健康人外周静脉血树突状细胞瘤苗诱导系统免疫效应细胞对BxPC-3的抑制与凋亡

目的 体外观察诱导扩增的健康人或正常人(统称为健康人)外周静脉血树突状细胞(DCs)杂交瘤苗诱导系统免疫效应细胞(SIECs)对原位胰腺癌细胞株(BxPC-3)的抑制与凋亡作用。方法 以淋巴细胞分离液梯度离心获得健康人外周静脉血单核细胞(PBMCs),贴壁法获取DCs和去DCs的单核细胞(即SIECs),并分别用人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)、BxPC-3肿瘤特异性抗原(BxPC-3TSA)培养DCs和SIECs。5 d后收集DCs并计数,用PEG+10%二甲基亚砜(DMSO)做为融合剂,按10∶1、5∶1、1∶5将BxPC-3TSA致敏的DCs(简称敏DCs)、DCs分别与BxPC-3进行融合,获得敏DCs-BxPC-3、DCs-BxPC-3融合瘤苗。第7天,SIECs分别和敏DCs-BxPC-3、DCs-BxPC-3、敏DCs、DCs以40∶1混合培养1 d,分别收集混合培养细胞,并以混合细胞中的SIECs∶BxPC-3=10∶1的效靶比对BxPC-3进行膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)法凋亡实验和细胞计数试剂盒(CCK-8)法毒性实验。结果 敏DCs、DCs与BxPC-3融合,以1∶1的比例融合时融合效果最好,融合率为40.0%。CCK-8法实验显示:敏DCs-BxPC-3、DCs-BxPC-3、敏DCs诱导SIECs对BxPC-3抑制率分别为53.1%、45.3%、78.8%,吸光度(A)值Dunnett T3检验显示组之间差异均有统计学意义(P<0.05)。凋亡实验显示:敏DCs瘤苗、DCs瘤苗、敏DCs、DCs诱导SIECs对BxPC-3的凋亡率分别为24.17%, 11.43%, 85.87%, 29.94%,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 肿瘤抗原序贯法致敏DCs使其获取抗原时出现叠加效应,从而发挥更好的抗肿瘤结果;早期DCs融合瘤苗在一定程度上可诱导SIECs抑制肿瘤细胞效果。