常染色体显性钙化不全型釉质发育不全相关基因序列相似性83蛋白质家族成员H及其突变的研究进展

常染色体显性钙化不全型釉质发育不全(ADHCAI)是一种影响釉质结构的遗传性疾病,基本病变为釉质基质形成正常但无明显的矿化。该疾病具有明显的临床和遗传异质性,临床表现为患牙的釉质厚度正常而硬度降低,影响功能和美观。序列相似性83蛋白质家族成员H(FAM83H)在人体的多种组织和细胞中普遍表达,包括成釉细胞、成牙本质细胞和牙槽骨。该基因编码的细胞内蛋白质被认为与角蛋白细胞骨架和桥粒相关,在细胞内分子运输、细胞骨架网络调节和釉质形成中发挥作用。FAM83H基因中的许多突变已被证实可在不同人群中导致ADHCAI。近年来一些研究从囊泡运输、细胞骨架等多角度入手,探究FAM83H突变与AD‐HCAI发生发展之间的关系,本文就ADHCAI相关基因FAM83H及其突变的研究进展进行综述。

二硫苏糖醇抑制序列相似性家族134成员B(FAM134B)介导的内质网自噬促进大鼠肝细胞凋亡

目的探讨序列相似性家族134成员B(FAM134B)介导的内质网自噬在内质网应激(ERS)诱导的肝细胞凋亡中的作用及分子机制。方法采用(0、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0)mmol/L的二硫苏糖醇(DTT)处理BRL-3A大鼠肝细胞48 h,实时无标记细胞动态分析(RTCA)检测肝细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测ERS及内质网自噬相关蛋白、内质网-线粒体接触位点相关蛋白及线粒体凋亡途经相关蛋白表达的影响。内质网及溶酶体的荧光探针检测DTT处理细胞后二者的荧光共定位;线粒体钙离子荧光探针罗丹明2乙酰氧基甲酯(Rhod-2 AM)检测DTT对线粒体中钙离子水平的影响。结果DTT可显著抑制肝细胞的增殖并促进细胞凋亡。DTT处理肝细胞后ERS及内质网自噬相关蛋白、内质网-线粒体接触位点相关蛋白及线粒体凋亡途经相关蛋白的表达均显著上调。DTT处理细胞后内质网和溶酶体的荧光共定位显著减弱,同时,线粒体内钙离子荧光强度明显增强。结论DTT通过抑制FAM134B介导的内质网自噬,进而增加线粒体内Ca^(2+)的水平,促进肝细胞凋亡。

序列相似性家族107成员A抑制前列腺癌进展的实验研究

目的 探讨序列相似性家族107成员A(FAM107A)调控缺氧诱导因子3A(H1F3A)对前列腺癌(PCa)迁移、侵袭、凋亡的影响.方法 通过生物信息学技术筛选目的基因并进行分析.体外培养人PCa细胞PC-3,采用反转录病毒稳定转染,采用蛋白质印迹法(Western blot)技术验证HIF3A及DNA甲基转移酶1(DNMT1)的表达量;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡;焦磷酸测序检测启动子甲基化程度;细胞功能试验验证对PCa迁移和侵袭的影响.两组间差异表达采用独立样本t检验方法比较.结果 生信分析提示FAM107A基因在PCa组织中表达低于正常前列腺组织(P<0.01),Gleason评分(GS)越高,FAM107A表达量越低(P<0.01).划痕实验、Transwell侵袭实验提示过表达 FAM107A会抑制 PCa 细胞的迁移(C4-2:0.337±8.930 比 29.334±2.651,t=-7.260,P<0.05;PC-3:18.672±10.494 比 52.043±3.512,t=-6.024,P<0.05)、侵袭(DU145:117.703±12.845 比 242.303±21.401,t=10.273,P<0.05;PC-3:51.674±9.502 比 139.303±13.394,t=16.025,P<0.05),促进凋亡(17.180±0.700 比 0.527±0.121,t=40.600,P<0.05).细胞周期实验表明oe-FAM107A-ENZ组细胞G1期比例高于对照组(80.410±0.786比35.583±0.714,t=73.130,P<0.05),S 期比例低于对照组(11.233±0.374 比 38.747±1.809,t=25.790,P<0.05),细胞分裂被阻滞在S期.蛋白免疫印迹实验证明过表达FAM107A组的DNMT1表达量低于对照组(0.277±0.032 比 0.900±0.026,t=25.93,P<0.05),HIF3A 表达量高于对照组(0.657±0.040 比0.523±0.043,t=4.041,P<0.05).sh-FAM107A-5-aza 组的 HIF3A 的表达量明显恢复(0.550±0.020比0.427±0.067,t=3.073,P<0.05).蛋白免疫印迹实验证明过表达FAM107A时E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达量高于对照组(0.773±0.095 比 0.307±0.046,t=7.683,P<0.05),N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达量低于对照组(0.380±0.060 比 0.733±0.045,t=8.154,P<0.05),波形蛋白(Vimentin)表达量低于对照组(0.347±0.107 比 0.700±0.040,t=5.361,P<0.05).结论 FAM107A高表达可抑制HIF3A启动子甲基化促进其表达,进而抑制PCa的迁移、侵袭,是PCa进展的生物标志物.

序列相似性家族134成员B介导的内质网自噬对内毒素/脂多糖诱导的小鼠树突状细胞凋亡的影响

目的探讨序列相似性家族134成员B(FAM134B)介导的内质网自噬对内毒素/脂多糖(LPS)诱导的小鼠树突状细胞(DC)凋亡的影响,为改善创面感染等引起的脓毒症免疫抑制提供依据。方法采用实验研究方法。取第3~10代对数生长期的小鼠DC系DC2.4进行实验。将DC分为LPS刺激0 h(不刺激)组、LPS刺激6 h组、LPS刺激12 h组、LPS刺激24 h组和LPS刺激72 h组,采用1μg/mL LPS(浓度下同)培养相应时间后,采用蛋白质印迹法检测FAM134B、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)以及转运蛋白SEC61B蛋白表达,并计算LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值(样本数为3)。将DC分为进行相应处理的磷酸盐缓冲液(PBS)组与LPS组,培养24 h,采用免疫荧光法检测FAM134B表达情况及其分别与溶酶体探针、LC3B共定位情况,通过透射电子显微镜观察细胞内自噬溶酶体数量。将DC分为转染含FAM134B基因小干扰RNA序列的慢病毒的敲减FAM134B组与转染空载慢病毒的空载体组,转染后72 h,于倒置荧光相差显微镜下观察细胞荧光表达情况,另将仅常规培养的DC设为空白对照组并于相应时间点行相同观察。将DC分为单纯PBS组、单纯LPS组,将成功转染含FAM134B基因小干扰RNA序列的慢病毒的DC分为敲减FAM134B+PBS组、敲减FAM134B+LPS组,将成功转染空载慢病毒的DC分为空载体+PBS组、空载体+LPS组,给予相应刺激并培养24 h,采用蛋白质印迹法检测FAM134B蛋白表达(样本数为3),通过流式细胞术检测细胞凋亡率(样本数为3),行Hoechst染色观测细胞凋亡情况并计算凋亡率(样本数为5),采用蛋白质印迹法检测剪切型胱天蛋白酶3(caspase-3)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达并计算Bax/Bcl-2比值(样本数为5)。对数据行单因素方差分析、LSD检验、析因设计方差分析。结果与LPS刺激0 h组相比,LPS刺激12 h组和LPS刺激24 h组细胞中FAM134B蛋白表达均明显升高(P<0.05),LPS刺激6 h组、LPS刺激12 h组、LPS刺激24 h组和LPS刺激72 h组细胞中SEC61B蛋白表达均明显降低(P<0.05),LPS刺激24 h组和LPS刺激72 h组细胞中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值均明显升高(P<0.05),其中LPS刺激24 h组细胞中3个蛋白的变化最显著,将24 h作为后续LPS刺激时长。培养24 h,与PBS组相比,LPS组细胞中FAM134B的表达及其与LC3B及溶酶体探针的共定位均显著增强,自噬溶酶体数量明显增多。空载体组与敲减FAM134B组细胞转染后72 h均表现出高强度荧光,而空白对照组细胞在相应时间点无荧光表现。培养24 h,敲减FAM134B+PBS组细胞中FAM134B蛋白表达较单纯PBS组和空载体+PBS组明显降低(P值均<0.05),敲减FAM134B+LPS组细胞中FAM134B蛋白表达较单纯LPS组和空载体+LPS组显著降低(P值均<0.05),单纯LPS组细胞中FAM134B蛋白表达较单纯PBS组明显升高(P<0.05),空载体+LPS组细胞中FAM134B蛋白表达较空载体+PBS组明显升高(P<0.05)。培养24 h,流式细胞术检测显示,单纯PBS组、单纯LPS组、空载体+PBS组、空载体+LPS组、敲减FAM134B+PBS组与敲减FAM134B+LPS组细胞凋亡率分别为(13.3±0.8)%、(32.6±4.3)%、(17.0±1.5)%、(51.7±3.3)%、(52.4±3.1)%与(62.3±2.6)%。培养24 h,与单纯LPS组和空载体+LPS组相比,敲减FAM134B+LPS组经流式细胞术与Hoechst染色检测的细胞凋亡率以及细胞中剪切型caspase-3蛋白表达、Bax/Bcl-2比值均明显升高(P<0.05);与对应的PBS处理组即单纯PBS组、空载体+PBS组、敲减FAM134B+PBS组相比,单纯LPS组、空载体+LPS组、敲减FAM134B+LPS组经流式细胞术与Hoechst染色检测的细胞凋亡率以及细胞中剪切型caspase-3蛋白表达、Bax/Bcl-2比值均明显升高(P<0.05)。结论小鼠DC中FAM134B介导的内质网自噬在LPS刺激下活化增强并于24 h达活化高峰,且活化的内质网自噬对细胞凋亡具有显著抑制效应。

lncRNA FAM83H-AS1对结直肠癌细胞增殖和侵袭迁移的影响

目的探讨长链非编码RNA序列相似性家族83成员H反义RNA 1(lncRNA FAM83H-AS1)在结直肠癌组织和细胞中的表达水平及其对结直肠癌细胞增殖和侵袭迁移的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测lncRNA FAM83H-AS1在结直肠癌组织、细胞和血浆中的表达水平,并分析lncRNA FAM83H-AS1表达水平与结直肠癌患者临床特征的关系。构建具有干扰lncRNA FAM83H-AS1表达水平的SW620细胞模型。采用CCK8法和Transwell法分别分析lncRNA FAM83H-AS1对细胞增殖、细胞迁移和侵袭能力的影响。采用qPCR和免疫印迹法检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达水平。结果与正常对照组相比,lncRNA FAM83H-AS1在结直肠癌组织和血浆中的表达显著上调(P<0.05),且在SW620的表达水平高于正常结肠黏膜细胞及其他结直肠癌细胞系,差异有统计学意义(P<0.05);lncRNA FAM83H-AS1的表达水平与远处转移(P=0.019)和TNM分期(P=0.044)有关,但与性别、年龄、肿瘤位置和浸润深度无关(P>0.05)。干扰lncRNA FAM83H-AS1表达水平对结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力有明显的抑制作用(P<0.05)。sh-FAM83H-AS1转染细胞中MMP-2和MMP-9的mRNA和蛋白表达水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论lncRNA FAM83H-AS1表达水平增加可能与结直肠癌的发生发展有关,提示lncRNA FAM83H-AS1可能是结直肠癌诊断和治疗的潜在生物标志物。

非小细胞肺癌患者血清LncRNA FAM138B、miR-105-5p表达与病理特征的关系

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清长链非编码RNA序列相似性家族138成员B(LncRNA FAM138B)、微小RNA-105-5p(miR-105-5p)表达与病理特征的预后的关系。方法选取2018年1月至2019年12月收治的110例NSCLC患者为NSCLC组,另选取同期60例体检健康者为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测血清LncRNA FAM138B、miR-105-5p表达。分析血清LncRNA FAM138B、miR-105-5p表达与NSCLC患者病理特征的关系。StarBase数据库预测LncRNA FAM138B与miR-105-5p的关系。采用Pearson相关性分析NSCLC患者血清LncRNA FAM138B与miR-105-5p表达的相关性,多因素Cox回归分析NSCLC患者预后影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清LncRNA FAM138B、miR-105-5p表达对NSCLC患者预后的预测价值。结果与对照组比较,NSCLC组血清LncRNA FAM138B表达降低,miR-105-5p表达升高(P<0.05)。经StarBase数据库预测,LncRNA FAM138B与miR-105-5p存在互补序列。Pearson相关性分析显示,NSCLC患者血清LncRNA FAM138B与miR-105-5p表达呈负相关(r=-0.770,P<0.001)。不同分化程度、TNM分期、淋巴结转移NSCLC患者LncRNA FAM138B、miR-105-5p表达比较,差异有统计学意义(P<0.05)。110例NSCLC患者3年总生存率为56.36%(62/110)。K-M生存曲线分析显示,LncRNA FAM138B高表达组总生存率高于低表达组,miR-105-5p高表达组总生存率高于低表达组(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,低分化、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移和miR-105-5p≥1.494为NSCLC患者死亡的独立危险因素,LncRNA FAM138B≥0.871为独立保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清LncRNA FAM138B、miR-105-5p表达单独与联合预测NSCLC患者预后的曲线下面积分别为0.783、0.779、0.905,二项联合预测的曲线下面积最大(P<0.05)。结论NSCLC患者血清LncRNA FAM138B低表达,miR-105-5p高表达,与分化程度、TNM分期、淋巴结转移和预后有关,可能成为NSCLC患者预后的辅助预测指标。

FAM83A在恶性肿瘤中的作用研究进展

序列相似性为83的家族成员A(FAM83A)在多种恶性肿瘤中均有表达,参与肿瘤的发生、发展和转移等过程,与临床预后密切相关,是一种潜在的肿瘤特异性抗原。本文对FAM83A的结构特点、在恶性肿瘤发生发展中的作用以及临床应用前景进行综述。

子宫动脉超声血流参数、血清LncRNA FAM99A、CCL21水平与妊娠期高血压疾病患者病情程度及预后的相关性分析

目的:探讨妊娠期高血压疾病(hypertensive disorders of pregnancy,HDP)患者子宫动脉超声血流参数、血清长链非编码RNA家族成员A序列相似性99(LncRNA FAM99A)、CC趋化因子配体21(CCL21)水平变化,并分析其与病情程度相关性及其对预后的评估价值。方法:回顾性选取2021年1月至2023年12月于开封市第三人民医院诊治的126例HDP患者作为研究组,另选取健康孕产妇42例作为对照组。比较两组不同病情程度者子宫动脉超声血流参数[子宫动脉收缩期/舒张期血流最大速度(systolic/diastolic,S/D)、子宫动脉阻力指数(resistance index,RI)、子宫动脉搏动指数(pulsation index,PI)]、血清LncRNA FAM99A、CCL21水平。分析子宫动脉超声血流参数、血清LncRNA FAM99A、CCL21与病情程度相关性。依据预后情况分为预后不良亚组27例、预后良好亚组99例,比较其子宫动脉超声血流参数、血清LncRNA FAM99A、CCL21水平。分析预后不良的影响因素。评价子宫动脉超声血流参数、血清LncRNA FAM99A、CCL21对预后不良的评估价值。结果:研究组S/D、RI、PI及血清CCL21水平高于对照组,血清LncRNA FAM99A水平低于对照组(P<0.05);S/D、RI、PI、CCL21与病情程度呈正相关(r=0.526、0.418、0.509、0.624,P<0.05),LncRNA FAM99A与病情程度呈负相关(r=-0.637,P<0.05);预后不良亚组S/D、RI、PI及血清CCL21水平高于预后良好亚组,血清LncRNA FAM99A水平低于预后良好亚组(P<0.05);S/D、RI、PI、CCL21为预后不良的危险因素,LncRNA FAM99A为预后不良的保护因素(P<0.05);S/D、RI、PI、LncRNA FAM99A、CCL21联合评估预后的AUC大于单项指标评估(P<0.05)。结论:HDP患者S/D、RI、PI及血清CCL21水平升高,血清LncRNA FAM99A水平降低,且与病情程度及预后密切相关,联合检测其水平对预后具有一定评估价值。

LncRNA FAM83H-AS1调控miR-136-5p/HOXC10轴对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)序列相似性家族83成员H反义RNA 1(lncRNA FAM83H-AS1)调控微小RNA-136-5p(miR-136-5p)/同源异型盒基因10(HOX10)轴对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养人胶质瘤细胞U87,对U87细胞转染质粒,并将细胞分为对照组、si-NC组、si-FAM83H-AS1组、miR-NC组、miR-136-5p mimics组、si-FAM83H-AS+NC inhibitor组、si-FAM83H-AS+miR-136-5p inhibitor组、miR-136-5p mimics+HOXC10 NC组、miR-136-5p mimics+HOXC10组。检测胶质瘤组织与细胞U87中FAM83H-AS1、miR-136-5p、HOXC10的表达。细胞计数盒8(CCK-8)法检测U87细胞增殖;流式细胞仪检测U87细胞凋亡;蛋白免疫印迹(WB)法检测U87细胞中HOXC10、Cyclin D1、Bcl-2、Bax蛋白的表达;双荧光素酶报告系统分析miR-136-5p与FAM83H-AS1、HOXC10的靶向关系。结果胶质瘤组织中FAM83H-AS1表达水平显著升高,miR-136-5p表达水平降低(P<0.05);沉默FAM83H-AS1表达或过表达miR-136-5p,U87细胞凋亡率、Bax蛋白表达显著升高,细胞存活率、HOXC10 mRNA、Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05);双荧光素酶报告基因显示,miR-136-5p与FAM83H-AS1、HOXC10均有靶向关系;抑制miR-136-5p表达可逆转沉默FAM83H-AS1表达对U87细胞增殖的抑制作用,HOXC10过表达可逆转过表达miR-136-5p对U87细胞增殖的抑制作用。结论FAM83H-AS1通过调控miR-136-5p/HOXC10轴促进胶质瘤细胞增殖,抑制细胞凋亡。

妊娠期高血压患者血清lncRNA FAM99A与不良妊娠结局

目的:探究长链非编码RNA家族成员A序列相似性99(lncRNA FAM99A)在妊娠期高血压(HDCP)患者血清中的表达及其与妊娠结局的相关性。方法:收集2019年9月-2021年9月本院接诊的HDCP患者120例临床资料,其中妊娠期高血压组40例、轻度子痫前期组29例、重度子痫前期组51例,正常产前检查孕妇120例为对照组,收集基线资料,荧光定量PCR法检测血清lncRNA FAM99A水平;Spearman相关分析法分析lncRNA FAM99A表达与妊娠结局的相关性,根据HDCP患者妊娠结局分为妊娠结局不良组(33例)和妊娠结局良好组(87例),绘制受术者工作特征曲线评价lncRNA FAM99A水平对HDCP孕妇不良妊娠结局的预测价值。结果:随着HDCP病情加重lncRNA FAM99A表达降低,有指征的剖宫产、产后出血、早产或过期产、新生儿窒息发生率HDCP组高于对照组(均P<0.05);HDCP患者妊娠结局不良组血清lncRNA FAM99A(0.34±0.09)低于妊娠结局良好组(0.77±0.20)(P<0.05);血清lncRNA FAM99A预测HDCP患者不良妊娠结局的曲线下面积为0.797,截断值0.61,灵敏度84.9%、特异性70.1%。结论:HDCP患者血清lncRNA FAM99A表达下调,下调的lncRNA FAM99A与不良妊娠结局有关。

宫颈脱落细胞中FAM19A4/miR124-2甲基化检测对宫颈癌筛查的指导意义

目的探讨宫颈脱落细胞中序列相似性家族19成员(FAM19A4)及微小RNA(miR)124-2甲基化检测在宫颈癌筛查分流管理中的应用价值。方法选取214例宫颈病变患者作为研究对象,符合以下条件之一:人乳头瘤病毒(HPV)阴性且细胞学显示为非典型鳞状细胞(ASC-US)或低级别鳞状上皮内病变(LSIL)、HPV16或18型感染、持续高危型HPV感染。所有患者均行宫颈脱落细胞甲基化FAM19A4/miR124-2检测和病理检查,比较不同病理类型患者宫颈脱落细胞中甲基化FAM19A4/miR124-2表达情况,并绘制ROC曲线,检验甲基化FAM19A4/miR124-2对宫颈病变较小异常者高级别鳞状上皮内病变(HSIL)或以上病变的筛查效能。结果宫颈脱落细胞中甲基化FAM19A4/miR124-2阳性患者出现HSIL或以上病变的概率增加,绘制ROC曲线,以LSIL为参考,宫颈病变较小异常者宫颈脱落细胞中甲基化FAM19A4/miR124-2筛查HSIL、宫颈癌的曲线下面积为0.813(95%CI:0.713,0.913,P<0.05)。结论宫颈脱落细胞中甲基化FAM19A4/miR124-2检测在发现宫颈≥HSIL病变中具有较高临床价值,对宫颈病变较小异常患者有分流价值。

长链非编码RNA FAM182B对肝癌细胞增殖、迁移侵袭和TGF-β/Smad通路的影响

目的 探讨长链非编码RNA序列相似性家族182成员B(FAM182B)在肝细胞癌(HCC)细胞增殖、迁移和侵袭中的生物学作用。方法 Starbase网络平台分析TCGA数据库中FAM182B在HCC组织中的水平及其与患者预后的关系。实时荧光定量PCR(qPCR)用于检测FAM182B在正常肝细胞LO2和HCC细胞(BEL-7404、MHCC97H、HCCLM3、SMMC7721)的相对表达量。向SMMC7721细胞转染靶向FAM182B的小干扰RNA序列si-FAM182B(FAM182B干扰组)或无义序列si-NC(阴性对照组),以未转染的SMMC7721细胞为空白对照组。MTT法、划痕实验和Transwell小室实验评估下调FAM182B表达对SMMC7721细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。Western blotting和qPCR检测转化生长因子(TGF)-β信号通路关键分子TGF-β1、SMAD家族成员3(Smad3)和骨形态发生蛋白2(BMP2)的表达情况。结果 HCC组织的FAM182B水平高于正常组织(P<0.05),且FAM182B高表达者的总生存期短于低表达者(P<0.05)。HCC细胞的FAM182B相对表达量高于LO2细胞(P<0.05)。与空白对照组和阴性对照组相比,FAM182B干扰组SMMC7721细胞的增殖、迁移和侵袭能力减弱,且TGF-β1和BMP2的mRNA和蛋白水平以及Smad3磷酸化水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。空白对照组和阴性对照组上述指标的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 FAM182B在HCC细胞中高表达,下调FAM182B表达抑制HCC细胞的增殖、迁移和侵袭并抑制TGF-β/Smad通路激活。研究结果部分阐明了FAM182B在肝癌发生中的作用,为肝癌的治疗提供了新的思路和策略。

人脑胶质瘤FAM46A表达与病人预后的关系

目的探讨人脑胶质瘤序列相似性家族46成员A(FAM46A)的表达与病人预后的关系。方法收集2016年1月~2019年6月手术切除的人脑胶质瘤标本95例,取同期颅脑损伤减压术切除的非肿瘤脑组织42例为对照组。免疫组化染色检测FAM46A表达情况。胶质瘤病人术后随访2年。结果胶质瘤组织FAM46A阳性表达率高于对照组(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示FAM46A阳性表达是胶质瘤病人生存预后不良的独立危险因素(P<0.05)。生存曲线分析显示,FAM46A阳性表达组2年累积生存率明显低于FAM46A阴性表达组(P<0.05)。结论脑胶质瘤FAM46A呈阳性表达,与病人预后不良有关。

膜联蛋白A3在肿瘤方面的研究进展

膜联蛋白（annexin）是一个Ca2＋依赖的磷脂结合蛋白家族,脊椎（哺乳）动物的膜联蛋白属于A类,自上世纪70年代末发现第一个膜联蛋白至今,在脊椎（哺乳）类生物中已发现了12个家族成员。它们在结构上具有相似性,其高度保守的C末端,由70~80个氨基酸构成4个重复序列;同时,

FAM83A对胰腺癌细胞PANC-1干细胞样表型和放射敏感性的影响

目的 探讨FAM83A对胰腺癌细胞PANC-1干细胞样表型和放射敏感性的影响，旨在为胰腺癌靶向治疗提供新思路。方法 慢病毒感染构建稳定沉默FAM83A的PANC-1细胞株，qPCR和Western blot进行验证；流式细胞仪检测干细胞标记物CD133阳性的细胞数；肿瘤细胞成球实验检测PANC-1细胞成球能力；MTT检测吉西他滨对PANC-1稳转株细胞活力的影响；平板克隆形成实验检测X射线照射对PANC-1稳转株细胞增殖的影响；流式细胞术检测吉西他滨和X射线照射对PANC-1稳转株细胞凋亡的影响；Western blot检测PANC-1稳转株细胞中Wnt/β-catenin信号通路表达变化。结果 沉默FAM83A后PANC-1细胞中FAM83A蛋白表达（0.83±0.08）和mRNA表达（0.29±0.03）较阴性对照组FAM83A蛋白表达（1.95±0.19）和mRNA表达（0.98±0.09）显著降低（t=9.410、12.600，P〈0.05）；沉默FAM83A后CD133阳性PANC-1细胞率（8.97±0.62）%较阴性对照组（21.60±2.60）%显著降低（t=8.184，P〈0.05），且细胞成球数（8±1）较阴性对照组（25±3）亦显著降低（t=9.311，P〈0.05），PANC-1细胞干细胞样表型显著被抑制；沉默FAM83A联合50 μmol/L吉西他滨处理PANC-1细胞72 h后细胞活力（32.33±3.05）%较吉西他滨处理组（63.06±5.98）%显著降低，细胞凋亡率（76.52±8.34）%较吉西他滨处理组（40.88±4.91）%显著增加，差异有统计学意义（t=6.378、7.929，P〈0.05）；沉默FAM83A联合X射线照射后，PANC-1细胞活力（43.25±4.21）%较X射线照射组（78.13±7.98）%明显降低，细胞凋亡率（44.56±5.32）%较X射线照射组（15.15±1.95）%明显增加，差异有统计学意义（t=6.694、8.990，P〈0.05）；沉默FAM83A后细胞中Wnt/β-catenin信号通路蛋白Active-β-catenin表达降低，p-β-catenin表达增加，且细胞核中β-catenin表达也降低，差异有统计学意义（t=10.290、8.521、8.969，P〈0.05），而Total β-catenin无明显变化，细胞中Wnt/β-catenin信号通路活性明显被抑制。结论 沉默FAM83A可能通过Wnt/β-catenin信号抑制胰腺癌细胞干细胞样表型，增强细胞对化疗药物吉西他滨及放射敏感性，FAM83A将可为胰腺癌临床治疗提供新靶点。

胰腺癌预后和治疗靶点的生物标志物筛查与验证

目的寻找一个潜在的能预测胰腺癌(PAAD)患者生存期和作为治疗靶标的生物标志物。方法利用在线数据库GEPIA2和Kaplan-Meier plotter分析序列相似性家族111成员B(FAM111B)基因表达与预后的关系。利用R语言分别下载高通量基因表达(GEO)和癌症基因组图谱(TCGA)数据库中PAAD数据集,根据FAM111B表达量中位值将数据集分为高表达组和低表达组,进一步验证FAM111B表达和预后的关系,并分析FAM111B表达与肿瘤病理分级和分期的关系。基因集富集分析(GSEA)FAM111B富集的信号通路。RT-qPCR、CCK-8实验和流式细胞术实验验证与对照si-NC组相比,si-FAM111B组中FAM111B基因沉默后对PAAD细胞的增殖能力和细胞周期的影响。结果TCGA数据库显示,与正常的癌旁组织相比,FAM111B在PAAD组织中高表达,差异有统计学意义(P<0.05)。进一步分析GEO数据库中的GSE62452和GSE183795数据集,显示FAM111B在肿瘤中表达显著高于癌旁组织,差异均有统计学意义(t=4.617、6.362,P均<0.05);且FAM111B表达与肿瘤病理分级和分期具有正相关性。FAM111B高表达组与PAAD患者预后不良密切相关,与低表达组相比,差异有统计学意义(P均<0.05)。GSEA分析显示,FAM111B高表达组显著富集在细胞周期相关通路上,且FAM111B的表达与细胞周期相关分子的表达成正相关。RT-qPCR结果显示,沉默FAM111B后,与si-NC组相比,si-FAM111B组细胞细胞周期相关分子细胞周期蛋白B1(CCNB)、细胞周期蛋白C(CCNC)、细胞周期蛋白E(CCNE)、细胞分裂周期蛋白25A(CDC25A)、细胞分裂周期蛋白25C(CDC25C)、细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)、细胞周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)的mRNA表达水平显著下降,差异均有统计学意义(t=13.370、6.769、3.011、6.304、5.441、6.058、11.420,P均<0.05)。CCK-8实验结果显示,与si-NC组相比,si-FAM111B组的细胞增殖能力下降,差异有统计学意义(t=43.710,P<0.05)。流式细胞术检测分析发现,沉默FAM111B后,与si-NC组相比,si-FAM111B组细胞周期的G2/M期比例显著增加,差异有统计学意义(t=8.179,P<0.01)。结论FAM111B是PAAD患者预后差的独立生物标志物和潜在的治疗靶点。

FAM134B介导的内质网自噬及其与疾病的关系

自噬能够降解损伤衰老的细胞器以及异常的蛋白质,能够给机体的生命活动提供部分所需的能量及原料。自噬主要分为4个阶段,包括自噬前体、自噬小体、自噬溶酶体的形成以及溶酶体水解酶降解自噬体内所包裹的大分子物质的过程,依赖溶酶体降解系统进行。在细胞内,内质网是最大的细胞器,蛋白质在内质网合成和加工,钙离子贮存在内质网中;蛋白质折叠错误、钙离子平衡失调会导致内质网功能紊乱,激活内质网自噬。自噬能够维持细胞稳态,选择性自噬和非选择性自噬是根据降解底物特异性的有无分成的2种自噬类型。内质网自噬是选择性自噬众多类型中的一种,是由内质网受体介导的自噬。序列相似性家族134成员B(FAM134B)是最先在哺乳动物中发现的且已被鉴定的内质网自噬受体,其介导的内质网自噬参与了众多疾病的发展进程。FAM134B通过LC3相互作用域和网状同源结构域诱导内质网膜弯曲碎片化,便于运输到溶酶体,促进内质网降解。适度的内质网自噬肃清破损的内质网,恢复内质网内稳态;而当内质网自噬过度时就会诱导细胞启动凋亡程序。一般情况下,机体低水平的自噬对于细胞的存活是有益的,而应激状态下的过度自噬或自噬功能障碍则对机体有害。本文介绍了自噬、内质网结构及其功能、内质网自噬以及FAM134B如何介导内质网自噬,并通过梳理相关文献,阐述了FAM134B介导的内质网自噬与神经系统疾病、消化系统疾病、心血管疾病、感染性疾病之间的联系,表明通过调控FAM134B的表达在一定程度上能够控制内质网自噬,从而影响疾病的进展。

三阴性乳腺癌组织中miR-136-5p和FAM83H的表达及与临床病理特征和预后的相关性

目的探索三阴性乳腺癌(TNBC)组织中微小RNA-136-5p(miR-136-5p)和83序列相似家族成员H(FAM83H)的表达情况及其与患者临床病理特征和预后的相关性。方法选取2015-01-30-2018-06-30河南大学第一附属医院进行手术治疗的172例TNBC患者为研究对象,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RTFQ-PCR)检测其癌组织与癌旁组织中miR-136-5p、FAM83H的表达情况。采用Pearson法分析TNBC患者癌组织miR-136-5p与FAM83H表达水平的相关性。采用Kaplan-Meier生存曲线分析TNBC患者癌组织miR-136-5p与FAM83H表达水平与患者预后的关系。采用Cox回归模型分析TNBC患者预后不良影响因素。结果TNBC患者癌组织miR-136-5p水平为0.81±0.14,低于癌旁组织的1.02±0.21,差异有统计学意义,t=10.912,P<0.001;FAM83H水平为1.39±0.27,高于癌旁组织的0.99±0.17,差异有统计学意义,t=16.442,P<0.001。TNBC患者癌组织miR-136-5p与FAM83H表达水平呈显著负相关,r=-0.652,P<0.001。有淋巴结转移的TNBC患者癌组织miR-136-5p水平为0.72±0.09,低于无淋巴结转移的0.87±0.17,FAM83H水平为1.51±0.38,高于无淋巴结转移的1.31±0.20,差异有统计学意义,t值分别为6.685、4.502,均P<0.05;有血管侵犯的TNBC患者癌组织miR-136-5p水平为0.71±0.11,低于无血管侵犯的0.83±0.15,FAM83H水平为1.54±0.33,高于无血管侵犯的1.36±0.26,差异有统计学意义,t值分别为4.087、3.240,均P<0.05。172例TNBC患者5年失访5例,余下167例的预后不良发生率为24.55%,miR-136-5p高表达组预后不良发生率(15.79%)低于低表达组(31.87%),差异有统计学意义,χ^(2)=6.252,P=0.012;FAM83H高表达组预后不良发生率(35.00%)高于FAM83H低表达组(14.94%),差异有统计学意义,χ^(2)=11.522,P<0.001。多因素Cox回归分析显示,淋巴结转移、血管侵犯、癌组织FAM83H表达是导致TNBC患者预后不良的危险因素,癌组织miR-136-5p表达为保护因素,均P<0.05。结论TNBC患者癌组织miR-136-5p表达下调,FAM83H表达上调,二者表达水平负相关,另miR-136-5p与FAM83H在癌组织中的表达情况均与TNBC患者临床病理特征和长期预后密切相关。