溶菌酶的活性检测方法

为解决现行溶壁微球菌（比浊）法测定溶菌酶活性方法中存在的测定条件不统一、重复性不高等问题。对该方法中4个主要影响因素——溶茵酶活性范围、底物悬浮液吸光度值范围、检测温度和茵体制备方法进行了研究，以得到最佳的检测条件及菌体制备方法。结果表明：（1）溶茵酶活性75-250U／mL之间，底物悬浮液吸光度值O．45-O．77（OD450）之间，酶活力曲线具有良好的线性关系，与国家药典中基本一致；（2）检测温度25-50℃之间，底物悬浮液的吸光度变化值△OD450随温度升高而增大，适当提高检测温度可提高检测的精度，有待进一步研究；（3）用于大规模样品检测时，冷冻茵体法为制备底物悬浮液的最佳方法，检测具有良好的线性关系、管间重复性及储存稳定性。