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鹅γ-干扰素基因真核表达载体的构建及在幼仓鼠肾细胞中的表达
被引量:
3
1
作者
胡晓静
刘棋
+2 位作者
付薇
徐贤坤
熊毅
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期526-529,共4页
将克隆在pMD18-T载体中的鹅IFN-γ基因插入真核表达载体pcDNA3.1(+),得到真核表达质粒pcDNA3.1(+)-IFN-γ,经测序鉴定后,在室温条件下,质粒pcDNA3.1(+)-IFN-γ浓度20μg/mL,体积400μL,幼仓鼠肾细胞(BHK-21)细胞密度1×106/mL,电穿...
将克隆在pMD18-T载体中的鹅IFN-γ基因插入真核表达载体pcDNA3.1(+),得到真核表达质粒pcDNA3.1(+)-IFN-γ,经测序鉴定后,在室温条件下,质粒pcDNA3.1(+)-IFN-γ浓度20μg/mL,体积400μL,幼仓鼠肾细胞(BHK-21)细胞密度1×106/mL,电穿孔仪参数设为电压425 V、电容25μF、连续脉冲2次转染BHK-21细胞,待细胞贴壁后经过浓度为600μg/mL的G418连续筛选14 d后,出现抗性细胞克隆,将阳性BHK-21细胞上清液进行Western-blot鉴定,检测结果证明鹅IFN-γ在BHK-21细胞中得到表达。
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关键词
鹅
Γ-干扰素基因
幼仓鼠肾细胞
电穿孔
真核表达
原文传递
题名
鹅γ-干扰素基因真核表达载体的构建及在幼仓鼠肾细胞中的表达
被引量:
3
1
作者
胡晓静
刘棋
付薇
徐贤坤
熊毅
机构
广西区动物疫病预防控制中心
出处
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期526-529,共4页
基金
广西科技攻关项目(桂科攻0719004-3G)
文摘
将克隆在pMD18-T载体中的鹅IFN-γ基因插入真核表达载体pcDNA3.1(+),得到真核表达质粒pcDNA3.1(+)-IFN-γ,经测序鉴定后,在室温条件下,质粒pcDNA3.1(+)-IFN-γ浓度20μg/mL,体积400μL,幼仓鼠肾细胞(BHK-21)细胞密度1×106/mL,电穿孔仪参数设为电压425 V、电容25μF、连续脉冲2次转染BHK-21细胞,待细胞贴壁后经过浓度为600μg/mL的G418连续筛选14 d后,出现抗性细胞克隆,将阳性BHK-21细胞上清液进行Western-blot鉴定,检测结果证明鹅IFN-γ在BHK-21细胞中得到表达。
关键词
鹅
Γ-干扰素基因
幼仓鼠肾细胞
电穿孔
真核表达
Keywords
goose
interferon-γ gene
BHK-21 cell lines
eleclroporation
eukaryotic expression
分类号
S852.42 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鹅γ-干扰素基因真核表达载体的构建及在幼仓鼠肾细胞中的表达
胡晓静
刘棋
付薇
徐贤坤
熊毅
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2011
3
原文传递
已选择
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参考文献
引证文献
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