一株主产庆大霉素C2a工程菌的构建

为更好生产单组分庆大霉素C2a,拟构建一株主产庆大霉素C2a的工程菌.通过序列比对分析,锁定genB2为构建该工程菌的关键基因.以绛红小单孢菌G1008基因组为模板,PCR扩增genB2的上下游序列为同源交换臂,构建同源重组质粒pZB303.通过接合转移,将质粒pZB303导入绛红小单孢菌G1008,安普抗性及PCR扩增筛选得到一株genB2框内缺失工程菌GB102.发酵并提取代谢产物,再经TLC,HPLC,MS分析.结果表明,工程菌GB102主要积累庆大霉素C2a.有望用于生产单组分庆大霉素C2a.

应用H/D交换质谱法对庆大霉素C_2/C_(2a)及小诺霉素进行快速鉴别

目的快速鉴别庆大霉素C2/C2a和小诺霉素。方法采用电喷雾质谱法结合氢-氘(H/D)交换技术对庆大霉素C2/C2a和小诺霉素进行研究。结果进行氘代反应后,庆大霉素C2/C2a和小诺霉素的m/z可分别得到+13和+12的增量。结论上述方法可以简便快速地区分出庆大霉素C2/C2a与小诺霉素这一对同分异构体,为鉴别分子内活泼氢数目不同的同分异构体提供了一种可行的方法。