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巯基乙醇对家蝇幼虫血淋巴抑菌活性的影响 被引量:1
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作者 赵银丽 李国喜 +1 位作者 李建华 崔淑贞 《广东农业科学》 CAS CSCD 2008年第8期119-120,123,共3页
以大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌为指示菌,利用琼脂糖孔穴扩散法,检测了巯基乙醇对家蝇幼虫血淋巴抑菌活性的影响。结果显示,巯基乙醇本身对3种指示菌具有抑菌活性,其非抑菌浓度为至少稀释106倍;当巯基乙醇稀释106倍时,可有效保... 以大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌为指示菌,利用琼脂糖孔穴扩散法,检测了巯基乙醇对家蝇幼虫血淋巴抑菌活性的影响。结果显示,巯基乙醇本身对3种指示菌具有抑菌活性,其非抑菌浓度为至少稀释106倍;当巯基乙醇稀释106倍时,可有效保护不高于1∶5浓度的家蝇幼虫血淋巴悬液不被氧化,且与对照相比不影响血淋巴的抑菌活性;当巯基乙醇稀释少于106时,血淋巴的抑菌活性明显增大。 展开更多
关键词 巯基乙醇 家蝇幼虫血淋巴 琼脂糖孔穴扩散法 抑菌
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巯基乙醇在家蝇幼虫血淋巴中适宜添加量研究
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作者 李建华 赵银丽 +2 位作者 李国喜 刘忠虎 崔淑贞 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第12期5024-5025,共2页
[目的]为家蝇幼虫血淋巴抗菌活性物质的分离、纯化提供依据。[方法]以大肠杆菌为指示菌,利用琼脂糖孔穴扩散法研究巯基乙醇对家蝇幼虫血淋巴抑菌活性的影响,确定巯基乙醇作为抗氧化剂在家蝇幼虫血淋巴中的适宜添加量。[结果]巯基乙醇能... [目的]为家蝇幼虫血淋巴抗菌活性物质的分离、纯化提供依据。[方法]以大肠杆菌为指示菌,利用琼脂糖孔穴扩散法研究巯基乙醇对家蝇幼虫血淋巴抑菌活性的影响,确定巯基乙醇作为抗氧化剂在家蝇幼虫血淋巴中的适宜添加量。[结果]巯基乙醇能抑制大肠杆菌的生长,抑菌效果随其浓度的增加更为明显。当巯基乙醇体积浓度≤10-6时,其对大肠杆菌无抑菌效果,说明巯基乙醇的最大非抑菌体积浓度为10-6。体积浓度为10-6的巯基乙醇可有效保护浓度小于或等于1∶5的家蝇幼虫血淋巴悬液不被氧化,且其对大肠杆菌的抑菌效果不受影响。[结论]巯基乙醇在家蝇幼虫血淋巴中的适宜加入量应根据试验中具体情况确定。 展开更多
关键词 巯基乙醇 家蝇幼虫血淋巴 琼脂糖孔穴扩散法 抑菌活性
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家蝇幼虫血淋巴对鸡免疫器官发育和免疫球蛋白IgA含量的影响
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作者 李国喜 赵银丽 +1 位作者 李建华 崔淑贞 《畜禽业》 2008年第6期26-27,共2页
向15日龄的雏鸡饲料中添加0.024g·只-1·日-1的家蝇幼虫血淋巴冻干粉,连续饲喂至49日龄,试验期间每周随机抽样8只,称重,采血,解剖取法氏囊、脾脏和胸腺,测定免疫器官指数和免疫球蛋白IgA含量。试验结果显示:添加家蝇幼虫血淋... 向15日龄的雏鸡饲料中添加0.024g·只-1·日-1的家蝇幼虫血淋巴冻干粉,连续饲喂至49日龄,试验期间每周随机抽样8只,称重,采血,解剖取法氏囊、脾脏和胸腺,测定免疫器官指数和免疫球蛋白IgA含量。试验结果显示:添加家蝇幼虫血淋巴的试验组与对照组相比,试验期内体重和脾脏的变化差异不明显,法氏囊和胸腺前期差异不显著而后期差异显著,免疫球蛋白IgA能够维持较高水平。所以,家蝇幼虫血淋巴能显著增强鸡体的免疫力。 展开更多
关键词 家蝇幼虫血淋巴 雏鸡 免疫器官 IGA
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家蝇幼虫血淋巴MAC-1对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞分泌炎性因子的影响
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作者 王芳胜 庞芸 +3 位作者 迟茜文 张霞 朱家洪 魏洪 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第12期1375-1379,1408,共6页
目的探讨家蝇幼虫血淋巴多肽MAC-1对脂多糖(LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)水平的影响及其基于NF-κB转录因子可能的作用机制。方法用5%淀粉经小鼠腹腔注射诱导巨噬细胞产生... 目的探讨家蝇幼虫血淋巴多肽MAC-1对脂多糖(LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)水平的影响及其基于NF-κB转录因子可能的作用机制。方法用5%淀粉经小鼠腹腔注射诱导巨噬细胞产生,采用差速贴壁法分离纯化。96孔板中细胞随机分成6组:5mg/L LPS分别与50、200、500、1 000μg/ml浓度MAC-1共同作用组,阴性对照组(10%MEM),阳性对照组(5mg/L LPS);12孔板细胞随机分6组:MEM阴性对照组,50μg/ml MAC-1组,5mg/L LPS组,50μg/ml MAC-1+5mg/L LPS组,5mg/L LPS+10μmol/L PDTC组,5mg/L LPS+10μmol/L PDTC+50μg/ml MAC-1。两种分组均给药培养12h,收集细胞上清液并提取细胞mRNA,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和逆转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测细胞炎性因子及其基因表达和Toll样受体(TLR4)、NF-κBp50基因相对表达量。结果阴性对照组和LPS组巨噬细胞IL-1β和IL-6分别为220.9±20.3pg/ml和269.06±13.54pg/ml以及212.21±13.54pg/ml和269.43±21.12pg/ml,差异有统计学意义(F=11.02,15.60,P<0.01);TNF-α为185.00±7.38和204.77±34.30pg/ml,差异无统计学意义(F=0.64,P>0.05)。50μg/ml组与其他MAC-1浓度组相比IL-1β、IL-6、TNF-α均显著降低(F=10.46,68.13,16.45,P<0.05);IL-1β、IL-6、TNF-α、TLR4、NF-κB基因相对表达量LPS组较其他组显著增高(F=13.39,10.45,21.25,30.81,17.53,P<0.05或P<0.01),LPS组与50μg/ml MAC-1+LPS组比较差异有统计学意义(F=14.62,15.11,18.78,128.46,12.81,P<0.01),PDTC+LPS组与PDTC+LPS+MAC-1组比较差异均无统计学意义(F=0.25,2.40,0.27,1.55,1.22,P>0.05)。结论 MAC-1能抑制LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞分泌相关炎性因子,其机制可能与NF-κB转录因子有关,尚待进一步研究。 展开更多
关键词 家蝇幼虫血淋巴MAC-1 脂多糖 巨噬细胞 细胞因子 信号分子
原文传递
应用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕培养细胞和幼虫体内表达β-淀粉样蛋白 被引量:1
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作者 李司 张海花 +1 位作者 陆玲鸿 张文平 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期850-855,共6页
作为阿尔茨海默症(AD)重要神经病理学特征之一的脑内老年斑主要由β-淀粉样蛋白Aβ40和Aβ42聚集而成,Aβ42是其中的毒性成分。Aβ的特异性主动免疫对不同的转基因AD模型小鼠均有治疗作用,但临床试验中以注射方式给药容易诱发炎症反应... 作为阿尔茨海默症(AD)重要神经病理学特征之一的脑内老年斑主要由β-淀粉样蛋白Aβ40和Aβ42聚集而成,Aβ42是其中的毒性成分。Aβ的特异性主动免疫对不同的转基因AD模型小鼠均有治疗作用,但临床试验中以注射方式给药容易诱发炎症反应。为了能够更好、更安全地采用主动的Aβ免疫疗法达到预防和治疗AD的目的,尝试用家蚕杆状病毒表达系统表达Aβ42蛋白。将Aβ42基因克隆入转移载体质粒pB acP AK8中,并使该重组质粒和家蚕杆状病毒Bm-BacP AK6线性化的DNA共转染家蚕卵巢培养细胞BmN,经筛选、纯化获得的重组病毒命名为BmN PV-Aβ42。用BmN PV-Aβ42感染BmN细胞和家蚕5龄起蚕后,利用Western blotting在BmN细胞和5龄幼虫血淋巴中均可检测到5 kD左右的特异性条带,证明重组Aβ42蛋白表达成功。ELISA检测显示,重组Aβ42肽在感染后第4天的BmN细胞和感染后第6天的5龄幼虫血淋巴中的表达量分别达到1.1 pg/个、2μg/mL。进一步提高Aβ42在家蚕杆状病毒表达系统中的表达效率,有望为研发预防和治疗阿尔茨海默症的可食性疫苗提供新型原料。 展开更多
关键词 阿尔茨海默症 Β-淀粉样蛋白 免疫 家蚕杆状病毒表达系统 培养细胞 幼虫血淋巴
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柞蚕核型多角体病毒PCR检测方法的建立 被引量:3
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作者 贾平骜 姜义仁 +4 位作者 任淑文 王勇 钟亮 杨瑞生 秦利 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期694-699,共6页
为了建立柞蚕核型多角体病毒(Antheraea pernyi nucleopolyhedrovirus,ApNPV)的早期检测技术,采用NCBI提供的BLAST软件在线检索ApNPV特异基因ORF142的序列后设计引物AP1,对ApNPV基因组DNA进行PCR扩增,得到约130 bp的片段,最低检测量为0.... 为了建立柞蚕核型多角体病毒(Antheraea pernyi nucleopolyhedrovirus,ApNPV)的早期检测技术,采用NCBI提供的BLAST软件在线检索ApNPV特异基因ORF142的序列后设计引物AP1,对ApNPV基因组DNA进行PCR扩增,得到约130 bp的片段,最低检测量为0.5 fg/mL病毒DNA。分别以感染ApNPV的柞蚕幼虫总DNA和ApNPV多角体悬液为模板,相同扩增条件下可扩增出大小一致的一条特异性片段,最低检测量分别为1 fg/mL幼虫总DNA和20~25 PIBs/mL ApNPV多角体。以柞蚕4龄幼虫为材料,人工模拟感染ApNPV后取幼虫血淋巴为检测物可以直接检出ApNPV,当添毒量为2.3×108PIBs/mL时,添毒36 h后即可检出,且病毒感染后的检出时间与添毒浓度呈正相关。采用该方法的检测过程只需3 h,快速而方便。 展开更多
关键词 柞蚕核型多角体病毒 ORF142基因 PCR 早期检测 幼虫血淋巴
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Developmental changes in hemolymph ecdysteroid level and prothoracicotropic hormone activity during the fifth larval instar of the Eri silkworm, Samia cynthia ricini
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作者 RONG-JING JIANG HONG TENG +2 位作者 JAN KOOLMAN SHENG LI MEI-XUN CAO 《Insect Science》 SCIE CAS CSCD 2005年第4期241-247,共7页
Developmental changes in hemolymph ecdysteroid level, ecdysteroid synthesis by prothoracic glands (PGs) in vitro, prothoracicotropic hormone (PTTH) activity in brain extracts, and PTTH activity in the hemolymph we... Developmental changes in hemolymph ecdysteroid level, ecdysteroid synthesis by prothoracic glands (PGs) in vitro, prothoracicotropic hormone (PTTH) activity in brain extracts, and PTTH activity in the hemolymph were measured during the fifth larval instar of the Eri silkworm, Samia cynthia ricini. The changing patterns of hemolymph ecdysteroid level and ecdysteroid synthesis by laGs in vitro are similar to each other, with maximums on day 9. However, on this day, hemolymph ecdysteroid level was substantially higher than ecdysteroid synthesis by PGs in vitro suggesting a high PTTH activity in the hemolymph on day 9. Moreover, the changing pattern of PTTH activity in brain extracts is also similar to that of PTTH activity in the hemolymph, both peaking on day 9. However, on this day, activity in brain extracts was much smaller than PTTH activity in the hemolymph implying that most PTTH synthesized by the brain is secreted to the hemolymph and the brain stores a very little amount of PTTH. This study provides unique insights onto the hormonal regulation of ecdysteroid synthesis in the Eri silkworm and is useful for our future studies on signal transduction of insect neurolaelatides. 展开更多
关键词 Samia cynthia ricini ECDYSTEROIDS prothoracic gland prothoracicotropic hormone RADIOIMMUNOASSAY
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