血管性认知功能障碍病人血清微RNA-335-5p、血清应答因子水平及其临床意义

目的 探究血管性认知功能障碍(VCI)病人血清微RNA(miR)-335-5p、血清应答因子(SRF)水平及临床意义。方法以石家庄市人民医院2019年1月至2020年12月因脑卒中治疗后6个月出现VCI的110例病人为研究对象(VCI组),其中非痴呆型血管性认知功能障碍(VCIND)者48例(VCIND组)、血管性痴呆(VD)者62例(VD组)。同时间段该院脑卒中未合并认知障碍者110例为对照组。分析各组病人发病时(入院次日)、发病后6个月、发病后1年血清miR-335-5p、SRF水平。logistic回归模型分析脑卒中病人发生VCI的影响因素。Pearson法分析血清miR-335-5p与SRF水平的相关性。受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清miR-335-5p、SRF水平对VCI的预测价值。结果 VCI组发病时miR-335-5p水平0.76±0.15低于对照组1.06±0.07,而SRF水平1.52±0.24高于对照组1.01±0.09,差异有统计学意义(P<0.05)。发病时,对照组、VCIND组、VD组的miR-335-5p水平逐次降低(1.06±0.07比0.86±0.17比0.68±0.14),SRF水平依次增加(1.01±0.09比1.32±0.25比1.67±0.24),差异有统计学意义(P<0.05)。VD组、VCIND组受试者在发病后6个月及1年时SRF水平低于发病时,而miR-335-5p水平高于发病时(P<0.05)。三组蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分、miR-335-5p、SRF组间、时间、交互作用差异有统计学意义(P<0.05)。发病时,VCI组血清miR-335-5p与SRF水平存在负相关性(r=-0.64,P<0.001)。年龄、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、miR-335-5p、SRF是影响脑卒中病人VCI的危险因素(P<0.05)。ROC分析显示,血清miR-335-5p、SRF、miR-335-5p联合SRF预测脑卒中后VCI的曲线下面积为0.88[95%CI:(0.84,0.93)]、0.90[95%CI:(0.86,0.95)]、0.93[95%CI:(0.89,0.97)]。结论VCI病人血清miR-335-5p水平明显降低,而SRF水平升高,二者水平变化与VCI严重程度有关,是导致脑卒中后VCI的影响因素,且二者联合对脑卒中后VCI有较高预测效能。

鳞状上皮细胞癌抗原、细胞角蛋白19及血清应答因子对食管癌淋巴结转移的诊断价值分析

目的:探讨鳞状上皮细胞癌抗原(SCC)、细胞角蛋白19 (CYFRA21-1)及血清应答因子(SRF)对食管癌(EC)淋巴结转移的诊断价值分析。方法:回顾性分析2019年2月—2021年1月洛阳市东方人民医院治疗的128例EC患者的临床资料,根据患者淋巴结转移情况将其分为淋巴结转移组和未发生淋巴结转移组,对比两组患者临床资料,分析EC患者SCC、CYFRA21-1、SRF与EC患者发生淋巴结转移的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线下面积评价SCC、CYFRA21-1和SRF对食管癌淋巴结转移的诊断效能。结果:本研究纳入的128例EC患者中,有40例患者发生了淋巴结转移,淋巴结转移发生率为31.25%;与未发生淋巴结转移组相比,淋巴结转移组年龄、性别、体质量指数(BMI)、居住地、婚姻情况、教育程度、抽烟、饮酒、病变部位、肿瘤长径、高血压、糖尿病等临床资料对比,差异无统计学意义(t/χ^(2)=0.302、0.236、1.283、0.145、0.348、0.348、0.984、0.046、0.029、0.332、2.086、0.398、1.112,P>0.05),而TNM分期、肿瘤分化程度、SCC、CYFRA21-1、SRF等临床资料对比,差异有统计学意义(t/χ^(2)=6.188、5.593、7.435、7.160、8.503,P<0.05);经logistic回归分析显示,肿瘤分化程度、SCC、CYFRA21-1及SRF均是淋巴结转移的危险因素;Pearson相关性分析结果显示,SCC、CYFRA21-1、SRF表达水平与淋巴结转移的发生呈正相关(r=0.645、0.667、0.658,P<0.05);SCC、CYFRA21-1、SRF预测淋巴结转移的曲线下面积(AUC)分别为0.666、0.860及0.883,而SCC、CYFRA21-1、SRF三者联合检测预测淋巴结转移的AUC为0.952高于各指标单独检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SCC、CYFRA21-1、SRF与淋巴结转移的发生具有较高的相关性,且SCC、CYFRA21-1、SRF三者联合检测淋巴结转移发生的效能优于各指标单独检测。

生长应答因子1与胃癌的关系研究进展

早期生长应答因子1(EGR1)具有多种生物学功能,在胃癌的发生发展中起重要作用。EGR1与胃癌患者更高的临床分期、淋巴结和远处转移、不良预后密切相关;检测胃癌患者EGR1的表达将有助于预测病情和不良预后,以实现更早期、更精准的治疗;多种化合物可通过调控EGR1对胃癌细胞发挥抑制效应;在EGR1介导胃癌发生发展和耐药的机制中,包括非编码RNA在内的多种分子在EGR1的上下游都发挥调控作用,这些分子及其涉及的通路可能是潜在的干预靶点。

血清早期生长应答因子1与2型糖尿病视网膜病变的相关性

目的探讨血清早期生长应答因子1(Egr-1)水平与2型糖尿病(T2DM)视网膜病变(DR)的相关性。方法选取医院2020年1月至2022年6月收治的T2DM患者84例,按是否合并DR分为A组(合并DR,40例)和B组(不合并DR,44例),另选取同期健康体检者48例作为对照组(C组)。常规检测3组患者的血糖、肾功能等指标水平,比较血清Egr-1水平。结果B组、C组超敏C反应蛋白(hs-CRP)、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1C)水平明显高于A组,且C组明显高于B组(P<0.05);C组尿素氮(BUN)、Egr-1明显高于A组和B组(P<0.05),且B组与A组相当(P>0.05);C组24 h尿微量白蛋白水平明显高于B组(P<0.05),胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)与B组相当(P>0.05)。Egr-1与24 h尿微量白蛋白,BUN,FBG,HbA1C,hs-CRP水平及DR分期均呈正相关性(r=0.639,0.567,0.688,0.601,0.939,0.712;P<0.05)。随着DR分期的增加,血清Egr-1水平逐渐增加,而Ⅰ、Ⅱ期DR患者Egr-1水平相当(P>0.05)。结论血清Egr-1可能作为DR的一种新型炎性生物学标志物用于临床诊断。

腹腔镜辅助D2根治性全胃切除术联合树突状细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞治疗胃癌患者及对血清糖类抗原19-9与血清应答因子的影响

目的探讨腹腔镜辅助D2根治性全胃切除术(LATG)联合树突状细胞(DC)-细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)治疗胃癌的临床疗效及对患者血清糖类抗原19-9(CA19-9)与应答因子(SRF)的影响。方法选取2018年2月至2020年5月本院收治的90例胃癌患者作为研究对象,按随机数字表法分为联合组与对照组,每组45例。对照组行LATG治疗,联合组在对照组基础上联合DC-CIK治疗,比较两组临床疗效、T细胞亚群、CA19-9、SRF及术后复发率。结果联合组治疗总有效率为97.78%,高于对照组的82.22%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,联合组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均高于对照组,CD8+水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组CA19-9、SRF水平均低于治疗前,且联合组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。联合组术后复发率为11.11%,低于对照组的28.89%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论LATG联合DC-CIK治疗胃癌患者能增强治疗效果,提高患者免疫力,降低CA19-9、SRF水平及术后复发率。

甜瓜乙烯应答因子基因在果实发育成熟过程中的表达特性

根据已报道的甜瓜CMe-ERF1和CMe-ERF2基因cDNA序列设计合成特异性引物,应用RT-PCR技术从甜瓜品种‘河套蜜瓜’成熟果实中克隆得到CMe-ERF1和CMe-ERF2基因cDNA全长编码区序列,分别为498bp和822bp.序列比对分析表明,得到的cDNA序列与已报道的Andes甜瓜相应基因的cDNA序列完全一致.果实不同发育时期实时定量PCR检测结果表明,CMe-ERF1、CMe-ERF2基因表达与甜瓜果实成熟及乙烯生成量显著相关,表明该基因可能对果实成熟起重要作用.

龙眼生长素应答因子基因克隆及其在体胚中的表达分析

以龙眼胚性愈伤组织为材料,采用RT-PCR结合RACE法克隆生长素应答因子基因(auxin response fac-tor,即DL-ARF1),运用生物信息学方法对序列进行分析,并通过实时荧光定量PCR法研究其在龙眼体细胞胚胎发生过程中的表达。结果表明:DL-ARF1基因的mRNA全长序列为2 695bp(GenBank登录号GQ923778),包含2 046bp开放阅读框,163bp 5′非编码区(5′UTR),486bp 3′非编码区(3′UTR);推定的氨基酸序列含681个氨基酸,与其它植物ARF基因相似性达40%～81%。DL-ARF1基因可能属于转录抑制因子,在龙眼体胚的各阶段均有表达,整个变化趋势呈双峰形,在胚性愈伤Ⅱ(Stage 2)中的表达量最高。

苜蓿乙烯应答因子基因的表达特性和生物信息学分析

乙烯应答因子(ethylene response factor,ERF)是植物特有的一类转录因子,参与植物生长发育和胁迫应答等多个生理生化过程。本研究以拟南芥AP2结构域为探针搜索美国国立生物技术信息中心(NCBI)的苜蓿属蛋白质数据库,运用生物信息学软件分析苜蓿乙烯应答因子的系统进化、疏水轮廓、二级结构、信号肽以及亚细胞定位情况。运用半定量RT-PCR技术研究5个紫花苜蓿乙烯应答因子基因(MsERF1,MsERF2,MsERF6,MsERF7,MsERF9)表达的组织差异性以及多种处理条件下的表达特性。结果表明,5个乙烯应答因子基因在叶中的表达量都明显高于其他组织,不同基因有不同的组织表达特性;NaCl和PEG6000对MsERF2的表达没有影响,但Al2(SO4)3能诱导其表达,其余基因的表达都受这3种处理的诱导;脱落酸对MsERF2的表达没有影响,能够诱导其他基因的表达;生长素只能诱导MsERF6的表达,对其他基因的表达没有影响;赤霉素、茉莉酸甲酯和乙烯利对5个基因的表达都起促进作用。本研究为进一步研究苜蓿乙烯应答因子的结构和功能奠定了基础,同时为研究不同信号传导途径之间的相互作用提供了依据。

转化生长因子β1、血清应答因子和波形蛋白在脑胶质瘤中的表达及相关性

目的 研究转化生长因子β1（TGF-β1）、血清应答因子（SRF）和波形蛋白在脑胶质瘤中的表达及相关性.方法 采用免疫组织化学染色法分别检测脑胶质瘤组织（胶质瘤组）和正常脑组织（正常对照组）中TGF-β1、SRF和vimentin的表达情况.结果 TGF-β1、SRF、波形蛋白在胶质瘤组中阳性表达率显著高于正常对照组（P＜0.05～0.01）.高级别患者的TGF-β1、SRF、波形蛋白阳性率显著高于低级别患者（均P＜0.05）.胶质瘤组不同性别、年龄、部位、肿瘤大小患者的TGF-β1、SRF、波形蛋白阳性率差异无统计学意义（均P ＞0.05）.SRF分别与TGF-β1及波形蛋白在脑胶质瘤组织中的表达呈正相关（r=0.348,P=0.002;r=0.506,P=0.000）.结论 TGF-β1、SRF和波形蛋白在脑胶质瘤中的表达显著增高,其在脑胶质瘤的发生、发展中可能起到重要的调控作用,并与脑胶质瘤的恶性程度关系密切.

血清应答因子在脑胶质瘤中的表达及其与新生血管的相关性分析

目的:研究血清应答因子(SRF)在脑胶质瘤中的表达及其与血管新生的相关性。方法:采用EnVision法进行免疫组化染色,对110例脑胶质瘤(胶质瘤组)、50例脑胶质瘤旁的正常脑组织(正常对照组)中的SRF、VEGF-A的表达水平进行检测,并分析SRF与血管内皮生长基因-A(VEGF-A)、微血管密度(MVD)的相关性。结果:胶质瘤组的脑胶质瘤组织中的SRF表达阳性率为52.7%,明显高于对照组正常组织中的SRF表达阳性率2%(P<0.05)。胶质瘤组的脑胶质瘤组织中的VEGF-A表达阳性率为49.1%,明显高于对照组正常组织中的VEGF-A表达阳性率2%(P<0.05)。脑胶质瘤患者肿瘤组织中SRF、VEGF-A表达阳性率跟肿瘤分级与淋巴结转移相关(P<0.05),而跟性别、肿瘤部位及肿瘤大小无关(P>0.05)。经Spearman相关分析显示,脑胶质瘤患者肿瘤组织中SRF的表达与VEGF-A表达呈正相关(r=0.671,P<0.05)。胶质瘤组SRF阳性表达病例MVD值明显高于对照组(P<0.05)。结论:SRF的表达可能在脑胶质瘤的发生及发展发挥着重要的调控作用,脑胶质瘤中的SRF高表达可能是通过促进VEGF-A表达而增加血管密度,从而加快脑胶质瘤的发生及发展。

食管癌及其淋巴结转移癌组织中血清应答因子与α-平滑肌肌动蛋白差异表达的意义

目的研究血清应答因子(SRF)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在食管癌及其淋巴结转移癌组织中差异表达的临床病理意义。方法收集2017年1月至2018年12月在唐山市人民医院行食管癌根治性手术的食管癌伴有淋巴结转移病人68例,采用免疫组织化学染色法检测68例手术标本的食管癌原位癌组织及其淋巴结转移癌组织中SRF和α-SMA的表达,并比较阳性表达率的差异。结果免疫组织化学染色结果显示,在食管鳞癌淋巴结转移癌组织中的SRF、α-SMA阳性表达率分别为73.53%和77.94%,显著高于原位癌组织的52.94%和44.12%;SRF、α-SMA在淋巴结转移癌中的高表达与浸润深度、淋巴结转移区域和TNM分期关系密切(P<0.05),且两者具有正相关性(P<0.05)。结论 SRF可能促进了食管癌淋巴结转移。

血清应答因子在血管新生内膜形成过程中的表达变化

目的探讨SRF与VSMC表型转化及增殖之间的关系。方法建立大鼠颈总胸腹主动脉内皮剥脱后内膜增生模型,应用Northern印迹、Western印迹及免疫组化等方法从RNA和蛋白质水平上检测新生内膜形成过程中SRF表达的动态变化。结果血管内皮剥脱后3d,可见局部内膜增生,中膜平滑肌细胞排列不齐;术后7~14d,内膜呈进行性弥漫增厚,管腔出现狭窄。在增生的内膜中,SRF的mRNA和蛋白水平明显升高,于术后7d达高峰,其动态变化模式与血管内膜增厚速率相一致,但与收缩型VSMC的标志物SM22α的表达却呈反相关变化。结论血管内皮剥脱后SRF表达活性升高与VSMC去分化和新生内膜形成具有直接关系。

3个紫花苜蓿乙烯应答因子基因的克隆与分析

【目的】克隆3个紫花苜蓿乙烯应答因子基因,分析其在不同条件下的表达特性;构建植物表达载体并转化烟草,对转基因烟草的耐盐性进行初步鉴定。【方法】根据已获得的cDNA序列设计引物,扩增MsERF5、MsERF8和MsERF11的DNA序列,并分析基因结构;利用半定量RT-PCR技术分析其组织表达特异性和胁迫条件下的表达特性;通过农杆菌介导的方法转化烟草,鉴定盐胁迫条件下转基因烟草的表型和生理生化特性,初步验证其功能。【结果】MsERF5、MsERF8和MsERF11都不包含内含子。MsERF5在根、叶和花蕾中的表达量高于茎和花;MsERF8在根和叶中的表达量高于茎、花蕾和花;MsERF11在叶中的表达量最高;3个基因都能被多种非生物胁迫(盐、干旱、铝)和激素(脱落酸、赤霉素、乙烯利、水杨酸和茉莉酸甲酯)诱导,但表达模式不同。在盐浓度为200 mmol.L-1的筛选培养基上只有导入目的基因的愈伤组织能产生不定芽,250 mmol.L-1NaCl处理再生植株10 d,转基因植株和野生型植株叶片的电导率和可溶性糖含量均呈现上升趋势,但野生型植株叶片的电导率显著高于转基因植株,可溶性糖含量则显著低于转基因植株(P<0.05);转基因植株和野生型植株叶片的叶绿素含量均呈现下降趋势,野生型植株叶片叶绿素含量显著低于转基因植株(P<0.05);盐胁迫条件下,转化不同基因的再生植株的电导率、叶绿素和可溶性糖含量没有显著差异(P>0.05)。【结论】3个紫花苜蓿乙烯应答因子基因都不包含内含子,其表达具有组织特异性,都能被多种非生物胁迫和激素诱导,能够使烟草愈伤组织在含盐培养基上形成不定芽并最终产生转基因植株,且转基因植株的耐盐性高于野生型植株。

血清应答因子及血管内皮生长因子受体2在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的:研究血清应答因子(SRF)及血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法:选取我院2015年12月~2016年11月收治34例胃癌患者的胃癌组织34例、配对手术切缘黏膜组织34例、胃癌转移淋巴结组织25例,采用免疫组织化学染色法检测以上组织SRF与VEGFR2状态,结合临床与病理资料分析SRF、VEGFR2阳性表达因素。结果:胃癌转移淋巴结组SRF、VEGFR2阳性表达率与胃癌组相比,差异无统计学意义(P>0.05);配对手术切缘黏膜组SRF、VEGFR2阳性表达率高于胃癌组,差异有统计学意义(P<0.05);SRF、VEGFR2在各组织中阳性表达率与肿瘤直径、分化程度无关,差异无统计学意义(P>0.05),与浸润深度、淋巴结转移有关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SRF与VEGFR2的高表达可提示患者遭受胃癌侵袭或发生转移,在胃癌发展中具有重要作用。

番茄生长素应答因子SlARF8-1的分离与SlARFs表达特征分析

根据番茄基因组序列,以cDNA为模板扩增获得1个生长素应答因子新基因,其与番茄SlARF8基因同源性高达94%,编码区全长2 535 bp,编码844个氨基酸,但这2个基因存在于番茄的不同染色体上,是区别于SlARF8的一个新基因,将其命名为SLARF8-1,NCBI登录号为HM560979.利用半定量反转录酶-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)分析4种ARF基因(SlARF3、SlARF4、SlARF6和SlARF8-1)的时空表达特性,发现SlARF8-1基因在中蔬6号"番茄的5个器官(茎、叶、花前子房、花后子房和不同时期果实)中均有表达;SlARF3在叶片和子房中几乎没有表达;SlARF6在番茄叶片中表达量低,而在果实中的表达量较高;在果实发育的不同时期,4个SlARFs的表达量变化不大.利用2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和赤霉酸(GA3)处理番茄花蕾均可诱导单性结实,但外源激素并没有引起果实内SlARFs表达水平的显著改变,4个SlARFs基因在番茄单性果实中均有表达.

早期生长应答因子-1在压力超负荷诱导的心肌肥厚及纤维化中的作用

目的通过早期生长应答因子-1基因敲除(EGR-1-/-)小鼠研究其在压力超负荷诱导的心肌肥厚及心肌纤维化中的作用。方法将20只EGR-1-/-小鼠和20只EGR-1野生型(EGR-1+/+)小鼠分别随机分为模型组和假手术组(n=10),通过主动脉缩窄术建立小鼠心肌肥厚模型,运用超声检测评价手术4周后小鼠心功能,组织病理学方法评价心肌肥厚及纤维化程度,实时定量聚合酶链式反应在mRNA水平检测心肌肥厚标志物心钠肽、脑钠肽及心肌纤维化标志物Ⅰ、Ⅲ型胶原。结果主动脉缩窄术后4周,EGR-1-/-模型组与EGR-1+/+模型组相比,EGR-1-/-模型组小鼠心功能有关指标得到明显改善(P<0.05,n=10),且心肌肥厚及纤维化有关指标显著降低(P<0.05,n=10)。结论 EGR-1基因敲除后能显著降低心肌肥厚及纤维化的程度。

番茄生长素应答因子ARF1基因RNA干涉载体的构建及其对番茄的转化

将番茄生长素应答因子家族成员之一ARF1中的500 bp左右的特异片段导入到植物载体pBI121中,构建成RNAi表达载体(pBI121-ARF1),通过根癌农杆菌介导转入番茄子叶,经组织培养和抗性筛选获得再生植株。PCR检测再生植株,初步鉴定为阳性植株,为后续进一步鉴定该基因功能奠定了基础。

血清应答因子、平滑肌肌动蛋白在食管鳞癌中表达及意义

目的：探讨食管鳞癌组织中血清应答因子（SRF）、平滑肌肌动蛋白（a—SMA）的表达及其与临床病理特征的关系。方法：采用免疫组织化学显色法检测73例食管鳞癌、30例手术切缘食管黏膜组织中SRF、c^-SMA的表达。结果：食管鳞癌组织中SRF、a-SMA的表达高于正常食管黏膜，与肿瘤的分化程度、浸润程度、淋巴结转移相关。结论：SRF、ccSMA在食管鳞癌中的异常高表达，可能是食管鳞癌组织侵袭和转移的重要调控机制之一，有可能成为一个潜在的治疗靶点。

甲醛对肝脏miRNA122及其下游解离素-金属蛋白酶10和血清应答因子的影响

目的:探讨甲醛对小鼠肝脏miRNA122及其下游解离素-金属蛋白酶10(a disintegrin and metalloproteinase 10,ADAM10)和血清应答因子(serum response factor,SRF)的影响.方法:将40只♀昆明小鼠随机分为3个甲醛染毒组(低浓度组、中浓度组和高浓度组)和1个对照组,每组10只.染毒组每日上午9:00腹腔注射不同浓度的甲醛溶液,对照组注射等量的生理盐水.30 d后,实时定量PCR检测(real-time quantitative PCR,q RT-PCR)法检测4组小鼠肝脏组织mi RNA122的表达情况;免疫组织化学法检测4组小鼠肝脏组织ADAM10和SRF的表达情况.结果:对照组、低浓度组、中浓度组、高浓度组小鼠肝脏miRNA122的相对表达量分别是0.99±0.005、0.94±0.074、0.72±0.062和0.38±0.091,各组之间有明显差异(F=22.988,P<0.01).与对照组相比,甲醛可明显降低肝脏中mi RNA122的表达,且呈浓度依赖关系;染毒组中ADAM10和SRF的表达均明显高于对照组(H=21.484,P=0.000;H=31.566,P=0.000).mi RNA122相对表达量与ADAM10及SRF阳性表达率均呈负相关(r=-0.975,P=0.025;r=-0.799,P=0.02).结论:甲醛染毒可以明显降低肝脏中mi RNA122的表达,且呈浓度依赖关系;并可能通过增加ADAM10、SRF蛋白的异常表达进而诱发肝癌.

棉花生长素应答因子克隆和序列分析

通过电子克隆和RACE相结合的方法,从陆地棉中克隆到一个新ARF基因。序列分析表明,该基因序列全长为2393其中包括87bp的5′非编码区(5′UTR),1941bp的蛋白质编码区,终止密码子TAA和362bp的3′非编码区。该基因可编码647个氨基酸的蛋白质,分子量为71.9kD,等电点(PI)为8.2。该基因含有一个与拟南芥中ARF基因相似的B3结构域和一个Auxin_resp结合位点,表明该基因与拟南芥ARF基因有很高的同源性,推测具有相似或相同的功能。