大菱鲆肠道中广谱拮抗活性乳酸菌的筛选及其细菌素鉴定

应用牛津杯法从大菱鲆肠道分离的乳酸菌中筛选出对革兰氏阳性和阴性细菌均具有抑制作用的菌株LP1-4,经生理生化反应和16SrRNA鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)。通过温度、pH值和蛋白酶等因素分析,结果表明菌株LP1-4无细胞上清液(cell-free supernatant,CFS)中抑菌物质具有良好的热稳定性,在pH2.5～5.0具有抑菌活性,且对蛋白酶敏感,初步判断为细菌素类抑菌物质。菌株LP1-4在最佳培养时间24 h时抑菌活性达到峰值,应用乙酸乙酯萃取后抑菌圈直径达25.42 mm。采用Labscale TFF System超滤分离和Sephadex G-25凝胶层析获得小于1.0 ku分子质量的细菌素。经高效液相色谱纯化分析,抑菌物质在液相分离条件下目标峰的保留时间为5.0 min。采用基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱确定细菌素分子质量为0.854 ku,其氨基酸排列顺序为谷氨酸-天冬酰胺-赖氨酸-脯氨酸-丙氨酸-丙氨酸-脯氨酸-赖氨酸(ENKPAAPK)。本研究从大菱鲆肠道筛选具有广谱抗菌活性的菌株LP1-4,对研发控制水产品腐败菌和致病菌的乳酸菌生物防腐保鲜制剂具有潜在的应用价值。

广谱性拮抗植物病原菌枯草芽孢杆菌的分离鉴定及芽孢形成条件的研究

从大兴安岭松苑原始森林林区分离得到的一株对梨黑斑病菌具有拮抗作用的芽孢杆菌,经形态学、生理生化和分子生物学鉴定为枯草芽孢杆菌,命名为Bacillus subtilis Z58;平板对峙实验结果表明B. subtilis Z58对17种植物病原菌均具有拮抗作用;单因素和正交设计得出B. subtilis Z58生成芽孢的最适条件为:发酵液体积:吸附材料质量为4:1,菌体量6 ×109/g和温度为32℃,且该菌株芽孢形成率在15 d达到98%以上,到90 d时基本无营养体存在,该菌株有望开发成农用生防微生物菌剂。

辣椒枯萎病土壤拮抗真菌的筛选与鉴定

为辣椒枯萎病生物防治研究提供有效的菌株资源,以不同生境的根际土壤为试材,采用平板对峙法和抑菌圈法筛选辣椒枯萎病的高效拮抗菌,并结合形态学与分子生物学鉴定方法对拮抗菌株进行鉴定。结果表明:从土样中分离获得真菌菌株61株,其中11个菌株对辣椒枯萎病菌(尖孢镰刀菌)具有拮抗作用;菌株LB010402对尖孢镰刀菌抑菌效果最好,抑制率为60.47%,其处理第5天时抑菌圈直径为31.5mm;其对辣椒疫病、辣椒炭疽病、辣椒根腐病、猕猴桃软腐病及茶叶轮斑病等5种病害病原菌的抑制率分别为60.17%、51.42%、50.38%、61.66%和59.85%;结合形态学特征及分子生物学特征鉴定菌株LB010402为球毛壳菌(Chaetomium globosum)。