰素、白细胞介素12mRNA和白细胞介素10mRNA的表达。结果与结论:1型糖尿患者γ干扰素和白细胞介素12mRNA的表达明显低于健康志愿者(P<0.01)。1型糖尿患者与健康志愿者外周血单个核细胞经CpG寡脱氧核苷酸组刺激后,γ干扰素和白细胞介素12mRNA的表达增高(P<0.01),白细胞介素10mRNA的表达无差异(P>0.05)。结果提示,CpG寡脱氧核苷酸可促进1型糖尿患者外周血单个核细胞表达γ干扰素和白细胞介素12。

核苷酸内焦磷酸酶磷酸二酯酶1基因K121Q多态性与2型糖尿病的相关性研究

目的探讨中国黑龙江汉族人群核苷酸内焦磷酸酶磷酸二酯酶1（Ecto—nucleotidepyrophosphatase／phosphodies-terase1，ENPPl）基因第4外显子K121Q对糖尿病发病的影响及其两者之间的关系。方法运用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）方法检测146例2型糖尿病（T2DM）患者（T2DM组）和238例糖耐量正常对照健康人（对照组）EN—PPl基因K121Q的多态性分布，同时检测其临床及生化指标，进行随机对照研究。结果①T2DM组XQ（KQ＋QQ）基因型频率高于对照组（21．23％VS10．50％，P=0．0038），其Q等位基因频率亦高于对照组（10．96％VS5．25％，P=0．0034），差异有统计学意义；②携带Q等位基因个体与携带K等位基因个体两组比较，在性别构成、年龄、身高、体重、体重指数（BMI）l、腰围、臀围、腰臀比（WHR）、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素水平（FINS）、HOMA—IR差异均无统计学意义（P〉0．05）；（④Logistic回归显示，ENPPl基因K121Q多态性与T2DM相关（OR=2．30，95％CI=1．29—4．08，P=0．0038）；④汉族人群Q等位基因携带频率低于其他人群（非西班牙裔白人、美国黑人和西班牙人）。结论①ENPPl基因K121Q位点Q等位基因与中国黑龙江省汉族人群T2DM发病相关；②T2DM患者中携带Q等位基因个体无明显胰岛素抵抗表现；（~）ENPPl基因K121Q位点的多态性有明显种族地域差异性。

局部应用血管紧张素Ⅱ_1型受体反义寡核苷酸对大鼠颈动脉损伤后内膜增生的影响

目的 观察血管紧张素Ⅱ1型受体的反义寡脱氧核苷酸对氮气干燥后的大鼠颈动脉内膜增生的影响 ,以期为临床防治再狭窄提供一种新的基因治疗策略。方法 动物分为六组 :反义组、正义组、错配组、阳离子脂质体DOTAP组、对照组和假手术组 ,以压力为驱动系统 ,阳离子脂质体DOTAP为转染系统 ,局部、靶向将不同反义寡脱氧核苷酸转染于大鼠颈动脉内膜损伤段 ,阳离子脂质体DOTAP组仅应用DOTAP ,对照组剥脱内膜后不作任何处理 ,假手术组仅用 0 .9%生理盐水冲洗颈动脉。饲养 2周 ,处死动物 ,对所取的血管段进行组织切片和HE染色 ,在显微镜下进行观察和计算机彩色图像处理系统进行图像分析 ,计算血管腔面积、内膜面积、内膜 /中膜面积比值、最大内膜厚度、内膜 /中膜厚度比值和内膜覆盖率等指标并进行统计分析。结果 反义组管腔面积大于正义组、错配组、阳离子脂质体DOTAP组及对照组 ,小于假手术组 (P <0 .0 5) ;内膜面积、内膜 /中膜面积比值、最大内膜厚度、内膜 /中膜厚度比值和内膜覆盖率 :反义组小于正义组、错配组、阳离子脂质体DOTAP组及对照组 (P <0 .0 5) ;而正义组、错配组、阳离子脂质体DOTAP组与对照组两两相比上述指标无明显差异 (P >0 .0 5) ;

儿童1型糖尿病酮症酸中毒酸碱失衡59例分析

糖尿病酮症酸中毒（diabeticketoacidosis，DKA）是儿童1型糖尿病最常见的急性并发症和死亡原因。对其存在多重酸碱失衡报道较少。为了解酮症酸中毒患儿酸碱失衡情况，笔者对1993年3月-2005年9月在天津儿童医院内分泌科住院治疗的DKA患儿入院时血气分析和血电解质情况进行回顾性分析，以了解多重酸碱失衡情况，并探讨其对临床治疗的指导意义。

中国汉族人群PGC-1α基因Thr394Thr和Gly482Ser变异在2型糖尿病家系中传递的不平衡分析

目的了解中国汉族人群PGC-1α基因Thr394Thr和Gly482Ser变异与2型糖尿病的相关关系。方法招募350名中国南方汉族2型糖尿病先证者及其一级亲属，抽提外周血DNA。应用聚合酶链反应邛艮制性片段长度多态性（PCR—RFLP）分析和DNA直接测序技术鉴定PGC-1α基因型。基于2型糖尿病家系，采用单倍型相对危险度分析（HRR）和传递不平衡检验（TDT）方法分析Thr394Thr和Gly482Ser变异及其单倍型与2型糖尿病的关系。结果基于2型糖尿病家系的HRR分析显示，PGC-1α基因482Ser（A）等位基因更多向子代传递（x2=7．2170，P=0．0072，HRR=1．4496），而Thr394Thr（G／A）等位基因在传递与未传递两组间分布频率差异无统计学意义（x2=2．9557，P=0．0856，HRR=0．7638）。TDT分析提示，394Thr（A）-482Ser（A）单倍型在两组问分布差异有统计学意义（x2=33．160，P=0．002），且与2型糖尿病呈连锁不平衡关系（X2=4．6841，P=0．0292）。结论394A--482A联合变异可能增加了中国人患糖尿病的风险。

1型糖尿病酮症酸中毒15例诊治疗效观察

糖尿病酮症酸中毒是糖尿病严重急性并发症。极易并发休克、心衰、肾衰、中枢性呼吸衰竭。导致不可逆转的重要器官器质性病变，以致危及生命的可能发生，1型糖尿病呈酮症酸中毒倾向，有诱因更容易发生本病。我院自1996年6月-2006年6月之间共收治1型糖尿病DKA15例．采用小剂量短效普通胰岛素持续静滴．输液纠正电解质及酸碱平衡失调治疗。临床疗效满意，报道如下：

江苏地区汉族儿童多药耐药基因3个单核苷酸多态性位点的单倍型研究

目的分析江苏汉族人群多药耐药基因-1(MDR1)的单核甘酸多态(12外显子1236C→T突变、21外显子2677G→T/A突变、26外显子3435C→T突变)及其构成的单倍型分布。方法通过多重单碱基延伸反应(SNaPshotSNP分型技术)对江苏地区170名健康儿童的MDR1C1236T、G2677T/A、C3435T的SNP位点进行基因分型,统计各基因型频率。UNPHASED软件对MDR1的SNPs(C1236T-G2677T/A-C3435T)进行单倍型分析。结果在170例儿童中,等位基因1236T、2677T、2677A、3435T频率分别为63.5%、37.4%、17.0%和35.0%。基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡(HWE),差异无统计学意义(P>0.05)。MDR1的1236、2677、3435三个位点间(C1236T-G2677T/A-C3435T)存在连锁不平衡性,以TTT(31.8%)、TGC(25.3%)、CGC(17.7%)和CAC(16.2%)四种单倍型为主。结论江苏地区汉族人群MDR1的单核甘酸多态及单倍型分布具有自己的特点。在临床应用相关药物时,进行基因型及单倍型检测,将有助于指导临床个体化用药。

Kruppel样因子15通过调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3表达影响胰岛素抵抗实验研究

目的:探讨Kruppel样因子15(KLF15)是否通过调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)表达影响胰岛素抵抗。方法:建立小鼠模型和细胞模型,细胞蛋白电泳检测细胞内目的蛋白表达,聚合酶链反应(PCR)检测KLF15表达量,Western blot检测NLRP3相对表达量,免疫组化法检测组织KLF15表达,免疫荧光染色检测细胞增殖相关蛋白。结果:在链脲佐菌素(STZ)诱导小鼠模型中,小鼠诱导后1~4个月,血清KLF15 mRNA表达量水平被抑制。用10、20、40 mmol/L葡萄糖诱导HepG2细胞24 h后,细胞内KLF15 mRNA表达量水平随葡萄糖浓度升高而减少(均P<0.05)。小鼠组织中,KLF15、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)、胰岛素受体底物1(IRS1)在空白组表达最高,其次分别为1、2、4个月组;NLRP3在空白组表达最低,1、2、4个月组依次升高(均P<0.05)。在体外模型中,si-NLRP3质粒可以降低NLRP3表达量;抑制NLRP3表达可以减少干扰素-γ(INF-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和IL-1β表达,同时增加IRS1、GLUT4表达量;NLRP3过表达质粒可以促进NLRP3表达量,过表达NLRP3可以促进INF-γ、TNF-α、IL-6和IL-1β表达,同时减少IRS1、GLUT4表达量;上调KLF15可以抑制NLRP3蛋白表达,抑制KLF15可以促进NLRP3蛋白表达(均P<0.05)。结论:KLF15表达量与2型糖尿病(T2DM)胰岛素抵抗有关,KLF15低表达量可能会增加胰岛素抵抗。KLF15可能通过抑制NLRP3表达量减少T2DM胰岛素的炎症水平,抑制胰岛素抵抗。KLF15可能为胰岛素抵抗的T2DM的潜在治疗和诊断靶点,为以后的相关研究提供实验依据。

小麦TaDREB1基因的单核苷酸多态性分析

TaDREB1是一种转录因子,调控抗旱等抗逆相关基因的表达。以抗旱性不同的20份六倍体小麦和3份小麦的二倍体近缘种为材料,用直接测序法筛查TaDREB1基因DNA序列的单核苷酸多态性,在23份材料的38038bp序列中发现了271个SNP和14个InDel,平均140bp中有1个SNP,2717bp中有1个InDel。核苷酸多样性(Л)分析表明,小麦二倍体近缘种的Л值(0.02188)明显大于六倍体小麦的Л值(0.01029),说明该基因在二倍体种中的变异程度大于六倍体小麦,可能原因是六倍体小麦长期承受强大的人工选择压力。单倍型分析揭示了TaDREB1基因单核苷酸多态性与抗旱性表型的相关性,但同时也发现在个别单倍型里既有抗旱型材料又有对水分比较敏感的材料,揭示了抗旱性的复杂性,说明仅用TaDREB1基因的单核苷酸多态性还不能完全解释抗旱性复杂的表现型。

英国史宾格犬酪氨酸关联蛋白1(TYRP1)基因多态性及单倍型研究

探讨英国史宾格犬毛色与酪氨酸酶相关蛋白1（TYRP1）基因的相关性。本研究采用DNA测序技术、AS-PCR以及PCR-RFLP对英国史宾格犬群体的TYPR1基因编码区进行多态性检测和基因分型,分析多态位点间的关系。结果表明：TYRP1基因编码区存在3个多态位点,T121A和P345△2个多态位点基因型频率分布符合H-W平衡,C991T位点基因型频率分布不符合H-W平衡。经χ~2独立性检验,T121A和P345△多态位点与犬2种毛色极显著相关（P〈0.01）;C991T位点与犬2种毛色显著相关（P〈0.05）。3个多态位点两两间连锁不平衡分析发现连锁不平衡系数｜D′｜值都为1。3个多态位点构成3种单倍型：AC△、TTP和TCP;得到6种单倍型组合,每一种单倍型组合决定犬特定的毛色类型。因此,本研究成功建立了犬毛色基因TYRP1编码区多态位点的检测方法,为进一步研究毛色基因型与犬的胆量大小的相关性提供了前期工作基础。

五羟色胺转运体及神经肽S受体基因多态性与原发性失眠的致病机制研究

目的研究五羟色胺转运体(5-HTT)基因和神经肽S受体(NPSR)基因的多态性、连锁不平衡及单倍型与原发性失眠(PI)发生的相关性。方法利用生物信息学方法和国际HapMap计划以及NCBI公布的人群中的单核苷酸多态性(SNP)数据,构建出单体型域,并结合功能提示,共挑选5个5-HTT及13个NPSR等位基因频率>5%的单体型标签SNP位点。共收集157例原发性失眠症患者和133例年龄、性别相匹配的正常对照组,抽取静脉血分离后对5个5-HTT及13个NPSR标签SNP位点进行测序,利用SHEsis在线软件对所选SNP位点基因型及等位基因进行连锁不平衡和单倍型分析,得出结果。结果所有SNP位点基因型在对照组中符合Hardy-Weinberg平衡检测(P>0.05)。失眠组与对照组的年龄、性别差异无统计学意义(均P>0.05)。NPSR的SNP位点rs323920的T/C型与健康对照组比较差异有统计学意义(P=0.042),NPSR的SNP位点rs324957的A/G型与健康对照组比较差异有统计学意义(P=0.023)。连锁不平衡分析结果显示,5-HTT-SNP位点rs140700与rs6352之间存在完全连锁不平衡,13个NPSR SNP位点两两间进行连锁不平衡分析,发现多个位点之间存在完全连锁不平衡。单倍型结果分析示,5-HTT-SNP位点CGTT单倍型在PI组和对照组中的差异有统计学意义(P<0.05)。NPSR-SNP位点CACGGTCCCCAGC单倍型在PI组和对照组中的差异有统计意义(P<0.01)。结论神经肽S基因多态性rs323920位点和rs324957位点可能是原发性失眠的易感基因位点,NPSR的SNP单体型rs323920的基因型T>C变异和rs324957基因型的A>G变异可能是原发性失眠的易感基因,5-HTT和NPSR SNP位点的连锁不平衡与原发性失眠相关,NPSR-SNP位点CACGGTCCCCAGC单倍型组合为原发性失眠人群的危险基因,原发性失眠发生率显著升高。5-HTT和NPSR基因在原发性失眠的遗传病因中可能起着一定作用。

核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性体在2型糖尿病并发冠心病过程中的作用

目的探究核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎性体在2型糖尿病并发冠心病过程中的作用。方法选取第三军医大学新桥医院心血管内科的住院患者共130例,分为单纯冠心病组(n=40)、单纯2型糖尿病组(n=20)、2型糖尿病并发冠心病组(n=40)及正常对照组(n=30)。分离外周血单个核细胞及血浆。采用RT-q PCR、Western blot分别检测各组外周血单个核细胞中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosisassociated speck-like protein,ASC)、半胱天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1)mRNA及蛋白表达情况,ELISA法检测各组血浆中IL-1β含量。结果单纯冠心病组、单纯2型糖尿病组及2型糖尿病并发冠心病组外周血单个核细胞中NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA及蛋白表达水平均较正常对照组显著增高(P<0.05),其中,2型糖尿病并发冠心病组ASC、Caspase-1 mRNA在外周血单个核细胞中的表达显著高于单纯冠心病组及单纯2型糖尿病组(P<0.05),而2型糖尿病并发冠心病组NLRP3蛋白在外周血单个核细胞中的表达显著高于单纯冠心病组及单纯2型糖尿病组(P<0.05)。同时,测得单纯冠心病组、单纯2型糖尿病组及2型糖尿病并发冠心病组血浆中IL-1β含量分别为(24.05±1.00)、(22.86±1.66)、(26.85±1.45)ng/L,较正常对照组(12.53±2.79)ng/L均显著升高(P<0.05),其中,2型糖尿病并发冠心病组血浆中IL-1β含量显著高于单纯冠心病组及单纯2型糖尿病组(P<0.05)。结论 NLRP3炎性体的异常激活可促进2型糖尿病并发冠心病病理过程的发生、发展,其可能成为防治2型糖尿病并发冠心病的新靶点。

hENT1单核苷酸多态性与接受含吉西他滨方案非小细胞肺癌患者疗效的关系

目的探讨晚期非小细胞肺癌患者接受含吉西他滨方案的疗效与人类核苷酸平衡转运体(h ENT)1基因-706位点单核苷酸多态性间的关系。方法 225例经吉西他滨+顺铂或卡铂(GP)方案化疗的晚期非小细胞肺癌(ⅢA+ⅢB或者Ⅳ期)病例,化疗前取外周静脉血2 ml,提取外周血DNA,聚合酶链反应(PCR)方法扩增目的基因,DNA测序技术检测h ENT1G-706C(rs61758845)的基因型。结果 h ENT1G-706C不同的基因型对化疗效果有显著区别,GC+CC型基因型的患者化疗收益率明显低于GG型(OR=2. 34,95%CI:1. 14～4. 80;P=0. 02)。GG型和GC+CC型患者总生存期差异有显著性(19. 0 vs 15. 0个月,P<0. 001)。结论 h ENT1基因G-706C位点的单核苷酸多态性与接受吉西他滨为基础的联合化疗的晚期非小细胞肺癌患者疗效有关,它有可能成为将来指导非小细胞肺癌患者治疗的一个生物标志物。