产生广谱活性物质的放线菌Streptomyces bacillaris的分离鉴定

从台州市填海工业园淤泥中分离功能型放线菌,评价其不同发酵液的抗菌活性,以发掘和扩充其潜在的经济价值。采用连续稀释法将淤泥样品在HV培养基和高氏培养基上分离和纯化培养放线菌,通过菌块对峙法测定初筛放线菌对大肠杆菌(E.coli)、金黄色葡萄球菌(S.aureus)、藤黄微球菌(M.luteus)3种细菌指示菌的抑菌直径。利用琼脂孔扩散法测定不同配方发酵液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌、枯草芽孢杆菌、肺炎克雷伯氏菌和铜绿假单胞菌抑菌区直径大小以评价菌株的抑菌活性。采用菌落显微形态观察、生理生化特征实验和16SrDNA序列比对法对抑菌活性强的菌株进行鉴定,构建系统发育树。结果表明,淤泥样品初筛共分离纯化获得9株活性放线菌,其中1株放线菌(4-4)的不同配方发酵液均对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌、枯草芽孢杆菌、肺炎克雷伯氏菌和铜绿假单胞菌表现出不同的抑菌活性,经形态、生理生化和16SrDNA序列比对鉴定为链霉菌属Streptomyces bacillaris。说明从填海工业区淤泥分离出的能够稳定产生广谱生物活性产物的野生链霉菌Streptomyces bacillaris,对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有抑制作用,为后续对该链霉菌进行代谢产物的分离和新药研发等领域提供了参考数据。

高致病性禽流感病毒广谱嵌合抗体的构建表达及活性研究

高致病性禽流感病毒高度变异且缺乏有效的治疗药物.在前期研究工作中,本课题组发现一株鼠源广谱中和单抗13D4,在动物实验中显示出对H5N1禽流感病毒具有广谱治疗效果.在本研究中,从分泌13D4单克隆抗体的杂交瘤细胞株中抽提总RNA,经RT-PCR扩增出轻重链可变区DNA序列,并分别与人IgG1的轻重链恒定区基因序列拼接,构建人-鼠嵌合抗体.筛选出稳定表达嵌合抗体的CHO细胞株,从培养上清中纯化出嵌合抗体.竞争Elisa结果表明,嵌合抗体与鼠源单抗能够识别同一个抗原表位并具有相似的亲和力.血凝抑制反应和中和活性测定结果证明,13D4嵌合抗体保留了对不同亚型H5N1病毒的广谱反应性,并且对两株H5N1病毒具有中和活性.本研究获得的13D4嵌合抗体将具有潜在的治疗价值.

1株具广谱抑菌活性的乳酸乳球菌的分离鉴定与保鲜效果

为开发出新型冷却肉保鲜剂,从土壤中分离到1株具有较宽抑菌谱的乳酸菌,对冷却肉上7种常见的腐败和致病菌有明显的抑菌活性,包括热死环丝菌、单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌、乳酸乳球菌、荧光假单胞菌、致病性大肠杆菌和沙门氏菌,并且排除了因产乳酸和过氧化氢而具备抑菌作用的可能性。根据细胞形态、菌落形态、生理生化反应特性和16Sr DNA序列和具菌株特异性的N-乙酰胞壁酸水解酶基因序列的比对分析,这株菌被鉴定为乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subsp.lactis),命名为NFL。菌株NFL发酵液中的抑菌物质对热有极强的耐受性,在121°C的灭菌温度下处理90 min抑菌活性基本不变。经121℃下灭菌20 min的菌株NFL发酵上清液对托盘包装冷却猪肉具有明显的保鲜效果,尤其是可显著减少腐臭味。

广谱抑菌性多粘类芽孢杆菌的筛选及其细菌素理化特性

采用热处理和琼脂扩散法从湖泥中筛选出一株产广谱抗菌活性物质的芽孢杆菌XW4,通过形态观察、生理生化实验、16S rDNA分析等对其进行鉴定,并对其发酵产物进行抑菌活性探究。结果表明XW4在细菌发育分类学上鉴定为多粘类芽孢杆菌,其发酵产物对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、赖氨酸芽孢杆菌等多种腐败微生物均有抑制作用XW4。XW4无细胞上清液对蛋白酶k敏感,对木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶不敏感;经60、80、100℃处理30 min后,对大肠杆菌拮抗活性基本不变;在pH3.0~11.0范围内保持其抑菌活性。

细菌素Echcin防治作物真菌病害、细菌病害的研究

细菌素Ｅｃｈｃｉｎ 是本研究室从来自水稻的菊欧氏菌（ Ｅｒｗｉｎｉａ ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｉ） 中分离提取的一种抗菌物质。本试验报道了Ｅｃｈｃｉｎ 防治作物细菌病害、真菌病害的研究。采用纸碟法测定了Ｅｃｈｃｉｎ 对５ 个属植物病原细菌共１４ 个菌株的抑制作用，琼脂稀释法测定了Ｅｃｈｃｉｎ 对１２ 种植物病原真菌的抑制作用，在此基础上开展了Ｅｃｈｃｉｎ 对番茄早疫病和稻白叶枯病的温室盆栽试验，同时开展了Ｅｃｈｃｉｎ 对小麦纹枯病的田间小区试验。研究结果表明：Ｅｃｈｃｉｎ 对５ 个属植物病原细菌、辣椒疫霉、苎麻疫霉、番茄早疫等病原真菌具有很强的抑制作用。Ｅｃｈｃｉｎ 喷雾２ 次，对番茄早疫病的盆栽防病效果为７５ ．８ ％ 。Ｅｃｈｃｉｎ 拌种或后期喷雾１ 次，对小麦纹枯病的田间防效达６０ ％ 以上。

斯皮仁诺胶囊治疗肛周念珠菌病13例疗效观察

目的 :观察口服斯皮仁诺胶囊 (伊曲康唑 )治疗肛周念珠菌病的疗效。方法 :对临床上确诊的 13例肛周念珠菌病患者采用口服斯皮仁诺胶囊短程间歇性冲击疗法。结果 :经治疗 2个疗程后 ,全部患者自觉症状消失 ,真菌客观指标均转阴。结论 :斯皮仁诺胶囊治疗肛周念珠菌病复发率低 ,无毒副作用 。

技术市场——新型涂料防霉剂SUI生产技术

本防霉剂具有低毒的广谱松菌活性，性能稳定，可配制溶剂型和水基型内外墙防霉涂料。合成简便、产率高。这是国外早已广泛应用而国内首次开发的新产品。