骨髓间充质干细胞来源的外泌体对应激性抑郁症模型大鼠的治疗作用及机制研究

目的观察骨髓间充质干细胞外泌体(BMSC-Exos)对应激性抑郁症(STRID)模型大鼠的治疗作用及机制。方法分离并培养Wistar大鼠骨髓腔骨髓间充质干细胞(BMSCs),收集4~6代BMSCs细胞培养基上清提取BMSC-Exos。30只成年雄性WKY大鼠随机分为对照组、STRID组及STRID+BMSC-Exos组,每组10只。STRID组及STRID+BMSC-Exos组大鼠给予慢性温和不可预知应激刺激建立STRID模型,连续建模28d后给予STRID+BMSC-Exos组大鼠尾静脉0.1ml BMSC-Exos稀释液注射治疗,其他两组给予等量生理盐水,连续治疗15d。强迫游泳及糖水偏好实验观测各组大鼠抑郁样行为变化;免疫荧光检测大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)表达分布差异;高效液相色谱-荧光法用于检测大鼠脑组织中5-羟色胺(5-HT)和多巴胺(DA)含量变化;ELISA检测大鼠脑组织中白介素-6(IL-6)、β-内啡肽(β-EP)含量变化。结果分离提取的BMSC-Exos符合外泌体形态、粒径及表型鉴定特征;造模后STRID组大鼠出现明显抑郁样行为,脑组织中BDNF、β-EP、5-HT、DA含量较对照组显著降低,IL-6增加;BMSC-Exos回输治疗后,STRID+BMSC-Exos组大鼠较STRID组抑郁样行为减少,BDNF、β-EP、5-HT、DA表达较STRID组增加,IL-6分泌减少,但仍与对照组存在显著差异。结论BMSC-Exos可能通过抑制IL-6分泌,促进脑内BDNF、β-EP表达及5-HT、DA的合成分泌发挥治疗STRID的作用。

基于双向电泳的应激性抑郁症模型大鼠蛋白质组学研究

目的筛选应激性抑郁症(STRID)模型大鼠海马组织中的差异表达蛋白,初步探讨STRID的发病机制。方法将20只成年SD大鼠随机分为对照组和STRID组,每组10只。STRID组给予慢性温和不可预知应激(CUMS)干预(包括禁食水、电刺激足底、颠倒昼夜、冰水游泳、倾斜鼠笼、惊吓刺激、夹尾等方法)连续不重复刺激28d建模,对照组在此期间正常喂养。在STRID模型建立完成后提取2组大鼠海马组织进行蛋白双向电泳,筛选出差异表达蛋白点后进行质谱鉴定和蛋白功能分析。结果 2组共鉴定出34个差异表达蛋白,其中STRID组较对照组表达上调18个、下调16个。差异表达蛋白主要集中于细胞质、线粒体、细胞外泌体和髓鞘中,主要参与代谢信号通路、氧化磷酸化信号通路,以及阿尔茨海默症、帕金森病和亨廷顿症信号通路。结论 STRID大鼠海马组织存在蛋白的异常表达和神经信号传导异常,过度的氧化磷酸化可能是其致病机制之一。

褪黑激素对慢性轻度应激性抑郁症大鼠TNF-α和IL-6含量的影响

目的探讨褪黑激素(MT)对慢性轻度应激性抑郁症(CMSD)大鼠海马区和脑脊液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)含量的影响。方法 36只SD大鼠随机均分为MT治疗组(A组)、DM模型组(B组)和生理盐水空白对照组(C组)。A、B组采用慢性轻度应激建立CMSD模型。第7、14和21天采用Morris水迷宫实验评价大鼠智力行为变化;Western blot法检测海马区和脑脊液中TNF-α和IL-6的表达。结果 A组逃避潜伏期较B、C组缩短:第14天为(47.8±23.2)s vs. (56.4±29.4)s、(63.5±23.8)s;第21天为(22.4±13.6)s vs. (37.6±16.9)s、(30.5±13.1)s(P<0.01或P<0.05);A组第21天穿越站台次数较B组减少[(2.2±1.2)次 vs. (5.8±2.3)次](P<0.05)。A组TNF-α和IL-6蛋白表达含量较B组减少(P<0.05)。结论 MT能有效降低TNF-α和IL-6的表达,发挥抗抑郁作用。

光敏STIM1驱动视网膜损伤致应激性抑郁的相关机制研究

目的探讨光敏STIM1钙通道激活驱动视网膜细胞死亡致应激性抑郁症发生的情况及颅内视觉相关脑区炎性变化情况。方法采用球内光敏修饰STIM1病毒感染构建光驱动视网膜损伤小鼠模型。运用HE染色、抑郁行为学评定视网膜病变程度和抑郁发生率;采用RT-PCR、Western blot和免疫荧光染色等技术检测抑郁鼠脑内小胶质细胞、炎性相关因子(IL-6、MIP-1α)及神经细胞损伤标志物S100B、凋亡蛋白Caspase-3、髓鞘碱性蛋白MBP的变化。结果①连续7 d、3 h/d的光照模式下可见小鼠视网膜各层细胞数量均显著减少(P<0.05)。②光敏+组在旷场实验中进入中心区次数、中心区活动路程及运动总路程均显著降低(P<0.05),蔗糖偏好实验中糖水偏好指数显著降低(P<0.01),强迫游泳实验、悬尾实验的不动时间显著增加(P<0.001)。旷场实验、蔗糖偏好实验、强迫游泳实验、悬尾实验4项行为学实验均为抑郁阳性的比例为23.26%。③光敏+组抑郁鼠视皮层、背外侧膝状核IBa-1+细胞密度增多(P<0.05);视皮层中IL-6、MIP-1αmRNA表达显著上调(P<0.001),S100B蛋白、Caspase-3蛋白含量显著升高(P<0.05);在白质区MBP蛋白表达显著降低(P<0.05),胼胝体(cc)区、扣带回(cg)区MBP荧光信号强度明显减弱(P<0.0001)。结论成功构建光驱动视网膜损伤致应激性抑郁发生小鼠模型,证实抑郁发生可能与视觉相关脑区炎性环境改变、凋亡发生及白质区脱髓鞘性损伤密切相关。