广西毛冬青通过抑制氧化应激改善放射后小鼠认知功能损伤

目的:探讨广西毛冬青改善放射诱导的认知功能障碍及其初步机制。方法:SPF级雄性昆明小鼠,随机分为对照组(Control)、毛冬青组(IP)、放射组(Rad)、放射+毛冬青组(Rad+IP),10只/组,放射前后连续灌胃给药共14 d,Control组和Rad组给予等量生理盐水。药物干预前后采用Morris水迷宫实验和避暗实验检测小鼠认知功能变化;苏木素-伊红(HE)染色和电镜观察小鼠海马病理学变化及超微结构;免疫组织化学染色检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)、B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达情况。结果:Rad后小鼠海马MnSOD和Bcl-2表达明显降低,Nrf2、Bax和HO-1表达明显增多,Nrf2的核易位也显著增多,广西毛冬青干预后,MnSOD表达明显升高,胞核中Nrf2核表达进一步增多,HO-1的表达水平进一步升高,凋亡率明显降低。结论:广西毛冬青改善受照射小鼠认知功能障碍,其机制可能与Nrf2激活并调控HO-1转录与表达,减轻氧化应激损伤有关。

基于JNK/AP-1信号通路探讨广西毛冬青在放射性脑损伤中的作用机制

目的:探讨广西毛冬青(IPH)对放射性脑损伤的改善作用及其机制。方法:将40只SPF级昆明小鼠随机分为对照组、IPH、放射组和放射+IPH组,每组10只。采用γ射线建立放射性脑损伤模型,放射前、后连续灌胃给药14 d。采用Morris水迷宫实验、避暗实验检测小鼠认知功能,苏木精—伊红(HE)染色和尼氏染色观察脑组织病理形态变化,电镜观察胶质细胞超微结构,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清白介素-6(IL-6)水平,免疫组织化学染色法检测脑组织c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化(p-)JNK、激活蛋白-1(AP-1)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)蛋白表达,免疫荧光检测脑组织星型胶质细胞标记物GFAP和小胶质细胞标记物Iba-1蛋白表达,western blotting法检测脑组织JNK和p-JNK蛋白表达。结果:与对照组相比,放射组小鼠放射后7 d体重减低,血清IL-6含量升高,脑组织AP-1、MCP-1表达水平及p-JNK/JNK比值升高,小胶质细胞Iba-1和GFAP表达水平升高(均P<0.05)。与放射组比较,放射+IPH组小鼠放射后7 d体重增加,血清IL-6含量降低,脑组织AP-1、MCP-1表达水平及p-JNK/JNK比值降低,小胶质细胞Iba-1和GFAP表达水平降低(均P<0.05)。HE染色和尼氏染色显示,放射组大量细胞和神经元出现核固缩现象,小胶质细胞激活,呈圆形;电镜下可见细胞内溶酶体增多,星形胶质细胞细胞核及胞质肿胀;经IPH干预后,小鼠脑组织神经元变性情况和胶质细胞形态明显改善。结论:广西IPH能改善放射性脑损伤小鼠的认知功能,减少小胶质细胞和星形胶质细胞激活,其机制可能与减轻神经炎症反应、抑制JNK/AP-1信号通路有关。

广西毛冬青根的化学成分研究

目的:研究广西毛冬青根的化学成分。方法:采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱、ODS、高压快速制备色谱及半制备高效液相色谱等色谱方法分离纯化,并根据理化性质和波谱数据对所得化合物的结构进行鉴定。结果:从广西毛冬青根中分离得到16个化合物,分别鉴定为:butyl isolignstroside(1)、liguside B(2)、isoligustroside(3)、oleonuezhenide(4)、(2″R)-2″-methoxyoleuropein(5)、(2″S)-2″-methoxyoleuropein(6)、jasurolignoside(7)、oleuropein-3″-methyl ether(8)、异麦角甾苷(9)、vanillyl-β-D-glucopyranoside(10)、hebeoside(11)、橄榄树脂素(12)、pinnatifidanin BⅡ(13)、sinapic aldehyde 4-O-β-D-glucopyranoside(14)、torenoside B(15)、小蜡苷Ⅰ(16)。结论:其中,化合物1~3、5~9、11、13、15和16为首次从该属植物分离得到,所有化合物均为首次从该植物分离得到。

广西毛冬青根对放射脑损伤小鼠认知功能障碍的改善作用及其机制研究

目的:探讨广西毛冬青根对放射脑损伤小鼠认知功能障碍的改善作用及其机制。方法:将100只SPF级雄性昆明小鼠随机分为对照组、毛冬青组、放射组和放射+毛冬青组,每组25只。毛冬青组和放射+毛冬青组小鼠于放射前给予毛冬青溶液连续灌胃7 d(1 mL/30 mg),其余各组给予等量生理盐水。放射组和放射+毛冬青组采用^(60)Coγ射线照射小鼠脑部建立认知障碍模型,放射前连续给药7 d;对照组和毛冬青组置于同等条件中,照射剂量为0 Gy。通过神经行为、ELISA、HE染色以及免疫荧光等方法观察广西毛冬青根干预对小鼠空间记忆功能、海马区组织形态结构以及小胶质细胞、星形胶质细胞活性的影响。结果:与对照组相比,放射组小鼠出现记忆功能障碍,海马区神经细胞核固缩,神经胶质细胞激活,IL-6、Iba-1、GFAP水平提高(P<0.05);与放射组相比,放射+毛冬青组小鼠记忆能力、海马区细胞的形态结构得到改善,IL-6、Iba-1和GFAP水平下降(P<0.05)。结论:广西毛冬青根可以改善放射性脑损伤小鼠的认知功能,其机制可能与抑制神经胶质细胞活化有关。

广西毛冬青的化学成分研究

目的研究广西毛冬青Ilex pubescens var.kwangsiensis根的化学成分。方法利用反复硅胶柱色谱法、Sephadex LH-20凝胶柱色谱法、中压柱色谱法、高压快速制备色谱及半制备高效液相色谱等方法分离纯化,通过理化常数和NMR、MS波谱等方法鉴定化合物结构。结果从广西毛冬青甲醇提取物中分离得到14个化合物,分别鉴定为丁香苷(1)、3,4-二羟基苯乙醇(2)、橄榄苦苷(3)、红景天苷(4)、木樨榄苷-11-甲酯(5)、(8E)-女贞子苷(6)、(8Z)-ligstroside(7)、oleoacteoside(8)、oleoside dimethyl ester(9)、olivil-4′-O-β-D-glucoside(10)、(+)-cyclo-olivil-6-O-β-D-glucoside(11)、(+)-cyclo-olivil-4′-O-β-Dglucoside(12)、ligstroside(13)、wilfordiol B(14)。结论化合物2、4、12~14为首次从冬青属植物中分离得到,化合物1、3、5~11为首次从本植物中分离得到。