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鸡硒蛋白T的硒代半胱氨酸插入序列元件、蛋白结构与功能及组织表达差异 被引量:2
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作者 葛延松 曹嫦妤 +3 位作者 王丽丽 李楠 江秀清 李金龙 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期9-15,共7页
应用生物软件分析鸡和其他11种脊椎动物硒蛋白 T ( selenoprotein T ,SelT )的硒代半胱氨酸插入序列( selenocysteine insertion sequence , SECIS)元件、SelT核苷酸和氨基酸序列的同源性,并分析鸡SelT 的结构及功能;采用实时荧光... 应用生物软件分析鸡和其他11种脊椎动物硒蛋白 T ( selenoprotein T ,SelT )的硒代半胱氨酸插入序列( selenocysteine insertion sequence , SECIS)元件、SelT核苷酸和氨基酸序列的同源性,并分析鸡SelT 的结构及功能;采用实时荧光定量PCR( fluorescent quantitative real-time PCR , fqRT-PCR)方法检测SelT基因在35日龄鸡体内30种组织中的表达谱.结果显示:脊椎动物 SelT的SECIS元件均属于Ⅱ型结构;鸡 SelT核苷酸序列与其他11种脊椎动物的同源性在48.0%~85.1%之间,而氨基酸序列与非洲爪蟾、斑马鱼的同源性低于90.0%,与其他9种动物的同源性在90.6%~94.9%之间;鸡 SelT 属于跨膜蛋白,存在信号肽,属于 RDx 家族,酶活性分类为EC 2.5.1.18,具有氧化还原功能,且存在Ca2+结合位点.SelT在鸡各组织中广泛表达,在睾丸中含量极其丰富,提示鸡SelT在雄性生殖系统中可能发挥功能. 展开更多
关键词 鸡硒蛋白T 硒代半胱氨酸插入序列元件 结构与功能 组织表达谱 进化关系
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大豆种子特异性启动子的克隆及序列分析 被引量:10
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作者 财音青格乐 李明春 +2 位作者 蔡易 陶然 邢来君 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期11-17,共7页
通过PCR技术从大豆品种吉林 4 3基因组DNA中分离到大豆β 伴球蛋白α 亚基基因启动子片段 (BCSP4 89) ,对此片段采用TAILPCR技术进一步延伸 ,获得了启动子片段BCSP6 6 6。序列分析表明 ,在启动子片段BCSP6 6 6中含有多种种子特异性启动... 通过PCR技术从大豆品种吉林 4 3基因组DNA中分离到大豆β 伴球蛋白α 亚基基因启动子片段 (BCSP4 89) ,对此片段采用TAILPCR技术进一步延伸 ,获得了启动子片段BCSP6 6 6。序列分析表明 ,在启动子片段BCSP6 6 6中含有多种种子特异性启动子所特有的序列元件 ,如A T富含序列元件、RY重复序列元件、AGCCCA序列元件、TACACAT序列元件、ACGT序列元件、E盒等。据此推测该启动子片段具有种子特异性启动子活性。以该片段构建种子特异性表达载体pBI12 1 6 6 6 ,以FloralDip方法转化拟南芥 ,转基因拟南芥中的GUS酶荧光光度分析和组织化学检测均表明 ,GUS基因在启动子片段BCSP6 6 6调控下获得了种子特异性表达。 展开更多
关键词 种子特异性启动子 序列元件 TAIL PCR
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禽源奇异变形杆菌超广谱β-内酰胺酶基因的分子特征 被引量:10
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作者 潘玉善 苑丽 +4 位作者 吴华 刘建华 刘珍珍 赵宜双 胡功政 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1463-1469,共7页
【目的】研究禽源奇异变形杆菌携带超广谱β-内胺酰酶基因的亚型和blaCTX-M基因的上下游环境。【方法】对分离、鉴定的奇异变形杆菌进行药物敏感性试验、ESBLs产酶确证试验、耐药基因检测和接合试验;利用PCR定位技术(PCR mapping)分析bl... 【目的】研究禽源奇异变形杆菌携带超广谱β-内胺酰酶基因的亚型和blaCTX-M基因的上下游环境。【方法】对分离、鉴定的奇异变形杆菌进行药物敏感性试验、ESBLs产酶确证试验、耐药基因检测和接合试验;利用PCR定位技术(PCR mapping)分析blaCTX-M的基因环境。【结果】ESBLs确证试验表明,21株禽源奇异变形杆菌有10株是阳性表型。PCR扩增和测序结果表明,最常见的ESBL基因是blaCTX-M-14(n=6),blaOXA-1(n=6),其次是blaCTX-M-65(n=4),同时也检测到了blaOXA-10(n=1),没有检测到blaSHV。序列分析表明,禽源奇异变形杆菌携带blaCTX-M的上游普遍存在ISEcp1B,下游均为IS903D。【结论】首次在禽源奇异变形杆菌中检测到了blaCTX-M-65,CTX-M型超广谱β-内酰胺酶基因在禽源奇异变形杆菌中已不在少见。 展开更多
关键词 奇异变形杆菌 ESBLS blaCTX-M 插入序列元件 家禽
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积分棒在步进扫描投影光刻系统中的应用 被引量:9
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作者 郭立萍 黄惠杰 王向朝 《光子学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第7期981-985,共5页
从几何光学角度讨论了积分棒的匀光原理,介绍了积分棒在步进扫描投影光刻系统中的应用·分析了积分棒入射光束的数值孔径对刀口狭缝面上光强分布的影响,得到了积分棒尺寸与刀口狭缝面上照明视场的关系,为步进扫描投影光刻系统中积... 从几何光学角度讨论了积分棒的匀光原理,介绍了积分棒在步进扫描投影光刻系统中的应用·分析了积分棒入射光束的数值孔径对刀口狭缝面上光强分布的影响,得到了积分棒尺寸与刀口狭缝面上照明视场的关系,为步进扫描投影光刻系统中积分棒的设计提供了依据· 展开更多
关键词 光刻 照明均匀性 序列光学元件 积分棒
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液相色谱-高分辨质谱结合蛋白质组学技术分析曲妥珠单抗耐药胃癌细胞的转录因子 被引量:5
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作者 常晋霞 汪宜 +1 位作者 张帆 刘文虎 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1035-1044,共10页
采用基于液相色谱-高分辨质谱的转录因子结合序列串联多拷贝双联DNA结合元件(Concatenated tandem array of transcription factor response elements,catTFRE)Pull down蛋白质组学技术,研究了曲妥珠单抗耐药胃癌细胞的转录因子及其调... 采用基于液相色谱-高分辨质谱的转录因子结合序列串联多拷贝双联DNA结合元件(Concatenated tandem array of transcription factor response elements,catTFRE)Pull down蛋白质组学技术,研究了曲妥珠单抗耐药胃癌细胞的转录因子及其调控作用。以合成的串联转录因子结合序列DNA片段为亲和试剂,用生物素标记,作为"DNA诱饵",通过Pull down富集后,采用液相色谱-高分辨质谱检测捕获的转录因子,基于强度定量法(Intensity based absolute quantification,iBAQ)定量,筛选出与DNA结合活性显著变化的转录因子。利用WebGestalt(2017)数据库对激活转录因子调控的信号通路、家族分类、调控网络及转录因子-靶基因(TFs-targets)进行分析。结果表明,359个转录因子被定量检测,与亲本细胞相比,61个转录因子在曲妥珠单抗耐药胃癌细胞中与DNA结合活性显著变化,其中结合活性增强48个,活性降低13个。激活转录因子属于bZIP、bHLH、homebox、HMG box、Zine finger等家族。KEGG通路富集显示,癌症、MAPK、Wnt、TGF-β、凋亡等多条通路在耐药细胞中显著改变。TFs-targets分析表明,TCF7L2、TCF7、FOXC1、JUN、CYC、FOS、ELK4、NFκB2、DDIT3和ATF2在上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transformation,EMT)、Wnt、MAPK信号通路促使胃癌曲妥珠单抗耐药过程中发挥重要调控作用,提示靶向这些转录因子所调控的信号通路可能是逆转胃癌曲妥珠单抗耐药的重要途径。 展开更多
关键词 曲妥珠单抗 耐药性 转录因子结合序列串联多拷贝双联DNA结合元件 Pulldown 蛋白质组学
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Time series ground subsidence inversion in mining area based on CRInSAR and PSInSAR integration 被引量:5
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作者 邢学敏 朱建军 +1 位作者 王永哲 杨亚夫 《Journal of Central South University》 SCIE EI CAS 2013年第9期2498-2509,共12页
The subsidence of the mining area was monitored by analyzing the phase of permanent scatters (PS) which maintained high coherence in magnitude of SAR images.A hew method of spatial unwrapping was presented which use... The subsidence of the mining area was monitored by analyzing the phase of permanent scatters (PS) which maintained high coherence in magnitude of SAR images.A hew method of spatial unwrapping was presented which used the subsidence rates calculated on comer reflector (CR) points as constraints for PS network to perform the spatial unwrapping using the parametric adjustment method.The algorithm achieved the integration of CR data and PSInSAR algorithm.The colliery dense distributed area around Baisha reservoir was chosen as the study area in the experiment.The time series of subsidence from February in 2007 to February in 2010 is successfully inversed by using the periodic function to simulate the linear and nonlinear components of the deformation.The simulation results show that the accuracy can be ± 2.1 mm with the leveling data being used as the external validation data. 展开更多
关键词 permanent scatters comer reflector (CR) constraint adjustment mining subsidence nonlinear deformation
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一个硫化叶菌病毒启动子的分离与鉴定
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作者 何强 杨昭杰 +3 位作者 季秀玲 魏云林 林连兵 张琦 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期399-404,共6页
几乎所有古菌病毒基因组中无RNA聚合酶(RNA polymerase,RNAP)等组成基本转录装置的同源蛋白编码序列,而且启动子活性对病毒感染过程中病毒基因的转录上可能具有重要的影响.为进一步揭示古菌病毒基因启动子的序列结构特点和活性之间的关... 几乎所有古菌病毒基因组中无RNA聚合酶(RNA polymerase,RNAP)等组成基本转录装置的同源蛋白编码序列,而且启动子活性对病毒感染过程中病毒基因的转录上可能具有重要的影响.为进一步揭示古菌病毒基因启动子的序列结构特点和活性之间的关系,首先基于硫化叶菌质粒pSeSD,将β-半乳糖苷酶编码基因lacS克隆到阿拉伯糖启动子araS下游多克隆位点,构建重组表达载体pSeSD-lacS.将pSeSD-lacS转化冰岛硫化叶菌(Sulfolobus islandicus)E233S菌株后的功能分析结果表明,lacS基因成功表达.在此基础上,利用硫化叶菌病毒STSV2衣壳蛋白编码基因ORF37上游500bp的潜在启动子片段P37替换pSeSD-lacS中的araS启动子,构建出新的重组表达质粒pSeSD-P37-lacS,进一步将pSeSD-P37-lacS转化E233S菌株进行启动子活性分析.β-半乳糖苷酶酶活结果显示,诱导后araS启动子酶活为14 345.7±422.3 mU,P37酶活为13 723.1±370.9 mU,表明P37片段具有启动子功能,而且活性与araS启动子相当.序列分析也显示,P37具有与硫化叶菌基因启动子类似的基础序列元件initiator、TATA-box及BRE等.本研究表明pSeSD-lacS可作为一个硫化叶菌病毒基因启动子筛选载体,而且高活性的基因启动子可能在STSV2病毒生命过程具有重要的作用.(图4表1参27) 展开更多
关键词 STSV2病毒 启动子筛选质粒 启动子P37 启动子活性 核心启动序列元件序列
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粗糙脉孢菌snRNA基因的克隆及其表达调控研究
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作者 万宇峰 郑桂娜 +4 位作者 张琳 沈寒婕 陈现云 王东妮 郭金虎 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期98-107,共10页
Pre‐m RNA(precursor m RNA)的剪接是真核基因表达中的重要一环,由剪接体复合物(spliceosome)催化完成。小核RNA(small nuclear RNAs,sn RNAs)是剪接体的重要结构和功能组分。本工作首次鉴定了粗糙脉孢菌的U1、U2、U4、U5和U6等sn RNA... Pre‐m RNA(precursor m RNA)的剪接是真核基因表达中的重要一环,由剪接体复合物(spliceosome)催化完成。小核RNA(small nuclear RNAs,sn RNAs)是剪接体的重要结构和功能组分。本工作首次鉴定了粗糙脉孢菌的U1、U2、U4、U5和U6等sn RNA基因,这些基因除U5为单一拷贝外,其余为多拷贝基因且表达量存在差异。对各基因的近端序列元件(proximal sequence elements,PSEs)的分析显示在大部分基因都存在一段回文的保守序列GTGCAC,荧光素酶报告基因实验证实该序列具有调控部分sn RNA基因转录的功能。我们还通过温度梯度实验检测了stk‐16第三内含子的剪接情况变化,结果提示可变剪接对调节生物可能对不同温度环境的适应具有重要作用。 展开更多
关键词 粗糙脉孢菌 小核RNA 可变剪接 近端序列元件 stk‐16基因
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