全反式维甲酸联合三氧化二砷治疗急性早幼粒细胞白血病26例分析

目的:观察全反式维甲酸(ATRA)联合三氧化二砷(As2O3)治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)的疗效。方法:ATRA 25 mg/(m2.d)及As2O30.16 mg/(kg.d)治疗APL直至获得完全缓解(CR)。根据白细胞计数、维甲酸综合征及肝功能调整ATRA和As2O3的剂量。观察CR率、获得CR的时间及不良反应。结果:26例患者中早期死亡2例,24例获CR,CR率92.3%,获得CR的平均时间为(28.1±5.9)d。在治疗中,61.5%的患者出现白细胞增高,15.4%的患者出现肝功能异常,多在1周内恢复。结论:ATRA联合As2O3治疗APL疗效好,能缩短获得CR的时间,不良反应少,可考虑作为初发APL的首选诱导缓解方案。

激光激发5-氨基乙酰丙酸己酯对人红白血病耐药/非耐药细胞株的杀伤效应研究

目的探讨5-氨基乙酰丙酸己酯-光动力疗法(He-ALA-PDT)对人红白血病细胞株K562及其耐阿霉素细胞株K562/ADM的杀伤效应。方法实验设4组:PDT组(加光敏剂并接受光照)、激光组(不加光敏剂只接受光照)、暗毒性组(只加光敏剂而不接受光照)、正常对照组(不加光敏剂且不接受光照)。用不同浓度(0.025、0.1、0.4、1.6mmol/L)的He-ALA避光孵育细胞,给予不同功率密度(4.5、9、18、36J/cm2)的630nm波长激光照射后,继续培养12h,观察细胞形态学变化,以CCK8法测定细胞存活率,采用甲基纤维素培养体系分析白血病细胞克隆形成能力的变化。结果暗毒性组、激光组均未对细胞产生明显杀伤作用,而PDT组能明显杀伤白血病细胞,且细胞存活率随He-ALA浓度和激光功率密度的增加而降低,且在相同条件下,K562细胞的存活率显著低于K562/ADM细胞(P<0.05)。PDT组的集落形成率明显低于正常对照组(P<0.001),且与K562/ADM细胞相比,K562细胞的集落形成率降低程度更为显著(P<0.001)。结论He-ALA-PDT可杀伤K562、K562/ADM细胞,并显著降低白血病细胞的克隆形成能力;K562/ADM细胞对PDT的反应不如K562细胞敏感。

非血缘异基因外周血造血干细胞移植治疗未缓解红白血病1例

骨髓增生异常综合征转为红白血病的患者属高危白血病,常规化疗达到完全缓解的机率低且短期内复发率高,患者经包括氟达拉滨、去甲氧柔红霉素在内的多个方案化疗均无法完全缓解,所以尝试用造血干细胞移植治疗。受者为未缓解、合并溶血病例,且无人类白细胞抗原配型相合的血缘供者,如予Bu-CTX2方案预处理,单用环孢素A+甲氨蝶呤方案预防移植物抗宿主病,则面临并发症多、移植成功率低或移植后易复发等难题。因此采用了阿糖胞苷、马利兰、环磷酰胺、甲基环己亚硝脲及抗人淋巴细胞免疫球蛋白联合使用作为预处理方案,在环孢素A和短程甲氨蝶呤的基础上加小剂量霉酚酸酯预防急性移植物抗宿主病;虽然并发肝静脉闭塞病、Ⅱ度肠型急性移植物抗宿主病及迟发性出血性膀胱炎,但程度较轻,经予前列地尔、甲基强的松龙、碱化、水化尿液等措施后病情很快得到控制;移植后52d染色体核型分析转为供者型,移植后36个月随访受者仍无病存活,复查外周血像、骨髓像均正常。故对于未缓解急性白血病,采用改良Bu-CTX2预处理方案行异基因造血干细胞移植是有效的救治方法之一。

儿童红白血病2例报告及文献复习

目的报告2例儿童红白血病,并对相关文献进行复习,提高对该病的认识。方法对诊断明确的2例儿童红白血病临床资料进行回顾并复习相关文献。结果例1以发热、肝脾肿大6个月就诊,骨髓涂片确诊,死于脑出血,诊断后存活1周;例2以面色苍白、体重减轻1年就诊,骨髓涂片确诊后放弃治疗死亡,诊断后存活1个月。结论红白血病属儿童时期罕见病,恶性度高,预后极差;尽早诊断、合理治疗;异基因外周血造血干细胞移植是提高该病患儿生存期的关键。

儿童红白血病1例报告及文献复习

目的归纳1例儿童红白血病临床特点,并对相关文献进行复习,提高对该病的诊疗水平。方法对诊断明确的1例儿童红白血病临床资料进行回顾性分析并复习相关文献。结果患儿以鼻出血起病,继之出现造血系统改变及发热等临床症状,查体以肝脾肿大为主,骨髓涂片及流式细胞仪确诊,死于化疗后脑出血,诊断后存活1周。结论红白血病恶性程度高,预后极差;早诊断、合理治疗,尤其异基因外周血造血干细胞移植是提高该病患儿无事件生存率的关键。

应用RD-PCR方法制备K562细胞表达谱芯片基因探针

目的收集K562细胞表达谱芯片的基因片段。方法培养K562细胞,抽提其mRNA,反转录为cDNA,应用限制性显示PCR技术(RD-PCR)分离K562细胞不同组别的产物片段,分别行PCR扩增。结果制备了可用于基因芯片制作的基因探针片段。结论RD-PCR方法适合于基因芯片探针的收集。

人转铁蛋白-阿霉素结合物对耐阿霉素K562细胞的体外杀伤作用

目的 探讨阿霉素 (ADM)与人转铁蛋白 (Tf)结合物对耐阿霉素 K5 6 2细胞株的体外杀伤作用。 方法 采用葡聚糖 (DEX) T- 10作为中介体、联接 Tf与 ADM制备结合物 Tf- ADM,用 MTT法比较结合物对耐ADM及 ADM敏感的 K5 6 2细胞的体外杀伤作用强度。 结果 结合物对耐 ADM的 K 5 6 2细胞株 72 h培养、MTT法测定结合物对耐 ADM的 K5 6 2细胞 IC5 0 为 4.9μmol,游离 ADM的 IC5 0 >17.2 4μmol,Tf对这两种细胞都没有体外杀伤作用。 结论 结合物 Tf- ADM可提高 ADM对耐 ADM的 K5 6 2细胞株的杀伤作用 ,此作用与 Tf无明显的关系。

JAK2 V617F突变阳性原发性血小板增多症转化为纯红细胞白血病1例报告并文献复习

原发性血小板增多症(essential thrombocythemia,ET)是一种主要涉及巨核系的克隆性骨髓增殖性肿瘤(myeloproliferative neoplasms,MPN)。在30%~50%ET患者中检测出JAK2 V617F基因突变[1]。ET年发病率很低,为0.21/105~2.27/105[2]。ET诊断后15年内发生白血病转化的发生率为2%[3]。纯红细胞白血病是一类临床上很罕见的骨髓红系恶性增殖性疾病。

细胞化学染色在大细胞性贫血诊断中的价值分析

目的观察细胞化学染色在骨髓增生异常综合征(MDS)、急性红白血病(AEL)、巨幼细胞性贫血(MegA)和溶血性贫血(HA)几种常见的血液系统疾病诊断中的价值。方法 2008年1月至2011年12月初诊住院患者,无其他系统急慢性疾病,均经骨髓涂片、细胞化学染色检查,部分患者结合染色体及融合基因检查资料。结果 AEL在糖原染色(PAS)中阳性率最高,MegA和HA中PAS阳性率很低,小巨核酶标(淋巴样小巨核)主要在MDS中有较高的阳性率,MDS的NALP积分为正常或偏低,AEL、MegA和HA则是正常或升高。结论细胞化学染色作为形态学检查的补充,为MDS、AEL、MegA和HA这几种血液系统疾病的正确诊断提供了有力的工具。

三氧化二砷联合阿克拉霉素对急性髓系白血病KG-1a细胞的协同杀伤效应

目的 探讨三氧化二砷（ATO）联合阿克拉霉素（ACM）对急性髓系白血病细胞株KG-1a的协同细胞杀伤效应及其分子机制。方法 采用克隆形成实验检测不同浓度ATO和ACM对KG-1a细胞增殖的影响，采用Compusyn软件分析两药联合是否具有协同作用，采用瑞氏染色法和流式细胞术分析两药联合对KG-1a细胞诱导凋亡作用，采用Western blot法分析两药联合后凋亡相关蛋白表达的差异。结果 ATO和ACM单药对KG-1a细胞具有生长抑制作用，且呈剂量依赖性增加。流式细胞术检测结果显示，0.4 μmol/L ATO＋10 nmol/L ACM处理48 h后，KG-1a细胞的凋亡率为（34.5±3.1）%，与0.4 μmol/L ATO单药组和10 nmol/L ACM单药组[分别为（7.6±1.1）%和（18.7±2.3）%]比较，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。1.5 μmol/L ATO＋37.5 nmol/L ACM组KG-1a细胞的凋亡率为（52.5±4.7）%，与1.5 μmol/L ATO单药组和37.5 nmol/L ACM单药组[分别为（19.1±3.2）%和（27.7±2.2）%]比较，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。3.0 μmol/L ATO＋75 nmol/L ACM组KG-1a细胞的凋亡率为（61.3±4.5）%，与3.0 μmol/L ATO单药组和75 nmol/L ACM单药组[分别为（29.5±2.5）%和（28.6±3.4）%]比较，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。与单药组比较，联合组KG-1a细胞的细胞质空泡化、细胞皱缩和细胞核收缩等细胞凋亡的形态学变化更明显。Compusyn软件分析结果显示，联合药物处理组的联合指数均〈1，表明两药联合具有协同细胞杀伤作用。结论 ATO联合ACM对急性髓系白血病细胞株KG-1a具有协同细胞杀伤作用，该协同作用可能通过激活凋亡相关信号通路，抑制KG-1a细胞的增殖并诱导凋亡。

急性红白血病55例染色体特征和预后分析

目的探讨急性红白血病(M_6)染色体特征和预后因素。方法回顾性分析55例患者染色体核型特征,采用病例对照方法,分为原发组和骨髓增生异常综合征(MDS)转化组;染色体核型异常组和正常组,并分析各组异基因造血干细胞移植(all-HSCT)治疗和(或)化疗疗效及生存预后因素。结果 45例经染色体检查,18例正常,染色体异常检出率为60.0%(27/45),其中复杂异常17例,简单异常10例,10例可见亚二倍体或超二倍体明显增多,18.5%(5/27)5号染色体受累,25.9%(7/27)7号或8号染色体受累。55例患者完全缓解(CR)率63.6%;MDS 转化组 CR 率(42.8%)显著低于原发组(85.2%),P<0.05;染色体核型异常组 CR 率(37.0%)显著低于正常组(83.3%),P<0.01。生存预后因素:随访中位时间30(3～79)个月,染色体核型异常组和 MDS 转化 M_6患者生存期(OS)和无病生存期(DFS),移植治疗者较化疗者显著延长(P<0.01)。16例患者行 all-HSCT 治疗,其中9例为染色体核型异常 MDS 转化 M_6患者,4例为未缓解患者;移植后11例 DFS 28个月,2年生存率68.7%(11/16)。结论染色体核型异常和(或)MDS 转化 M_6患者常规化疗疗效差、生存期短,预后差,all-HSCT 治疗显著延长生存期,改善预后,染色体核型异常和(或)MDS 转化 M_6患者,宜早期all-HSCT 治疗。

167例急性红白血病患者临床特征及预后分析

目的 描述急性红白血病（AEL）患者的生物学特征,探讨其与预后的关系.方法 回顾性分析2003至2013年6月167例初治AEL患者的形态学、免疫学、分子生物学及细胞遗传学检测资料,采用Kaplan-Meier方法分析预后影响因素.结果 经流式细胞术检测显示,AEL高表达CD13（96.1％）、CD33（95.1％）、CD117（87.4％）、CD34（79.6％）.染色体异常核型检出率为37.8％（56/148）,复杂异常为18.2％（27/148）.异常核型中累及较多的为3、5、7、8、20号染色体.＋8最常见（35.7％）,其次是5q-（17.9％）.突变检测显示,AEL患者CEBPA突变率为44.0％（11/25）,NPM1突变率为15.4％（4/26）.AEL患者初次诱导缓解率为56.6％（30/53）,骨髓增生异常综合征转化AEL缓解率为33.3％（4/12）.生存分析显示,女性患者总体生存（OS）率优于男性（P=0.047）,异基因造血干细胞移植组OS率优于化疗组（P=0.000）.13～ 39岁组AEL患者OS率最高,40～ 49岁组次之,＞50岁组最差（P=0.024）.结论 AEL具有独特的生物学特征,异基因造血干细胞移植能显著改善患者的预后.

急性红白血病的生物学特点及初步疗效的临床分析

目的 探讨急性红白血病（AEL）的生物学特点,并对初步治疗的疗效进行分析.方法 回顾分析28例初治AEL患者的临床资料,其中伴多系病态造血及无多系病态造血患者各14例,针对其形态学、免疫学、细胞遗传学和分子生物学特征及初次诱导治疗完全缓解（CR）率进行分析.结果 28例初治AEL患者中有14例（50％）伴多系病态造血,累及二系或三系；6例行免疫分型检测,高表达髓系原始细胞相关抗原；8例行染色体核型分析,5例核型异常,其中4例为复杂核型,1例伴有＋8染色体；4例行WT1分子检测均为阳性；诱导治疗CR率为39.29％（11/28）,伴多系病态造血组为35.71％（5/14）,无多系病态造血组为42.86％（6/14）,两组间差异无统计学意义（P＞0.05）.复杂核型组为25.00％（1/4）,预后中等核型组为50.00％（2/4）.结论 AEL具有独特的生物学特征：伴有较高的多系病态造血发生率；异常核型检出率高,且多为累及5号和（或）7号染色体的复杂核型,复杂核型组CR率低；对化疗CR低,治疗效果差.

两种培养基的培养体系对CIK细胞增殖和功能的影响

目的观察细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)增殖情况,检测CIK细胞的表面分子表型和体外对白血病细胞K562的杀伤作用。方法通过用H3培养基培养的分别来源于脐带血和患者自体外周血分离的单个核细胞(PBMC),添加重组人γ干扰素(IFN-γ)与CD3单抗,体外诱导CIK细胞,在培养的第7天分别加入H3培养基和T551培养基继续诱导培养至14d。计数观察CIK细胞增殖能力,流式检测细胞表面CD3、CD56的表达情况,CCK8法检测两组培养基条件下对白血病细胞K562的杀伤效果。结果动态计数及表型分析结果表明,H3及H3^+T551培养的CIK细胞扩增倍数(包括脐带血CIK总细胞数和自体CIK总细胞数)在第14天均分别达到76.9倍、62.3倍;两种培养条件下脐带血CIK细胞中CD3^+CD56^+双阳性细胞含量分别是(16.70±2.72)%和(10.80±2.59)%,自体CIK细胞中CD3^+CD56^+双阳性细胞含量分别是(11.23±6.64)%和(10.70±6.42)%;体外杀瘤实验表明,当效靶比为5∶1时,H3培养的脐带血CIK细胞杀伤率达到(33.50±9.99)%,显著高于H3^+T551培养脐带血CIK细胞的(20.3±6.76)%,差异有统计学意义(P=0.011),而H3和H3^+T551培养的自体CIK细胞杀伤率分别是(59.67±27.59)%和(42.13±19.47)%,差异无统计学意义(P=0.080)。结论 H3培养的脐带血和自体CIK细胞具有较强的体外抗白血病癌细胞活性,可应用于临床上白血病的过继性免疫治疗。