深静脉血栓形成模型小鼠沉默信息调节因子1和氧化应激损伤标志物的表达

背景:研究表明,沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)对氧化应激有抑制作用,降低动脉血栓形成。而SIRT1和氧化应激损伤在静脉血栓中的变化仍不清楚。目的:进一步分析SIRT1和氧化应激损伤与小鼠深静脉血栓形成的关系。方法:把90只的C57型小鼠按体质量随机分为3组:空白组(n=30),假手术组(n=30),深静脉血栓形成组(n=30)。深静脉血栓形成组用下腔静脉狭窄法制备深静脉血栓形成动物模型,24 h后获取小鼠下腔静脉组织。苏木精-伊红染色法观察血栓情况;DCFH-DA荧光探针捕获、流式细胞仪检测静脉组织中活性氧的含量。并测得超氧化物歧化酶和丙二醛的量;用Western blot法检测SIRT1蛋白的表达。结果与结论:(1)在深静脉血栓形成组里静脉壁中活性氧含量显著多于空白组和假手术组(P<0.05);(2)深静脉血栓形成组静脉壁组织超氧化物歧化酶的量显著低于空白组和假手术组,而丙二醛含量显著高于空白组和假手术组(P<0.05);(3)深静脉血栓形成组SIRT1表达显著低于空白组和假手术组(P<0.05);(4)结果提示:氧化应激损伤能促进深静脉血栓形成的发生发展,深静脉血栓形成中SIRT1的活性被抑制。

应激时多种调节因子对骨代谢及糖代谢的影响

近年来有研究者提出骨骼也是一种"内分泌器官",大量实验研究证明骨代谢相关激素及各种细胞因子的分泌不仅影响骨形成、骨吸收,参与骨重塑,同时也在调节糖代谢、协调新陈代谢、改善机体内环境中发挥重要作用。该文对骨折时多种骨调节因子、骨转换蛋白及细胞因子对骨骼修复及对糖代谢影响的相关研究进行简要综述,以期为后续研究提供新思路。

反刍动物应激反应中糖皮质激素对免疫系统的调节机理

糖皮质激素是一种强效抗炎物质,对免疫系统有着广泛的抑制作用。在应激反应中糖皮质激素可通过抑制细胞因子释放、诱导细胞凋亡以及影响免疫细胞分化和迁移等途径,调控家畜的免疫系统功能,减轻炎症反应的同时抑制了免疫系统功能,从而增加患病风险。本文从糖皮质激素受体的表达、对免疫细胞的影响及对细胞因子的调节3个方面阐述了反刍动物应激反应中糖皮质激素的免疫调节作用及其机理,旨在为相关研究提供科学依据。

囊性纤维化跨膜调节因子氯离子通道在人肺泡上皮细胞损伤中的保护作用

目的探讨人肺泡上皮细胞囊性纤维化跨膜通道调节因子(CFTR)氯离子(Cl-)通道对肺泡上皮细胞损伤的保护作用。方法采用全细胞膜片钳法,在0mV钳制电压下,对正常A549细胞或H2O2处理(氧化损伤)的A549细胞分别按照不同方式给予4-氯苯[F]异喹啉(CBIQ)、二苯胺-2-羧酸(DPC)及钙通道阻断剂尼卡地平,观察细胞从-90mV至50mV经步阶电压(20mV)刺激后CFTRCl-电流随时间变化的曲线,并绘制电流-电压(I-V)曲线。结果正常及H2O2损伤后的细胞中均记录到典型的CFTRCl-电流,均可被相对特异性的CFTRCl-通道阻断剂DPC抑制。H2O2损伤细胞的CFTRCl-电流较正常细胞明显减小。CBIQ对H2O2损伤细胞的CFTRCl-电流以及被DPC+尼卡地平阻断后的正常细胞中的CFTRCl-电流均有激动作用。结论氧化应激可导致CFTRCl-通道功能异常,CBIQ可以抑制这种作用。CFTRCl-通道激活剂CBIQ可能通过调节CFTRCl-通道和Ca2+通道发挥保护受损细胞的作用。

热应激反应的调节

本文以热应激反应转录调节的关键点———热休克因子为主要对象 ,综述了热休克因子的类别、结构、功能以及激活和失活调节过程及一些相关调节因素的最新进展 。

沉默信息调节因子1信号通路在脑缺血—再灌注损伤中的保护作用

沉默信息调节因子1（silent information regulator,SIRT1）是一种烟酰胺腺嘌呤二核苷酸依赖性组蛋白去乙酰化酶,可通过对各种组蛋白和非组蛋白的去乙酰化作用,调控炎性反应、氧化应激、细胞凋亡等多种病理过程和生命活动,对脑缺血-再灌注损伤起着重要的保护作用。

从表观遗传学角度探究沉默信息调节因子1与心房颤动的相关性

心房颤动(房颤)是一种由多种原因导致的心房电生理的紊乱,表现为一种无序、快速的室上性心律失常。根据有无诱因,房颤可以分为病理性房颤和特发性房颤,与特发性房颤不同的是,病理性房颤一般是发生在诸如冠心病、心肌炎、高血压、心脏瓣膜病、心力衰竭、甲状腺功能亢进等疾病的基础之上。目前对于房颤发病机制的研究尚不明确,多数学者认为房颤是由多种机制导致的,包括心房的重构、免疫炎性反应、氧化应激、自主神经功能紊乱、肾素-血管紧张素-醛固酮系统功能异常及遗传变异因素等[1]。

基于网络药理学探讨逍遥丸对心理应激性不孕免疫调节的可行性和潜在作用机制

目的应用网络药理学探讨逍遥丸对心理应激性不孕免疫调节的可行性和潜在作用机制。方法利用中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)筛选逍遥丸具有较高活性的化合物成分以及对应的靶标蛋白,通过Universal Protein数据库查询靶标蛋白的基因名称,选择生物物种为Homo sapiens。在Online Mendelian Inheritance in Man和Genecards两个数据库查找相关的基因靶点。使用蛋白质互相作用平台(STRING)构建蛋白相互作用网络(PPI)以筛选重要靶点。使用R语言cluster Profiler软件包,对共同靶点进行GO和KEGG功能富集分析。结果逍遥丸、心理应激性不孕和免疫调节三者交集有53个共同靶点,PPI网络拓扑分析相关靶点有白细胞介素(IL)6、信号转导与转录激活因子3、肿瘤坏死因子(TNF)、IL1β、丝裂原活化蛋白激酶1等共50个。通过富集分析信号通路主要集中在IL17、TNF信号通路等。结论逍遥丸可能通过IL17、TNF信号通路对心理应激性不孕进行免疫调节,为后续的实验研究和临床应用提供理论依据。

多聚磷酸与RNA聚合酶的主要Sigma因子结合以调节幽门螺杆菌的饥饿反应

幽门螺杆菌定植在人的胃粘膜深层，在其整个致病过程中常面临营养缺乏、免疫清除、强酸等恶劣的环境变化的挑战。病原体要长期存活在这种条件下需依赖其在必要的时候启动“饥饿／应激反应”，这是其应对恶劣环境变化的关键机制。但与其他细菌不同的是，

棉籽总黄酮在大鼠慢性应激模型中的抗抑郁活性及其对海马神经营养通路的影响

目的探讨棉籽总黄酮(代号CTN-T)的抗抑郁作用及其可能机理。方法连续15d以每日1次的频率给予大鼠一系列不可预知的应激刺激以建立慢性复合应激模型,每次应激刺激前给予CTN-T(50或100mg.kg-1,ig)或地昔帕明(10mg.kg-1,ip)。采用Videomex-V运动图像分析系统观察大鼠敞箱自发活动行为,ELISA法检测血清皮质酮含量,Western印迹法检测海马脑源性神经营养因子(BDNF)、磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(pCREB)、磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK1/2)蛋白表达水平的变化。结果慢性复合应激15d后,大鼠自发活动显著减少,血清皮质酮含量显著升高。海马BDNF,pCREB和pERK1/2蛋白表达显著下调。每次应激刺激前给予CTN-T或地昔帕明可逆转上述变化。结论CTN-T在大鼠慢性应激模型上具有抗抑郁作用,其作用机制可能与上调海马BDNF相关的信号传导通路活性,改善神经营养和神经可塑性有关。

伤寒沙门菌不同生长期和不同应激下非编码RNA ArpH的表达

目的:探讨伤寒沙门菌(Salmonella enterica serovar Typhi,S.Typhi)在不同生长时期和不同应激条件下非编码RNA ArpH的表达水平,以及双组分调节系统和氧应激调节因子对ArpH的调控作用。方法:利用RNA印迹、qRT-PCR分析伤寒沙门菌在不同生长期ArpH的表达;利用qRT-PCR分析伤寒沙门菌在酸、氧、高渗和热等不同应激环境下ArpH的表达;利用qRT-PCR分析伤寒沙门菌双组分调节系统基因(ompR、rcsB)和氧应激调节因子基因(oxyR)对ArpH表达的影响。结果:ArpH在伤寒沙门菌的对数晚期表达量最高,在从对数早期开始到达稳态期的转变中,其表达量逐渐增加,而进入稳态期后明显回落;ArpH表达水平在酸应激下明显下降,氧应激下明显增高,而高渗应激和42℃热应激下ArpH的表达无显著变化;当ompR、rcsB和oxyR基因缺失时,ArpH表达量均明显下降。结论:ArpH参与伤寒沙门菌对酸、氧应激的调节;伤寒沙门菌双组分调节系统OmpR、RcsB和氧应激调节因子OxyR对ArpH均有正向调控作用。

重症颅脑损伤大鼠中SIRT1的表达情况及其对应激障碍的影响

目的探讨基于p38分裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)通路沉默信息调节因子相关酶1(SIRT1)表达水平在重症颅脑损伤大鼠中的变化及其对创伤后应激障碍(PTSD)的影响。方法 SD大鼠80只,留取15只作对照组,其余复制重症颅脑损伤大鼠模型。分为模型组、SIRT1过表达组、p38激动剂组。对照组仅制作假手术模型,SIRT1过表达组脑内注射过表达SIRT1慢病毒载体,p38激动剂组予以过表达SIRT1慢病毒载体+p38激动剂;模型组、对照组予以等体积生理盐水。评估各组大鼠创伤后第1、3及5天测试神经功能;高架十字迷宫实验评定创伤应激行为学;TTC法观察脑梗死面积;Western blotting检测梗死侧脑皮质中SIRT1、p38、p-p38蛋白的表达情况。结果从模型组、p38激动剂组、SIRT1过表达组到对照组,大鼠神经功能评分逐渐降低(P<0.05),进入开臂(和闭臂)次数逐渐增多,在开臂(和闭臂)停留时间逐渐延长(P<0.05)。模型组、SIRT1过表达组、p38激动剂组大鼠创伤后第1、3及5天脑梗死较明显,且随时间延长而加重;与模型组比较,SIRT1过表达组、p38激动剂组有所改善。从模型组、p38激动剂组、SIRT1过表达组到对照组,大鼠脑皮质SIRT1、p-p38蛋白相对表达量逐渐升高(P<0.05)。结论重症颅脑损伤大鼠脑皮质SIRT1表达下调,上调SIRT1可缓解PTSD,其机制可能与抑制p38信号通路有关。

三叶肽对胃黏膜适应性细胞保护的调节作用

目的探讨三叶肽(ITF)对胃黏膜适应性细胞保护的调节作用。方法采用重复水浸束缚应激(WRS)法制作模型,动态监测模型动物的胃黏膜血流量(GMBF),观察黏膜损伤指数(UI)及病理组织学变化;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹法(Westernblot)检测乳癌相关肽(PS2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、ITF、转化生长因子-α(TGF-α)及环氧合酶-2(COX-2)的表达。结果单次WRS后造成胃黏膜广泛损伤;重复应激后胃黏膜产生适应性,GMBF上升,损伤逐渐减轻;经4次应激后,UI降低到单次应激的22.0%,并且胃腺区细胞增殖。单次应激后,PS2基因表达减弱,而iNOS、ITF、TGF-α及COX-2基因表达均增强;重复应激后,PS2、ITF、TGF-α表达逐渐增强,而iNOS及COX-2基因表达逐渐减弱;正常时iNOS、ITF及COX-2几乎无表达,PS2、ITF、TGF-α主要在胃腺颈部表达;应激后PS2、ITF、TGF-α不但在胃腺颈部黏膜增殖带表达增强,在胃腺基底部亦有表达,iNOS及COX-2在溃疡及其边缘存在。结论胃黏膜适应性细胞保护伴有细胞增殖,PS2、ITF、TGF-α表达逐渐增强,iNOS及COX-2表达逐渐减弱,表明三叶肽在这一现象中具有重要的调节作用。

Sestrin1参与调控小鼠肝脏细胞糖异生

目的研究应激诱导蛋白1(SESN1)在小鼠肝脏糖异生途径中的作用及调节机制。方法RT-qPCR检测SESN1在C57BL/6J小鼠禁食条件下肝脏组织以及用佛司可林(Fsk)与地塞米松(Dex)处理的原代肝细胞中的mRNA表达水平。通过质粒转染HepG2细胞,RT-qPCR检测SESN1过表达对糖异生相关基因PGC-1α,PEPCK,G6Pase的mRNA表达水平的影响。利用双荧光素酶报告系统研究SESN1在HepG2细胞中对PGC-1α的启动子活性的影响。在HepG2细胞中,通过过表达SESN1同时抑制SIRT1表达检测SESN1对PGC-1α去乙酰化状态的影响;通过敲低SIRT1表达检测其是否介导了SESN1诱导糖异生相关基因mRNA水平的变化。结果SESN1在饥饿的C57BL/6J小鼠肝脏组织和佛司可林(Fsk)和地塞米松(Dex)处理的原代肝细胞中的mRNA表达水平显著升高(P<0.001)。在HepG2细胞中过表达SESN1促进了PGC-1α,PEPCK,G6Pase的mRNA表达水平(P<0.001)并促进PGC-1α的启动子活性(P<0.001)。SESN1的过表达降低了原代肝细胞中PGC-1α的乙酰化水平,利用Sirt家族抑制剂NAM和shRNA腺病毒分别干扰SIRT1表达,均拮抗了SESN1对PGC-1α的去乙酰化作,同时SIRT1诱导的PGC-1α,PEPCK和G6Pase的表达也明显受损(P<0.0001)。结论SESN1参与调控小鼠肝脏细胞糖异生,可能依赖于SIRT1。

基于免疫功能的重度心理应激孕产妇的护理评价

目的:从CD4^+CD25^+调节性T细胞(Treg)功能角度评价心理护理干预对重度心理应激孕产妇的作用。方法:选取2012年1月-2014年6月本院产科收治的60例重度心理应激孕产妇作为研究对象,按照住院先后顺序随机分为对照组和观察组,每组30例。对照组给予常规护理,观察组在对照组基础上给予心理护理,另择同期收治的60例非心理应激孕产妇作为阴性对照。采用流式细胞术检测两组外周血CD4^+CD25^+Treg、胞内转化生长因子β1(TGF-β1)及白介素10(IL-10)含量,采用焦虑自评量表(SAS)和抑郁自评量表(SDS)对护理前后两组孕产妇焦虑和抑郁进行评分,观察两组妊娠结局。结果:与非心理应激孕产妇比较,重度心理应激孕产妇的SAS和SDS评分明显升高,而Treg、TGF-β1及IL-10含量降低。护理后,观察组SAS和SDS评分低于护理前,Treg、TGF-β1及IL-10含量高于护理前,且观察组优于对照组,比较差异均有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析显示Treg、TGF-β1及IL-10均与SAS及SDS呈显著负相关性(P<0.05);观察组顺产率83.33%,高于对照组的70.00%,比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:重度心理应激孕产妇Treg及其细胞因子表达含量明显降低,并且与心理应激程度呈显著负相关性;心理护理可以显著改善心理应激程度及上述免疫功能的改变,提示护理对该类患者的免疫功能有显著改善作用。

肿瘤转移抑制因子NDRG1的研究进展

N—myc下游调节基因1（N—myc downstream regulated1，NDRG1），也曾称为分化相关基因1（differentiation related gene1，DRG-1）、钙激活蛋白43（calcium activated protein43，Cap43）基因、应激诱导应答42（responseinduced by stress42，Rit42）基因，

大黄素对肺炎链球菌肺炎大鼠氧化应激损伤及miR-34a/SIRT1轴的影响

目的探究大黄素对肺炎链球菌肺炎大鼠氧化应激损伤及微小RNA-34a/沉默信息调节因子2相关酶1(miR-34a/SIRT1)轴的影响。方法60只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组、低剂量(20 mg/kg)、中剂量(40 mg/kg)和高剂量(80 mg/kg)大黄素组,每组12只。采用气管滴加肺炎链球菌法制备肺炎模型,建模成功后24 h,大黄素干预组分别腹腔注射大黄素溶液,每天1次,连续7 d。HE染色观察肺组织病理变化,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,可见分光光度法检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,qPCR检测肺组织miR-34a、SIRT1 mRNA水平,Western blot检测肺组织SIRT1蛋白表达。结果假手术组大鼠肺组织正常,无明显病理改变;模型组大鼠肺泡塌陷,有大量炎性细胞浸润;低、中、高剂量大黄素组肺组织炎性病变均减轻。与假手术组比较,模型组肺组织TNF-α、IL-6、MDA、miR-34a水平显著增加(P<0.05),肺组织SOD、GSH-Px、SIRT1 mRNA及蛋白水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,中、高剂量大黄素组大鼠肺组织TNF-α、IL-6、MDA、miR-34a水平显著降低(P<0.05),肺组织SOD、GSH-Px及SIRT1 mRNA及蛋白水平显著增加(P<0.05),其中高剂量大黄素组变化最明显。结论大黄素可减轻肺炎链球菌肺炎大鼠炎症反应及氧化应激损伤,可能与调控miR-34a/SIRT1轴有关。

替罗非班通过SIRT1/VEGF信号通路减轻急性脑梗死大鼠神经元损伤

目的探讨替罗非班能否通过沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路减轻急性脑梗死(ACI)大鼠神经元损伤。方法将75只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、替罗非班(60μg/kg)组、SIRT1抑制剂(5 mg/kg SIRT1特异性抑制剂EX-527)组、替罗非班+SIRT1抑制剂组,每组15只。除假手术组外,其他4组大鼠构建ACI模型。对各组大鼠进行神经功能评分;采用氯化三苯基四氮唑染色检测大鼠脑梗死体积百分数;采用硫代巴比妥酸法检测大鼠血清丙二醛水平,采用比色法检测血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,采用微板法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)水平;采用H-E染色检测大鼠脑组织病理变化;采用TUNEL染色检测大鼠神经元凋亡水平;采用蛋白质印迹法检测大鼠海马组织中SIRT1、VEGF蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠脑组织海马区病理损伤严重,神经功能评分、脑梗死体积百分数、血清丙二醛水平、神经元凋亡率均较高(P均<0.05),血清GSH-Px、SOD水平及海马组织中SIRT1、VEGF蛋白表达水平均降低(P均<0.05)。与模型组比较,替罗非班组、替罗非班+SIRT1抑制剂组大鼠脑组织海马区病理损伤减轻,神经功能评分、脑梗死体积百分数、血清丙二醛水平、神经元凋亡率均降低(P均<0.05),血清GSH-Px、SOD水平及海马组织中SIRT1、VEGF蛋白表达水平均升高(P均<0.05);而SIRT1抑制剂组大鼠相应指标变化呈相反趋势(P均<0.05)。结论替罗非班可能通过激活SIRT1/VEGF信号通路抑制氧化应激和神经元凋亡,进而减轻ACI大鼠的神经元损伤。