儿童先天性并多指(趾)畸形HOXD13基因突变分析

目的对儿童先天性并多指(趾)(SPD)畸形进行HOXD13基因突变鉴定,了解SPD与HOXD13基因突变的相关性。方法根据患儿体征和手足X线片进行临床诊断,提取患儿基因组DNA,针对HOXD13基因外显子设计聚合酶链反应(PCR)引物,PCR扩增21例散发性SPD患儿HOXD13外显子并测序,测序结果与美国国立生物技术信息中心(NCBI)数据进行比对,分析突变位点。结果测序结果显示,21例散发性SPD患儿中,有2名患儿分别携带有2种新型HOXD13基因突变,即c.32 G>C(G11A)和c.64 G>T(A22S)。结论 HOXD13基因突变可能与部分Ⅱ型SPD发生相关。

HOXD13蛋白N-端非多聚丙氨酸延展突变导致并多指(趾)家系表型的分析

目的:对一并多指(趾)家系进行基因突变检测,以期发现致病基因突变。方法:提取家系可追溯到的并多指(趾)患者外周血的基因组DNA。以特异的引物经聚合酶链反应扩增HOXD13基因的两个外显子及外显子/内含子交界区域,然后对PCR产物直接进行测序。BLAST比对分析家系患者HOXD13基因序列。突变导致的氨基酸改变位点在不同物种的保守性分析。结果:BLAST比对分析发现患者突变为c.64G>T(p.A22S),该突变位点在不同生物中高度保守。结论:c.64G>T(p.A22S)可能为该家系的致病突变。

两个遗传性并多指(趾)家系致病基因突变分析

目的探讨2个并多指(趾)畸形(SPD)家系的致病基因。方法收集2019年1月、2020年12月就诊于临沂市人民医院的2个SPD家系的临床资料,采集先证者及家系成员静脉血样本,提取基因组DNA,对先证者行全外显子组测序筛选候选基因变异;采用Sanger测序对2个家系成员验证其突变位点;采用生物信息学软件PolyPhen-2和PROVEAN对突变位点的致病性进行预测分析,结合美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)指南对突变位点进行致病性判断。结果家系1三代成员中共有5例患者(男2例、女3例),先证者为8岁女性,表现为右手第3、4指并指,指蹼融合和远端指甲融合,其余手指活动自如,双脚未见异常;家系2三代成员中共有4例患者(均为女性),先证者为4岁女性,表现为双手第3、4指并指,示指侧弯。全外显子组测序分别在2个SPD家系中检出同源盒D13(HOXD13)基因c.917G>A和c.917G>T突变,且2个突变均呈现基因型-表型共分离,其中HOXD13基因c.917G>T突变未见数据库收录,为新发杂合错义突变。生物信息学软件预测这2个突变位点均为有害,结合ACMG指南,家系1 HOXD13基因c.917G>A突变的生物学致病等级符合PS1+PS4+PM1+PM2+PP3,可判断为致病突变;家系2的HOXD13基因c.917G>T突变符合PM2+PM5+PP3+PP4,可判断为疑似致病突变。结论 HOXD13基因c.917G>A和c.917G>T突变是导致这2个SPD家系发病的原因。

一个常染色体显性遗传并多指（趾）I型家系HOXD13基因的突变分析

目的明确一个常染色体显性遗传并多指（趾）家系的致病基因突变，为产前诊断提供依据。方法对该家系成员进行详细的临床检查，确定肢端畸形的类型。通过系谱分析确定其遗传方式。采集家系成员外周血，提取基因组DNA。通过文献复习，选择与肢端发育异常有关的HOXD13作为候选基因进行突变检测。应用PCR扩增与Sanger测序，对患者进行突变检测。通过TA克隆及琼脂糖凝胶电泳进一步验证突变。结果分析家系图谱与临床特征，确定该家系为一常染色体显性遗传并多指（趾）家系。突变检测发现，家系患病成员HOXD13基因第1外显子内插入了27bp，从而导致其编码的多聚丙氨酸链中被插入了9个丙氨酸残基，而家系正常成员则无此突变。结论该常染色体显性遗传并多指（趾）家系的致病突变为HOXDj3基因多聚丙氨酸链的延展突变。

HOXD13基因突变及所致疾病

HOX基因家族在脊椎动物的肢体发育中发挥巨大的作用。隶属于HOXD基因群的HOXD13基因参与肢体最远端(手和脚)的发育过程。HOXD13基因突变可以导致并多指(趾)畸形。随着研究的深入,新的突变以及疾病类型不断被发现,对HOXD13基因的结构与功能,以及HOXD13基因突变引起的疾病有了进一步认识。

常染色体显性遗传并多指一家系致病基因分析及产前诊断

目的分析常染色体显性遗传并多指（synpolydactyly，SPD）一家系的致病基因，为家系成员提供遗传咨询和产前诊断。方法临床诊断依据患者的临床特征和手足X线检查结果；致病基因分析采用候选基因分离策略，通过连锁分析确定该家系致病基因与已知SPD致病基因的连锁关系，PCR扩增HOXDl3基因检测基因突变。于孕16～21周对家系中高危妊娠的胎儿行超声诊断，并抽取孕妇羊水提取胎儿脱落细胞DNA进行连锁分析和突变检测验证。结果临床特征和家系分析表明该家系符合典型的常染色体显性SPD特征；连锁分析表明位于HOXDl3基因两侧的D2S1238、D2S1245两个短串联重复序列位点与该家系致病基因呈紧密连锁状态。家系患者的HOXDl3基因编码的聚丙氨酸链中丙氨酸残基由正常的15个延伸为24个，HOXDl3基因为该家系的突变基因。超声诊断提示妊娠胎儿正常，连锁分析和突变检测也证实胎儿不携带HOXDl3基因突变。结论HOXDl3基因为该先天性并多指（趾）家系的致病基因；联合使用B超和基因诊断方法可为患者提供准确的产前诊断。