超声波辅助提取广陈皮黄酮的工艺优化及其抗氧化活性的研究

以广东新会生产的广陈皮作为原材料,利用超声波辅助提取,采用正交试验法优化广陈皮黄酮的提取工艺,并进行抗氧化活性的测定。以芦丁为参照品,采用紫外可见光分光光度法建立了测定广陈皮中黄酮含量的定量分析方法。采取正交试验法,在单因素试验的基础上,分析了乙醇浓度、超声时间、超声功率、固液比这4个因素的交互作用,得到最佳条件并且进行验证。最后采用清除DPPH自由基和清除羟自由基的方法研究广陈皮黄酮的抗氧化能力。得出结论:当乙醇浓度为60%、超声时间为45 min、超声功率为300 W、固液比为1∶50时,广陈皮黄酮提取率可达到1.86%。随着黄酮浓度的增大,DPPH自由基和羟自由基的清除率越高,证明了广陈皮黄酮的抗氧化能力较高,是一种强抗氧化剂。

广陈皮精油的抗氧化活性研究及其应用

本文以超临界CO_(2)萃取法提取的5年份广陈皮精油为研究对象,利用气相色谱-质谱联用技术对广陈皮精油化学组成成分进行分析,采用体外抗氧化测定方法来综合评价广陈皮精油的抗氧化能力,以壳聚糖包埋方法制备了一种新型的精油纳米乳液并进行应用评价。结果表明:广陈皮精油中有20种主要挥发性成分,其中柠檬烯含量最高(58.41%)。体外抗氧化活性测定结果显示广陈皮精油对ABTS自由基(IC_(50)=5.75 mg/mL)和DPPH自由基(IC_(50)=44.54 mg/mL)均具有一定的清除能力,具有良好的抗氧化活性。扫描电镜(SEM)形态观察结果表明广陈皮精油纳米乳液呈球形,均匀度稳定性良好。在实际应用中,精油纳米乳液可有效延缓苹果的氧化褐变,达到防腐保鲜的效果。

基于不同卷积神经网络模型的陈皮、广陈皮图像的智能识别研究

目的:基于卷积神经网络算法建立一种能够快速、高效的识别出陈皮以及广陈皮的方法。方法:在体视镜下采集样品的外果皮图像并建立数据集。采用Imagenet预训练权重作为预训练模型,基于VGG、Inception、Resnet、DenseNet骨干模型进行训练,识别及比较,选取最优的模型进行运作。结果:Resnet与Inception网络对数据具有较好的适应性,而VGG与DenseNet存在一定的过拟合情况。通过对Resnet与Inception进行交叉验证,结果显示Resnet的准确率均高于Inception,最终选择Resnet建立一套有效识别陈皮、广陈皮的方法。结论:卷积神经网络可有效提取图像高级特征,能较为准确鉴别出陈皮与广陈皮。

基于种植环境对次生代谢产物影响下的广陈皮与陈皮对比研究

目的 比较基于种植环境对次生代谢产物影响下的广陈皮与陈皮。方法 采用液质联用技术分析并指认不同品种之间陈皮样品中的差异成分,通过比较广陈皮与陈皮在283 nm下差异黄酮类成分之间的峰面积比值,分析不同产地陈皮中差异成分峰面积比值规律。结果 不同产地陈皮样品共有6个差异成分,分别为橙皮苷、甜橙黄酮、6-去甲氧基橘皮素、川陈皮素、橘皮素、5-去甲基川陈皮素。甜橙黄酮/6-去甲氧基橘皮素>0.60或橘皮素/5-去甲基川陈皮素>7.00为广陈皮,甜橙黄酮/6-去甲氧基橘皮素≤0.60或橘皮素/5-去甲基川陈皮素≤7.00为陈皮。结论 本研究采用283 nm波长下峰面积比值甜橙黄酮/6-去甲氧基橘皮素>0.60或橘皮素/5-去甲基川陈皮素>7.00作为广陈皮的判断依据,该方法可以提高陈皮产地区分指标的便捷性和普适性。

南药广陈皮(茶枝柑)种植技术规范

广陈皮茶枝柑Citrus reticulata cv.Chachiensis为我国重要的道地药材,主产于广东省江门市新会区,开展规范化种植可为该药材的可持续发展提供技术支撑。文中根据2006~2023年新会区不同生态区域种植茶枝柑的技术措施,结合广东省南药(广陈皮)产业技术体系创新团队2019~2023年的实地调查,从种植品种、产地环境、种苗生产、大田种植、病虫害防治、果实采摘等方面进行总结,制定其规范化种植技术标准。

基于BWO-SVM算法的广陈皮陈化年份高光谱鉴别模型

针对市场中存在广陈皮年份造假、以次充好等问题,提出一种基于黑寡妇优化算法(BWO)和支持向量机模型(SVM)的广陈皮陈化年份高光谱鉴别方法。以四类陈化年份(5~20年)的广陈皮作为实验对象,采集样本的高光谱图像数据(385~1014 nm波长),通过镜头校准和反射率校准后提取样本感兴趣区域的平均光谱数据。首先,采用多项式平滑算法(SG),结合多元散射校正算法(MSC)和去趋势算法(detrend)对数据进行降噪处理;然后,分别采用连续投影算法(SPA)、竞争性自适应重加权与逐步回归混合算法(CARS_SR)筛选出特征波段;最后,提出以均方根误差(RMSE)为适应度函数,分别使用偏最小二乘判别分析模型(PLS)、粒子群算法优化SVM模型(PSO-SVM)和蝗虫算法优化SVM模型(GOA-SVM)对广陈皮的陈化年份进行鉴别,并通过采用BWO算法优化SVM模型(BWO-SVM)来得到鉴别模型的最优参数。结果发现:SG_detrend算法对广陈皮高光谱数据具有较好的降噪能力,CARS_SR算法具有较好的特征信息提取能力;与PLS、PSO-SVM和GOA-SVM相比,BWO-SVM算法可以得到更好的鉴别模型控制参数;SG_detrend-CARS_SR-BWO-SVM模型对广陈皮陈化年份的鉴别准确率达到97.59%,RMSE为0.0602R^(2)为0.9529。该工作为实现广陈皮陈化年份的快速无损鉴别提供了新方法,也为便携式鉴别仪器或在线生产设备研发提供了理论依据。

广陈皮对功能性消化不良大鼠胃肠动力的影响

目的探讨广陈皮对功能性消化不良(FD)大鼠胃肠动力的作用及其机制。方法无特定病原体(SPF)级大鼠42只,随机分为正常对照组(7只)和模型组(35只)。采用郭氏夹尾法、不规则喂养和0℃、0.9%氯化钠溶液灌胃等多因素应激干预法制造FD大鼠模型。大鼠造模成功后根据体质量和行为学得分随机分为模型对照组、多潘立酮组、新皮组、十年皮组和模拟陈化组,每组7只,各组大鼠灌胃给药7 d。观察记录大鼠的一般状态和体质量;采用旷场实验观察大鼠的自主活动能力;采用胃肠运动实验观测大鼠的胃残留率和小肠推进率;苏木精-伊红染色后观察大鼠胃窦组织病理形态;采用酶联免疫法测定血清中胃动素和5-羟色胺(5-HT)的含量;采用蛋白质印迹法测定十二指肠中5-HT4R蛋白表达。结果与模型对照组比较,各陈皮给药组一般状态明显改善,体质量和行为学得分明显提高,胃残留率显著降低,小肠推进率显著提高,血清中胃动素和5-羟色胺含量均明显升高,十二指肠5-HT4R蛋白表达明显上调。结论广陈皮可促进FD大鼠的胃肠动力,作用机制可能与上调胃动素和5-HT、5-HT4R有关。广陈皮的陈化时间对FD大鼠胃肠动力作用的影响不明显。

道地药材与广陈皮道地性研究进展

道地药材是指生长在特定的自然生态环境中,经过一系列技术培育和加工而成且公认具有优良品质和疗效的药材。此文旨在探索药材道地性的研究方法学和意义,并以广陈皮为例,总结了药材道地性的影响因素、研究方法学和意义。通过对药材道地性的研究,对广陈皮道地性进行讨论与探究,为揭示药材道地性和广陈皮道地性等相关研究进一步提供依据和参考。

广陈皮陈化过程中主要成分的变化及美拉德褐变反应的初步研究

目的 分析广陈皮在陈化过程中主要成分的定性定量变化及褐变反应类型。方法 采用LC-MS和HPLC法对陈化过程中主要成分进行定性定量分析。采用UV和HPLC法研究自然陈化和模拟陈化广陈皮中美拉德褐变反应底物、中间产物等含量变化及抗氧化活性。结果 广陈皮中共鉴定出40个黄酮类成分和2个生物碱成分及柠檬苦素。5种黄酮类化合物含量随着陈化时间延长呈增加趋势,辛弗林含量呈下降趋势。随着陈化时间的延长,氨基酸和还原糖含量呈降低趋势,5-羟甲基糠醛含量明显增加,样品液pH下降,ABTS抗氧化活性增强。模拟陈化样品随着加热时间延长,美拉德褐变反应指标变化趋势同自然陈化样品。结论 陈化过程中发生了美拉德褐变反应,可能是导致广陈皮颜色加深的机制。5-羟甲基糠醛可作为广陈皮陈化中美拉德褐变反应的指标成分。

广陈皮道地性研究进展

道地药材是指在特定自然条件下生长的疗效良好的药材,具有明显的地域特征。广陈皮是产于广东新会的道地性药材,相对其他陈皮具有更好的功效。随着医疗卫生事业的发展,人们对道地性药材提出了更多的需求以及更高的要求。对于道地药材的鉴定,传统的方法具有主观性强,准确性较差等缺点。随着时代的发展,已有诸多现代技术用于评价药材的道地性。本文对广陈皮道地性研究的进展进行归纳总结,以期为广陈皮新的生产条件的开发以及广陈皮的道地性鉴定提供参考。

不同贮藏年限广陈皮黄酮类成分的变化规律研究

目的:研究不同贮藏年限广陈皮黄酮类成分的变化规律。方法:应用HPLC法对10批不同贮藏年限广陈皮药材中的橙皮苷(1)、川陈皮素(2)、3,5,6,7,8,3′,4′-七甲氧基黄酮(3)、橘皮素(4)和5-羟基-6,7,8,3′,4′-五甲氧基黄酮(5)5种黄酮类成分的变化规律进行了定量研究。结果:10批不同贮藏年限广陈皮药材中橙皮苷的含量均在35mg/g以上,符合药典标准(≧35mg/g);5种黄酮类成分的含量随贮藏年限的延长有一定增加趋势。结论:陈皮"陈久者良"这一说法有一定的科学依据,具体原因尚待进一步确证。

薄层扫描法同时测定广陈皮中三种黄酮化合物的含量

目的:采用薄层扫描法同时测定6种不同产地广陈皮中橙皮苷、川陈皮素、橘皮素的含量。方法:使用硅胶G高效薄层板,分别以乙酸乙酯-甲醇-水(100∶17∶13)、甲苯-乙酸乙酯-甲酸-水(20∶10∶1∶1)的上层溶液为展开剂,二次展开;采用λS=265nm、λR=600nm双波长进行薄层扫描。结果:橙皮苷、川陈皮素、橘皮素分别在1.0～5.1μg、0.12～0.60μg、0.1～0.5μg范围内具有良好线性关系(r分别为0.9990、0.9991、0.9991);平均加样回收率分别为101.30%、96.03%、95.44%;RSD分别为3.81%、2.32%、1.75%。结论:本方法简便、快速、准确,可为广陈皮药材质量控制提供新的参考。

广陈皮及其近缘品种挥发油成分的比较

目的比较分析广陈皮及其近缘品种鲜果皮挥发油成分并寻找其特征成分。方法收集包括广陈皮(茶枝柑)、陈皮(红橘)和金橘等11种品种鲜果皮,水蒸气蒸馏法提取挥发油,用GC-MS技术分离鉴定挥发油的成分,对所有样品测定结果进行聚类分析。结果所测鲜果皮挥发油均以柠檬烯为主要成分,同时含萜品烯、异松油烯和芳樟醇萜烯烃类化合物。聚类分析结果与鲜果皮品种分类结果一致。结论与其他陈皮近缘品种果皮比较,广陈皮(茶枝柑)挥发油中含有特有成分2-甲氨基-苯甲酸甲酯,柠檬烯的相对含有量最低,而萜品烯相对含有量最高,可作为广东新会陈皮的鉴定依据。

高效液相色谱法同时测定广陈皮药材中的11种化学成分

采用高效液相色谱法（ HPLC）同时测定了广陈皮药材中5.羟甲基糠醛、维采宁.2、橙皮苷、橙皮素、异甜橙黄酮、甜橙黄酮、异黄芩配基甲醚、川陈皮素、3，5，6，7，8，3′，4′.七甲氧基黄酮、橘皮素及5.去甲川陈皮素11种化学成分的含量。样品经50％（ v／v）甲醇于70℃回流提取。在优化的色谱条件（ Hanbon Benatach C18色谱柱（250 mm ×4.6 mm，5μm）为分离柱，乙腈和0.2％甲酸水溶液为流动相，梯度洗脱，流速1.0 mL／min，柱温25℃，检测波长280 nm）下，提取液中的各成分分离良好，在选定的浓度范围内呈良好的线性关系（ r＞0.998），定量限（ S／N＝10）为0.0502～4.99 mg／L，检出限（ S／N＝3）为0.0125～1.25 mg／L，平均加标回收率（ n＝3）为96.4％～102.4％，相对标准偏差为0.25％～4.01％。该方法准确性高、重复性好，可用于广陈皮的质量控制。

HPLC法测定不同贮存年限广陈皮药材中主要活性成分的含量

目的：建立测定不同贮存年限（1-19年）广陈皮药材中主要活性成分含量的方法。方法：采用高效液相色谱法（HPLC）测定药材中橙皮苷含量：色谱柱为Diamonsil C18,流动相为甲醇-醋酸-水（35∶4∶61,V/V/V）,流速为1.0 ml/min,检测波长为283 nm,柱温为25℃,进样量为5μl。采用HPLC法测定药材中川陈皮素、桔皮素含量：色谱柱为Diamonsil C18,流动相为水-甲醇（梯度洗脱）,流速为1.0 ml/min,检测波长为326 nm,柱温为25℃,进样量为10μl。采用HPLC法测定药材中辛弗林含量：色谱柱为Diamonsil C18,流动相为甲醇-磷酸二氢钾溶液（取磷酸二氢钾0.6 g、十二烷基磺酸钠1.0 g、冰醋酸1 ml,用水溶解至1 000 ml）（65∶35,V/V）;流速为1.0 ml/min,检测波长为275 nm,柱温为25℃,进样量20μl。结果：橙皮苷、川陈皮素、桔皮素、辛弗林检测进样量线性范围分别为500-4 500 ng（r=0.999 8）、38.816-388.16 ng（r=0.999 6）、19.936-199.36 ng（r=0.999 5）、640-2 560 ng（r=0.999 9）;精密度、稳定性、重复性试验的RSD〈3%;加样回收率分别为96.42%-102.75%（RSD=2.54%,n=6）、97.42%-99.95%（RSD=2.46%,n=6）、99.26%-106.19%（RSD=2.31%,n=6）、97.47%-99.76%（RSD=1.95%,n=6）。结论：该方法操作简便、稳定、重复性好,可用于不同贮存年限广陈皮药材中主要活性成分含量的测定。陈皮＂陈久者良＂可能与上述4种活性成分含量变化无关,推测与其挥发油含量减少而缓和燥性有关。

基于色度分析原理的广陈皮贮藏年限判别

探讨广陈皮颜色特征与贮藏年限之间的相关性及不同贮藏年限广陈皮质量评价。通过分光测色仪测定不同贮藏年限广陈皮颜色值L~*、a~*、b~*,紫外-可见分光光度法测定总黄酮含量,高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)测定芸香柚皮苷、橙皮苷、川陈皮素、桔红素含量。运用SPSS20.0软件对颜色值与贮藏年限、有效成分含量进行相关性分析。贮藏年限与颜色值L~*、b~*存在显著相关性,相关系数分别为-0.935、-0.917,即随着贮藏年限的增加,粉末颜色明度变暗并向蓝色方向移动;贮藏年限与颜色值L~*、b~*通过模型转化后存在直线回归关系,回归方程分别为Ln(颜色值L~*)=4.240-0.089·Ln(贮藏年限)和Ln(颜色值b~*)=3.220-0.156·Ln(贮藏年限);随着贮藏年限增加,总黄酮及4种黄酮类成分呈曲线波动型变化,其变化趋势基本一致。广陈皮贮藏年限与颜色值L~*、b~*存在显著相关性,为快速判别陈皮贮藏年限提供参考;受到药材质量难以统一的影响,以黄酮类成分变化探讨陈皮"陈久者良"欠佳。

道地药材广陈皮的HPLC指纹图谱研究

目的:建立新会道地药材广陈皮的HPLC指纹图谱,并比较与不同产地不同品系来源的陈皮药材相似性,为其品质控制提供依据。方法:采用HPLC分析测定26批陈皮样品。色谱柱:Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-1%乙酸水溶液梯度洗脱;分析时间:65 min;检测波长:330 nm;流速:1.0 mL/min。结果:建立了广陈皮的指纹图谱,确定了17个共有峰,道地药材相似度大于0.97,不同品系来源药材的相似度存在较大差异。结论:该指纹图谱检测方法简便、重现性好,可作为广陈皮手药材质量控制的重要方法。

不同产地和采收期广陈皮中三种黄酮类成分的含量测定

目的:以5个不同产地广陈皮中橙皮苷、川陈皮素和橘皮素的含量测定结果为依据,综合考察不同采收时期(10～12月)广陈皮黄酮类成分的动态变化规律。方法:采用RP-HPLC法,色谱柱为Diamonsil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-甲醇(80∶20)-2%乙酸水溶液梯度洗脱,流速为1.0mL/min,检测波长为283nm和330nm,柱温为25℃。结果:不同产地广陈皮中橙皮苷、川陈皮素和橘皮素的含量随果实成熟度的提高均呈一定的下降趋势,其中川陈皮素和橘皮素含量的下降趋势尤为明显。结论:该测定方法简便快捷,其结果可为广陈皮的质量控制提供一定的依据。

基于广泛靶向代谢组学技术与高通量测序技术探究广陈皮陈化机制

采用广泛靶向代谢组学技术与高通量测序技术探究广陈皮共存微生物对次生代谢产物的影响规律,为广陈皮的陈化机制提供科学依据。运用Waters ACQUITY UPLC HSS T3 C_(18)色谱柱(1.8μm,2.1 mm×100 mm),流动相0.04%乙酸水溶液-乙腈梯度洗脱,流速0.4 mL/min,选择电喷雾离子源在正、负离子模式下进行采集检测;采用CTAB法对口腔拭子样品进行DNA提取,建库试剂盒进行文库构建,构建好的文库经Qubit和Q-PCR定量,使用HiSeq 2500 PE250进行上机测序;对代谢组检测出的差异代谢物和高通量测序比对出的差异微生物进行相关性分析。结果表明共鉴定出386种次生代谢产物,包括酚酸类79种,黄酮类143种,蒽醌类4种,木脂素与香豆素17种,鞣质3种,生物碱47种,萜类6种,其他类87种。主成分分析(PCA)与热图分析(Heatmap)结果表明贮藏1年与贮藏3年样品次生代谢物含量存在明显差异,可明显区分,共筛选出79种差异代谢物;高通量测序基因序列与微生物参考数据库进行比对可得到共58个属,贮藏1年与贮藏3年样品微生物菌落结构相似,但相对丰度与优势菌属不同。差异代谢物与差异微生物关联分析表明,青霉属、曲霉属、耐干霉菌等优势真菌可显著影响广陈皮中黄酮类成分以及有香味化合物含量。广陈皮在陈化过程中优势微生物菌落结构的改变导致药材活性成分以及香气成分含量的变化可能是其陈化机制之一。

芳香植物广陈皮和山奈中有翅桃蚜驱避物质的化学鉴定

芳香植物广陈皮和山奈的挥发物对有翅桃蚜具有较强的驱避作用,本试验采用提取、浓缩、柱层析和GC-MS等技术鉴定了其中的活性成分。生物测定结果表明,索氏提取法能够保留原始材料的驱避效果,且广陈皮和山奈的索氏提取物存在加成效应或微弱的拮抗效应。分别采用梯度混合的石油醚-乙醚混合淋洗剂对两种材料的索氏提取物进行柱层析分离,发现广陈皮仅3∶7体积比的石油醚-乙醚洗脱液有活性;山奈层析物中驱避作用最强的是石油醚-乙醚等体积混合淋洗的馏分,驱避百分率达到45.56%,另外7∶3和2∶8体积比的石油醚-乙醚淋洗物也有相对较弱的驱避活性。GC-MS分析表明,广陈皮活性馏分的主要挥发物成分为D-柠檬烯(39.07%),山奈活性馏分的主要挥发物成分为反-对甲氧基肉桂酸乙酯(70.22%)和顺-对甲氧基肉桂酸乙酯(19.55%),两类化合物对桃蚜具有较强驱避活性,且两者之间仍表现为加成效应。