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幽门螺杆菌中性白细胞激活蛋白的研究进展 被引量:5
1
作者 周永宁 徐采朴 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第z1期53-55,共3页
幽门螺杆菌中性白细胞激活蛋白是 15 0 0 0 0u蛋白质 ,具有多种生物学功能 :①作为抗原能激发宿主产生特异性免疫反应 ;②对白细胞具有趋化、激活作用 ;③介导免疫粘附及介导幽门螺杆菌粘附、定植胃粘膜 ;④激活人白细胞NADPH氧化酶 ,... 幽门螺杆菌中性白细胞激活蛋白是 15 0 0 0 0u蛋白质 ,具有多种生物学功能 :①作为抗原能激发宿主产生特异性免疫反应 ;②对白细胞具有趋化、激活作用 ;③介导免疫粘附及介导幽门螺杆菌粘附、定植胃粘膜 ;④激活人白细胞NADPH氧化酶 ,产生活性氧中间产物。结论 :幽门螺杆菌中性白细胞激活蛋白是参与幽门螺杆菌致病机制的重要因子 ; 展开更多
关键词 幽门螺杆菌中性白细胞激活蛋白 抗原 趋化作用 NADPH氧化酶 白细胞
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幽门螺杆菌中性白细胞激活蛋白基因napA克隆及序列分析 被引量:2
2
作者 康巧珍 段广才 +1 位作者 范清堂 郗园林 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2004年第5期743-745,共3页
目的 :从幽门螺杆菌 (H .pylori)中克隆中性白细胞激活蛋白基因napA并构建重组载体。方法 :提取H .pylori郑州分离株MEL HP2 7基因组DNA作模板 ;根据H .pyloriJ99全基因组序列设计napAPCR引物 ,高保真酶扩增napA片断 ;限制性内切酶切PC... 目的 :从幽门螺杆菌 (H .pylori)中克隆中性白细胞激活蛋白基因napA并构建重组载体。方法 :提取H .pylori郑州分离株MEL HP2 7基因组DNA作模板 ;根据H .pyloriJ99全基因组序列设计napAPCR引物 ,高保真酶扩增napA片断 ;限制性内切酶切PCR产物和pNEB193空质粒 ,T4DNA酶连接酶切产物 ,重组质粒转化E .coliTB1工程菌 ,蓝白斑试验筛选阳性克隆 ;提取质粒经酶切鉴定后测序并利用生物学软件进行序列分析。结果 :DNA限制性内切酶可从重组质粒pNEB napA的EcoRⅠ和SalⅠ位点之间切出一个 4 35bp的DNA片断 ,测序结果与J99napA同源性为 96 .5 % ,与H .pylori其他菌株的同源性为 92 %~ 97%。结论 :成功构建H .pylori中性白细胞激活蛋白基因的重组质粒pNEB napA ;序列分析表明HP napA是一类高度保守的原核型基因 ,可作为H .pylori疫苗候选基因。 展开更多
关键词 幽门杆菌 中性白细胞激活蛋白 基因 克隆
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幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白相关疾病预防及治疗研究进展
3
作者 冯富娟 江晶晶 +4 位作者 高春 邵慧娟 于晓辉 郑晓凤 张久聪 《实用临床医药杂志》 CAS 2024年第1期129-132,144,共5页
幽门螺杆菌(H.pylori)中性粒细胞激活蛋白(HP-NAP)是新近发现的H.pylori的主要毒力因子之一,几乎所有H.pylori菌株都有表达。HP-NAP被激活后,可刺激中性粒细胞、单核细胞、树突状细胞、肥大细胞和淋巴细胞,参与炎症的发展和组织损伤。... 幽门螺杆菌(H.pylori)中性粒细胞激活蛋白(HP-NAP)是新近发现的H.pylori的主要毒力因子之一,几乎所有H.pylori菌株都有表达。HP-NAP被激活后,可刺激中性粒细胞、单核细胞、树突状细胞、肥大细胞和淋巴细胞,参与炎症的发展和组织损伤。本文对HP-NAP在相关疾病的预防、治疗中的最新研究进展予以综述。 展开更多
关键词 幽门杆菌中性细胞激活蛋白 菌株 中性细胞 疫苗
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幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白DNA疫苗的构建及其免疫保护作用 被引量:4
4
作者 孙波 杨骅 +3 位作者 满晓华 李兆申 屠振兴 龚燕芳 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期842-845,共4页
目的:构建携带幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白(Hp neutrophil-activating protein,Hp-NAP)基因(napA)活减毒鼠伤寒沙门菌重组DNA疫苗,初步观察其对慢性Hp感染的免疫保护作用。方法:应用基因工程技术扩增全长napA,测序并经同源性分析后,... 目的:构建携带幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白(Hp neutrophil-activating protein,Hp-NAP)基因(napA)活减毒鼠伤寒沙门菌重组DNA疫苗,初步观察其对慢性Hp感染的免疫保护作用。方法:应用基因工程技术扩增全长napA,测序并经同源性分析后,将其亚克隆入真核表达载体pIRES,鉴定正确后将重组质粒转化活减毒鼠伤寒沙门菌构建Hp-NAP口服DNA疫苗。口服Hp-SS1建立SS1长期感染小鼠模型,30周后随机均分为3组,每组各5只。治疗组予10 9 cfu/0.4 ml疫苗菌灌胃,1次/周×3周;2个对照组分别予等体积生理盐水或空白质粒。末次免疫4周后行快速尿素酶检测,ELISA测定血清抗体效价。结果:重组真核表达质粒pIRES-napA成功转化活减毒鼠伤寒沙门菌SL7207;所克隆napA与GenBank中SS1-napA核苷酸和蛋白质的同源性均>98%。免疫后4周治疗组75%(3/4)小鼠快速尿素酶检测阴性,对照组均阳性,差异显著(P<0.05);治疗组血清抗Hp-NAP抗体效价明显升高。结论:成功构建了具有较好免疫保护作用的Hp-NAP口服重组DNA疫苗,为进一步研制多价抗Hp核酸疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 杆菌 幽门 中性细胞激活蛋白 疫苗 DNA
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幽门螺杆菌重组中性粒细胞激活蛋白蛋黄抗体的制备 被引量:5
5
作者 邓颖 杨致邦 +3 位作者 黄伟 林珊珊 黄进 叶翠莲 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第5期471-475,共5页
目的:制备高效价的抗Nap蛋黄抗体(IgY).方法:大量诱导、培养重组菌pQE30-NapA-DH5α获得重组蛋白Nap,经Ni2+-NTA树脂纯化后,Bradford法测定蛋白浓度.用纯化的Nap蛋白免疫鸡,水稀释结合氯仿有机沉淀法提取IgY.ELISA法测定抗体产生的时间... 目的:制备高效价的抗Nap蛋黄抗体(IgY).方法:大量诱导、培养重组菌pQE30-NapA-DH5α获得重组蛋白Nap,经Ni2+-NTA树脂纯化后,Bradford法测定蛋白浓度.用纯化的Nap蛋白免疫鸡,水稀释结合氯仿有机沉淀法提取IgY.ELISA法测定抗体产生的时间-效价变化.将效价高的Nap-IgY用硫酸铵沉淀法纯化浓缩,间接ELISA法检测效价,Bradford法测定蛋白含量.Western blot检测制备的Nap-IgY的抗体活性.结果:Nap重组蛋白主要以包涵体形式表达,蛋白含量为0.37g/L.免疫鸡的蛋黄提取物可与Nap发生特异性反应,IgY效价随免疫时间增加而升高,在110d达最高效价.经纯化浓缩后,Nap-IgY的效价为1∶12800,蛋白浓度为23.67g/L.结论:成功制备了高浓度、高效价的Nap特异性IgY. 展开更多
关键词 幽门杆菌 重组蛋白 中性细胞激活蛋白 蛋黄抗体
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半夏泻心汤加减方对幽门螺杆菌相关性胃炎患者氧化应激指标及血清微小RNA-155可溶性白细胞介素-2受体的影响
6
作者 王静燕 方宏图 +1 位作者 汪晓静 张思泉 《中国药物与临床》 CAS 2024年第18期1163-1168,共6页
目的探讨半夏泻心汤加减方对幽门螺杆菌(Hp)相关性胃炎患者氧化应激及血清微小RNA(miR)-155、可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)的影响。方法选取2022年1月至2022年12月在浙江省杭州市临平区中西医结合医院诊治的Hp相关性胃炎患者94例,按... 目的探讨半夏泻心汤加减方对幽门螺杆菌(Hp)相关性胃炎患者氧化应激及血清微小RNA(miR)-155、可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)的影响。方法选取2022年1月至2022年12月在浙江省杭州市临平区中西医结合医院诊治的Hp相关性胃炎患者94例,按治疗方法分为2组,对照组47例和研究组47例,对照组给予四联疗法,研究组给予四联疗法+半夏泻心汤加减方治疗。比较2组治疗前后的中医证候积分、氧化应激指标、血清miR-155、sIL-2R,以及Hp转阴率、临床治疗疗效和不良反应发生情况。结果相较于治疗前,2组治疗后中医证候积分降低(P<0.05),相较于对照组,研究组治疗后中医证候积分更低(P<0.05)。相较于治疗前,2组一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)治疗后降低(P<0.05),2组SOD治疗后升高(P<0.05),相较于对照组,研究组NO、MDA治疗后更低(P<0.05),研究组SOD治疗后更高(P<0.05)。相较于治疗前,2组miR-155、sIL-2R治疗后降低(P<0.05),相较于对照组,研究组miR-155、sIL-2R治疗后更低(P<0.05)。研究组Hp转阴率(87%)高于对照组(68%)(χ^(2)=4.967,P<0.05)。研究组治疗总有效率为91%高于对照组74%(χ^(2)=4.821,P<0.05)。对照组不良反应发生率9%,研究组6%,2组差异无统计学意义(χ^(2)=0.154,P>0.05)。结论四联疗法+半夏泻心汤加减方治疗Hp相关性胃炎,可有效缓解症状,减轻应激反应,降低血清miR-155、sIL-2R水平,提高Hp转阴率和临床治疗疗效,且安全性高。 展开更多
关键词 半夏泻心汤 幽门杆菌 胃炎 可溶性白细胞介素-2受体
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幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白抗体水平与胃癌的相关性 被引量:2
7
作者 龙敏 李妍 +3 位作者 罗军 曾方银 宁云山 李明 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1036-1038,共3页
目的探讨幽门螺杆菌(HP)中性粒细胞激活蛋白(NAP)抗体水平与胃癌的相关性。方法应用ELISA方法,对正常人和HP感染患者外周血中的NAP抗体水平进行检测,并用PCR方法检测HP临床菌株中nap基因存在状况。结果所有检测的HP临床菌株中都存在nap... 目的探讨幽门螺杆菌(HP)中性粒细胞激活蛋白(NAP)抗体水平与胃癌的相关性。方法应用ELISA方法,对正常人和HP感染患者外周血中的NAP抗体水平进行检测,并用PCR方法检测HP临床菌株中nap基因存在状况。结果所有检测的HP临床菌株中都存在napA基因;正常人血清中NAP抗体阳性率为42.6%;胃癌患者血清HP-NAP抗体阳性率为97.5%,明显高于胃溃疡患者92.9%和慢性胃炎患者85.7%的抗体阳性率;胃癌患者NAP抗体水平明显高于胃炎患者,但与胃溃疡患者无明显差异;NAP抗体水平与患者年龄无明显相关性。结论NAP抗体水平与胃癌有一定相关性,提示NAP蛋白可能有致胃癌的作用。本研究为HP相关性胃癌的致病机制、诊断和疫苗研究提供基础。 展开更多
关键词 幽门杆菌 中性细胞激活蛋白 抗体检测 胃肿瘤
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携带幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白活减毒鼠伤寒沙门菌口服重组DNA疫苗株的构建 被引量:3
8
作者 孙波 何苗 +6 位作者 杨骅 金晶 满晓华 龚燕芳 屠振兴 杜奕奇 李兆申 《世界华人消化杂志》 CAS 2004年第6期1317-1320,共4页
目的:构建携带人幽门螺杆菌(H pylori)中性粒细胞激活蛋白(HP-NAP)基因(napA)的重组活减毒鼠伤寒沙门菌口服DNA 疫苗. 方法:应用基因工程技术扩增全长napA,测序并同源性分析后,将其亚克隆入真核表达载体pIRES,鉴定正确后将重组质粒转化... 目的:构建携带人幽门螺杆菌(H pylori)中性粒细胞激活蛋白(HP-NAP)基因(napA)的重组活减毒鼠伤寒沙门菌口服DNA 疫苗. 方法:应用基因工程技术扩增全长napA,测序并同源性分析后,将其亚克隆入真核表达载体pIRES,鉴定正确后将重组质粒转化活减毒鼠伤寒沙门菌. 结果:重组质粒经PCR及双酶切,证实成功构建了携带HP-NAP基因的重组真核表达质粒pIRES-napA,后者成功转化活减毒鼠伤寒沙门菌SL7207.所克隆435bp napA与GenBank中SS1-napA核苷酸和蛋白质的同源性均为98%. 结论:成功构建并鉴定了携带HP-NA2P基因的重组活减毒鼠伤寒沙门菌口服DNA疫苗,为多价抗H pylori口服DNA疫苗的研制奠定了基础. 展开更多
关键词 幽门杆菌 中性细胞激活蛋白 活减毒鼠伤寒沙门菌 重组DNA疫苗株 HP-NAP
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幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白分子内佐剂融合疫苗的构建、纯化及活性研究 被引量:5
9
作者 高原 邹全明 张卫军 《中国药业》 CAS 2006年第18期11-13,共3页
目的构建幽门螺杆菌(HP)中性粒细胞激活蛋白基因(napA)与大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(heat-labileenterotoxinBsubunit,LTB)的分子内佐剂融合蛋白疫苗,并通过口服免疫小鼠研究其抗原性,为疫苗的开发奠定基础。方法利用分子克隆技术构... 目的构建幽门螺杆菌(HP)中性粒细胞激活蛋白基因(napA)与大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(heat-labileenterotoxinBsubunit,LTB)的分子内佐剂融合蛋白疫苗,并通过口服免疫小鼠研究其抗原性,为疫苗的开发奠定基础。方法利用分子克隆技术构建携带napA-LTB融合基因的重组原核表达质粒pET-22b-napA-LTB,转化E.coliBL21(DE3),进行原核表达,重组表达蛋白采用亲和层析柱ChelatingSepharose进行纯化,Tris-Tricine电泳和Westernblot鉴定,GM1-ELISA检测rNAP-LTB与神经节苷脂的结合。口服免疫BALB/c小鼠,检测重组融合蛋白的抗原性。结果重叠延伸PCR扩增出了约760bp的napA-LTB融合基因,其核苷酸序列与GenBank公布的相关序列一致。重组融合蛋白以可溶和包涵体两种形式表达,表达量约占细菌总蛋白的30%,Tris-Tricine初步测定目的蛋白的相对分子质量(Mr)约29000,纯化后纯度大于90%。Westernblot检测其具有良好的抗原性。该重组蛋白保持了与GM1神经节苷脂结合的生物学活性。动物实验表明,分子内佐剂疫苗口服免疫小鼠后血清特异性IgG,IgA和胃黏液、肠黏液的抗原特异性sIgA抗体显著高于无佐剂单一亚单位疫苗。结论所获得的重组融合蛋白具有良好的抗原性和黏膜佐剂活性,为进一步的疫苗研究奠定了基础。 展开更多
关键词 幽门杆菌 中性细胞激活蛋白 大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位 疫苗 分子内佐剂
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幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白的基因克隆与表达 被引量:1
10
作者 林珊珊 杨致邦 +1 位作者 吴利先 刘淼 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2004年第6期344-347,共4页
目的 克隆、表达幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白基因napA ,为研究幽门螺杆菌致病机理提供材料。方法 用PCR从幽门螺杆菌DNA中扩增出目的基因napA ,定向插入原核表达载体pQE30中 ,测序分析确认后 ,转化大肠杆菌DH5α ,IPTG诱导表达 ,表... 目的 克隆、表达幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白基因napA ,为研究幽门螺杆菌致病机理提供材料。方法 用PCR从幽门螺杆菌DNA中扩增出目的基因napA ,定向插入原核表达载体pQE30中 ,测序分析确认后 ,转化大肠杆菌DH5α ,IPTG诱导表达 ,表达蛋白以NI2 + NTA柱进行纯化。结果 PCR扩增出 4 35bp目的基因片段napA ,克隆入pQE30质粒。工程菌诱导后SDS -PAGE显示新生表达蛋白带 ,相对分子质量为 170 0 0 ,与预期一致 ,约占菌体总蛋白的 38% ,经Ni2 + NTA柱纯化后可获得纯度为 95 5 %重组蛋白。Westernblot显示重组蛋白具有良好的抗原性。结论 克隆napA基因成功 ,并在大肠杆菌DH5α中高效表达。 展开更多
关键词 幽门杆菌 中性细胞激活蛋白 基因 克隆 表达
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幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白的表达及免疫原性 被引量:1
11
作者 孙波 杨骅 +4 位作者 许涛 李兆申 屠振兴 杜奕奇 许国铭 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期75-77,共3页
目的克隆幽门螺杆菌(Hp)中性粒细胞激活蛋白(NAP)基因并制备其原核表达系统,研究其表达蛋白的免疫原性,为Hp疫苗研制提供理论依据。方法采用聚合酶链反应(PCR)扩增Hp-NAP基因,测序并作同源性分析后,亚克隆入原核表达载体pET-22b,转化表... 目的克隆幽门螺杆菌(Hp)中性粒细胞激活蛋白(NAP)基因并制备其原核表达系统,研究其表达蛋白的免疫原性,为Hp疫苗研制提供理论依据。方法采用聚合酶链反应(PCR)扩增Hp-NAP基因,测序并作同源性分析后,亚克隆入原核表达载体pET-22b,转化表达菌BL21-CodonPlus(r)(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析,Western blot鉴定其免疫原性。结果PCR扩增一408 bp产物,与基因库中相关序列具有高度同源性(>98%)。重组质粒pET-22b-nap转化BL21-CodonPlus(r)(DE3)后表达一相对分子质量约19 000的融合蛋白,能与Hp全菌抗体产生结合反应,Western blot显示特异的单一条带。结论成功构建Hp-NAP原核表达系统,所表达NAP融合蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性,可作为Hp疫苗的候选抗原。 展开更多
关键词 杆菌 幽门 中性细胞激活蛋白 疫苗
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抗幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白的单克隆抗体的制备和鉴定 被引量:1
12
作者 龙敏 李妍 +1 位作者 罗军 李明 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第12期1429-1432,共4页
目的:从抗幽门螺杆菌(Hpylori)全菌蛋白的单克隆抗体(mAb)中,应用重组中性粒细胞激活蛋白(NAP),筛选出抗NAP单抗并进行鉴定.方法:临床分离H pylori DY01,DY04株.免疫BALB/c小鼠后,应用杂交瘤技术制备mAb.再用ELISA方法以重组表达的NAP... 目的:从抗幽门螺杆菌(Hpylori)全菌蛋白的单克隆抗体(mAb)中,应用重组中性粒细胞激活蛋白(NAP),筛选出抗NAP单抗并进行鉴定.方法:临床分离H pylori DY01,DY04株.免疫BALB/c小鼠后,应用杂交瘤技术制备mAb.再用ELISA方法以重组表达的NAP蛋白筛选相应的单抗,对NAP单抗进行亚类鉴定和效价检测,并用Western blot和免疫组化方法鉴定其特异性.结果:获得3株针对H pylori-NAP蛋白的特异性mAb,抗体亚类为IgG1,轻链为k型.单抗细胞培养液的抗体效价为1/16-1/32,腹水的抗体效价是1/32000-1/64000.Western blot鉴定表明,抗NAPmAb针对NAP蛋白产生特异性条带,具有高度的特异性;免疫组化分析显示:3株NAP mAb能与H pylori临床菌株发生特异性结合反应,菌体染成深棕色.结论:获得抗Hpylori-NAP蛋白的特异性mAb,为幽门螺杆菌感染的诊断、预后判断及表位疫苗的研究提供基础. 展开更多
关键词 幽门杆菌 中性细胞激活蛋白 单克隆抗体 WESTERN BLOT 免疫组化
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幽门螺杆菌儿童分离株中性粒细胞激活蛋白克隆及表达序列 被引量:1
13
作者 周珍文 关锐梨 +6 位作者 夏慧敏 付捷 邓秋连 谢永强 黄勇 廖灿 龚四堂 《广州医学院学报》 2011年第3期86-90,共5页
目的:从幽门螺杆菌临床儿童分离株GZCH1基因组扩增中性粒细胞激活蛋白(NAP)基因,克隆入T载体,并亚克隆入表达载体pGEX-4T-1,进行测序及基因比对分析,为幽门螺杆菌疫苗研制奠定基础。方法:根据GenBank中幽门螺杆菌NAP序列,设计一对特异... 目的:从幽门螺杆菌临床儿童分离株GZCH1基因组扩增中性粒细胞激活蛋白(NAP)基因,克隆入T载体,并亚克隆入表达载体pGEX-4T-1,进行测序及基因比对分析,为幽门螺杆菌疫苗研制奠定基础。方法:根据GenBank中幽门螺杆菌NAP序列,设计一对特异性引物扩增幽门螺杆菌临床儿童分离株NAP全长基因,与T载体连接,转化大肠杆菌DH5α,提取质粒进行酶切、测序鉴定,经EcoRⅠ、NotⅠ双酶切后与做相应酶切的pGEX-4T-1连接,转化大肠杆菌BL21,提取质粒进行双酶切鉴定,IPTG诱导重组蛋白表达,并对基因进行测序及比对分析。结果:以幽门螺杆菌儿童分离株GZCH1为模板,成功扩增了NAP基因,基因大小为435 bp,重组pGEX-4T-1-NAP双酶切鉴定可见目的片段,测序结果显示NAP在正确读框中,序列比对分析显示其与幽门螺杆菌J99株氨基酸一致性达99.2%,IPTG诱导后,pGEX-4T-1-NAP/BL21在相应分子量(42.8 kD)可见融合蛋白的表达。幽门螺杆菌儿童分离株GZCHl NAP序列已登录GenBank(登录号:GU301881)。结论:从幽门螺杆菌临床儿童分离株GZCH1中成功克隆了NAP基因,并获得重组蛋白的表达,为NAP幽门螺杆菌疫苗研制奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 幽门杆菌 儿童 中性细胞激活蛋白 克隆 表达
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幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白DNA疫苗的构建及鉴定
14
作者 杨骅 孙波 +3 位作者 满晓华 龚燕芳 屠振兴 李兆申 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期337-339,共3页
目的 构建幽门螺杆菌 (Hp)中性粒细胞激活蛋白 (HP NAP)DNA疫苗。 方法 扩增全长napA(编码HP NAP) ,将其与克隆载体 pBT连接 ,经测序及同源性分析后 ,将相应片段亚克隆入真核表达载体pIRES ,经双酶切及PCR鉴定。 结果 PCR扩增一 4 3... 目的 构建幽门螺杆菌 (Hp)中性粒细胞激活蛋白 (HP NAP)DNA疫苗。 方法 扩增全长napA(编码HP NAP) ,将其与克隆载体 pBT连接 ,经测序及同源性分析后 ,将相应片段亚克隆入真核表达载体pIRES ,经双酶切及PCR鉴定。 结果 PCR扩增一 4 35bp产物 ,核苷酸序列测定及BLAST分析表明 ,所克隆序列与基因库中Hp悉尼株 (SS1)napA核苷酸及蛋白质的同源性均为 98%。ANTHEPROT软件预测其蛋白质具有良好的疏水性和抗原性。经PCR及双酶切鉴定 ,证实成功构建携带napA的重组真核表达质粒 pIRES napA。结论 成功构建并鉴定了HP NAP重组DNA疫苗 ,为进一步研究其免疫原性及研制口服DNA疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 幽门杆菌 中性细胞激活蛋白 DNA疫苗 构建 鉴定
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幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白C-末端区域疫苗治疗小鼠幽门螺杆菌感染
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作者 贺军 孙勇 陈雅华 《现代消化及介入诊疗》 2010年第2期63-65,共3页
目的在人类幽门螺杆菌(Hp)感染的C57BL/6小鼠模型中,研究中性粒细胞激活蛋白C-末端区域疫苗治疗Hp感染的作用。方法把已感染Hp的C57BL/6小鼠分成4组,分别通过灌胃法给予单纯中性粒细胞激活蛋白C-末端蛋白(100μg)、中性粒细胞激活蛋白C... 目的在人类幽门螺杆菌(Hp)感染的C57BL/6小鼠模型中,研究中性粒细胞激活蛋白C-末端区域疫苗治疗Hp感染的作用。方法把已感染Hp的C57BL/6小鼠分成4组,分别通过灌胃法给予单纯中性粒细胞激活蛋白C-末端蛋白(100μg)、中性粒细胞激活蛋白C-末端蛋白(100μg)加霍乱毒素(CT,2μg)、单纯CT(2μg)或PBS,每周1次,共4次,治疗4周后处死动物,取胃黏膜行半定量细菌培养检查Hp情况。结果治疗后各组Hp根除率分别为:中性粒细胞激活蛋白C-末端蛋白加CT组50%(5/10),单纯中性粒细胞激活蛋白C-末端蛋白组、单纯CT组及PBS组根除率均为0%。统计分析表明中性粒细胞激活蛋白C-末端蛋白加CT组的H.pylori根除率较其它组有显著性差异(P<0.05)。此外,未根除Hp的小鼠,中性粒细胞激活蛋白C-末端蛋白加CT组Hp的定植密度明显低于其它3组(P<0.05)。结论中性粒细胞激活蛋白C-末端蛋白能够作为Hp多价治疗疫苗的组分之一。 展开更多
关键词 幽门杆菌 中性细胞激活蛋白C-末端蛋白 疫苗
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幽门螺杆菌感染儿童消化性溃疡患者Th17/Treg与转化生长因子β和白细胞介素水平的临床意义
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作者 孙谦 黄茉英 伍丽莉 《当代医学》 2023年第23期45-47,共3页
目的研究不同分型幽门螺杆菌(Hp)感染儿童消化性溃疡(PU)患者辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)、转化生长因子β(TGF-β)和白细胞介素(IL)水平。方法选取2021年2—9月本院收治的90例Hp感染儿童PU患儿作为研究对象,采用免疫印迹法... 目的研究不同分型幽门螺杆菌(Hp)感染儿童消化性溃疡(PU)患者辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)、转化生长因子β(TGF-β)和白细胞介素(IL)水平。方法选取2021年2—9月本院收治的90例Hp感染儿童PU患儿作为研究对象,采用免疫印迹法检测血清Hp分型,采用酶联免疫吸附法检测Th17/Treg、TGF-β和IL-1β、IL-17、IL-35水平,比较不同分型患儿Th17/Treg、TGF-β和IL-1β、IL-17、IL-35水平。结果90例患儿中,HpⅠ型51例(56.67%),HpⅡ型14例(15.56%),Hp阴性25例(27.78%)。HpⅠ型患儿Th17/Treg水平低于HpⅡ型及Hp阴性患儿,TGF-β、IL-1β、IL-17、IL-35水平均高于HpⅡ型及Hp阴性患儿,差异有统计学意义(P<0.05);HpⅡ型患儿Th17/Treg水平低于Hp阴性患儿,TGF-β、IL-1β、IL-17、IL-35水平均高于Hp阴性患儿,差异有统计学意义(P<0.05)。结论不同分型Hp感染儿童PU患儿Th17/Treg、TGF-β和IL水平存在差异,利于鉴别Hp分型,为临床提供新思路。 展开更多
关键词 幽门杆菌感染 儿童消化性溃疡 辅助性T细胞17/调节性T细胞 转化生长因子-β 白细胞介素-1β 白细胞介素-17 白细胞介素-35
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白细胞介素23在幽门螺杆菌感染所致胃黏膜疾病中的作用研究进展 被引量:3
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作者 张冬雪 丁士刚 张静 《中国医药》 2023年第6期949-952,共4页
幽门螺杆菌(Hp)是一种选择性定植于胃黏膜的革兰阴性杆菌,是诱导产生慢性胃炎乃至胃癌的主要因素之一。白细胞介素在炎症到肿瘤的发生发展过程中发挥了重要作用,近期白细胞介素12家族中的白细胞介素23受到了越来越多的关注,研究表明白... 幽门螺杆菌(Hp)是一种选择性定植于胃黏膜的革兰阴性杆菌,是诱导产生慢性胃炎乃至胃癌的主要因素之一。白细胞介素在炎症到肿瘤的发生发展过程中发挥了重要作用,近期白细胞介素12家族中的白细胞介素23受到了越来越多的关注,研究表明白细胞介素23对于Hp感染后激活胃黏膜炎症通路、放大及维持炎症反应以及促进肿瘤发生发展等方面发挥了重要作用。有研究表明硫氧还蛋白1为Hp的毒力因子,且可能通过白细胞介素23发挥促炎作用。本文就白细胞介素23在Hp感染所致的胃黏膜疾病中作用的研究进展作一综述,并探讨与Hp硫氧还蛋白1相关的致病机制。 展开更多
关键词 胃癌 幽门杆菌 白细胞介素23 胃黏膜疾病 硫氧还蛋白1
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NapA蛋白诱导巨噬细胞分泌趋化因子单核细胞趋化蛋白1和白细胞介素8的机制
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作者 李杰 严洁 杨红霞 《包头医学院学报》 CAS 2024年第8期15-20,共6页
目的:研究幽门螺杆菌NapA蛋白诱导巨噬细胞分泌趋化因子单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)和白细胞介素8(interleukin-8,IL-8)的机制。方法:利用NapA蛋白处理巨噬细胞,然后使用ELISA法检测上清中MCP-1和IL-... 目的:研究幽门螺杆菌NapA蛋白诱导巨噬细胞分泌趋化因子单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)和白细胞介素8(interleukin-8,IL-8)的机制。方法:利用NapA蛋白处理巨噬细胞,然后使用ELISA法检测上清中MCP-1和IL-8的表达量。使用C29、ST2825、SB203580、SP600125以及PDTC和巨噬细胞预先共孵育1 h,分别抑制Toll样受体2(toll-like receptors 2,TLR2)、髓样分化因子(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、核糖核酸酶p蛋白亚基p38(ribonuclease p-protein subunit p38,p38)、应激活化蛋白激酶(c-Jun N-terminal kinase,c-Jun)和核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)的活性,然后再加入NapA蛋白孵育4 h,收集上清并检查其中MCP-1和IL-8的表达量。结果:NapA蛋白刺激巨噬细胞后,MCP-1和IL-8的表达量明显高于未处理组。利用抑制剂C29抑制TLR2的活性,NapA蛋白诱导的MCP-1和IL-8表达量降低。使用ST2825、PDTC以及SB203580分别抑制MyD88、NF-κB以及p38的活性,能够降低NapA蛋白诱导巨噬细胞分泌MCP-1和IL-8的能力,但是抑制c-Jun不影响NapA蛋白诱导巨噬细胞分泌MCP-1和IL-8。结论:幽门螺杆菌NapA蛋白通过TLR2/MyD88/NF-κB通路诱导巨噬细胞分泌MCP-1和IL-8。 展开更多
关键词 幽门杆菌 NapA蛋白 Toll样受体2 趋化因子 单核细胞趋化蛋白1 白细胞介素8
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幽门螺杆菌相关胃病脾胃湿热证患者热休克蛋白70和白细胞介素-8的表达 被引量:15
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作者 邢海伦 胡玲 +3 位作者 罗琦 周正 劳绍贤 胡斌 《广东医学》 CAS 北大核心 2015年第1期133-136,共4页
目的通过检测幽门螺杆菌(Hp)相关胃病脾胃湿热证患者白细胞介素-8(IL-8)及热休克蛋白70(HSP70)的表达,探讨Hp相关胃病脾胃湿热证发生的病理机制。方法选择脾胃湿热证和脾气虚证的慢性胃炎、消化性溃疡患者75例,招募健康志愿者10例作为... 目的通过检测幽门螺杆菌(Hp)相关胃病脾胃湿热证患者白细胞介素-8(IL-8)及热休克蛋白70(HSP70)的表达,探讨Hp相关胃病脾胃湿热证发生的病理机制。方法选择脾胃湿热证和脾气虚证的慢性胃炎、消化性溃疡患者75例,招募健康志愿者10例作为正常对照。采用免疫组织化学标记法、荧光定量PCR法检测各组胃黏膜HSP70、IL-8蛋白及m RNA的表达。结果 HSP70、IL-8蛋白和m RNA表达水平呈现脾胃湿热证患者>脾气虚证患者>正常对照者的趋势。Hp感染者HSP70、IL-8蛋白和m RNA表达水平较非感染者有偏高趋势。结论 HSP70、IL-8的表达与证型及Hp感染可能存在一定的相关性,HSP70表达水平与Hp感染的关系可能部分体现脾胃湿热证的"正邪交争"状态,IL-8的高表达可能为脾胃湿热证Hp作用于胃黏膜的机制之一。 展开更多
关键词 幽门杆菌相关胃病 脾胃湿热证 热休克蛋白70 白细胞介素-8
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幽门螺杆菌依赖丝裂原活化蛋白激酶信号通路诱导SGC7901细胞表达分泌白细胞介素-8 被引量:4
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作者 徐灿 李兆申 +4 位作者 许国铭 屠振兴 龚燕芳 满晓华 许爱芳 《胃肠病学》 2004年第2期68-72,共5页
背景:已知前炎症细胞因子白细胞介素(IL)鄄8在慢性活动性胃炎、消化性溃疡等幽门螺杆菌(H.pylori)感染相关疾病的发生、发展中起重要作用,但H.pylori诱导胃上皮细胞表达、分泌IL鄄8的分子机制尚不明确。目的:通过体外实验了解H.pylori... 背景:已知前炎症细胞因子白细胞介素(IL)鄄8在慢性活动性胃炎、消化性溃疡等幽门螺杆菌(H.pylori)感染相关疾病的发生、发展中起重要作用,但H.pylori诱导胃上皮细胞表达、分泌IL鄄8的分子机制尚不明确。目的:通过体外实验了解H.pylori对人胃癌细胞株SGC7901表达、分泌IL鄄8的影响,探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在H.pylori诱导SGC7901细胞IL鄄8mRNA表达和IL鄄8蛋白分泌中的作用。方法:SGC7901细胞经p38MAPK特异性抑制剂SB203580预作用2h,再加入H.pylori标准菌株CCUG17874共培养。采用逆转录聚合酶链反应(RT鄄PCR)检测IL鄄8mRNA的表达,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测IL鄄8蛋白的分泌,观察SB203580对H.pylori诱导SGC7901细胞表达、分泌IL鄄8的影响。结果:H.pylori能诱导SGC7901细胞表达、分泌IL鄄8。SB203580能以剂量依赖的方式抑制H.pylori诱导的SGC7901细胞IL鄄8蛋白分泌,经终浓度为0.3、1、3和10μmol/L的SB203580预作用2h,SGC7901细胞的IL鄄8蛋白分泌与未经SB203580预作用组相比分别减少了26%、51%、64%和73%(P<0.05);SB203580也能使H.pylori诱导的IL鄄8mRNA表达显著减弱。结论:H.pylori能诱导胃上皮细胞表达、分泌IL鄄8,该作用在一定程度上依赖于MAPK信号通路。 展开更多
关键词 幽门杆菌 丝裂原活化蛋白激酶 信号通路 SGC7901细胞 白细胞介素-8 炎症细胞因子
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