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紫金牛中一个新颖底物杂泛性O-甲基转移酶
1
作者
刘琦
闫锐琪
+4 位作者
谢冰寒
隋颂扬
解可波
戴均贵
杨林
《药学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期1372-1382,共11页
O-甲基转移酶(O-methyltransferases,OMTs)是许多天然产物生物合成途径中的关键后修饰酶之一,O-甲基化不仅可降低化合物的化学反应活性,而且能显著改善其溶解性、稳定性等理化性质和生物活性等。本研究根据紫金牛转录组测序结果,首次从...
O-甲基转移酶(O-methyltransferases,OMTs)是许多天然产物生物合成途径中的关键后修饰酶之一,O-甲基化不仅可降低化合物的化学反应活性,而且能显著改善其溶解性、稳定性等理化性质和生物活性等。本研究根据紫金牛转录组测序结果,首次从紫金牛中克隆获得1条OMT基因(命名为AjOMT1),并成功进行了大肠杆菌异源表达,体外酶催化活性结果表明重组AjOMT1能高效催化槲皮素发生O-甲基化反应。底物谱考察结果表明,AjOMT1能催化黄酮类、茋类、香豆素类、生物碱类、苯丙素类等不同结构类型的化合物进行甲基化反应,具有非常宽泛的底物谱;AjOMT1偏好于具邻二酚羟基的化合物,并表现出位置选择性。本研究结果表明,AjOMT1可用作O-甲基化工具酶实现不同类型化合物的O-甲基化、获取多样化的活性甲基化产物,可为药物发现提供新方法,并可为天然产物合成生物学研究提供普适性元件。
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关键词
紫金牛
O-甲基转移酶
O-甲基化
底物杂泛性
位置选择
性
原文传递
非核糖体肽Skyllamycin B生物合成中Ⅰ型硫酯酶底物杂泛性的初步研究
被引量:
1
2
作者
宋娟
于佳慧
+5 位作者
李安南
关梦铁
耿彤彤
张中义
杨东辉
马明
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第7期2374-2388,共15页
【背景】Skyllamycins是一类从链霉菌中发现的具有血小板生长因子抑制和生物膜抑制作用的非核糖体肽类,其环肽环合反应是由非核糖体肽合成酶中的硫酯酶功能域催化完成。【目的】克隆和表达Skyllamycin非核糖体肽合成酶最后一个模块中的...
【背景】Skyllamycins是一类从链霉菌中发现的具有血小板生长因子抑制和生物膜抑制作用的非核糖体肽类,其环肽环合反应是由非核糖体肽合成酶中的硫酯酶功能域催化完成。【目的】克隆和表达Skyllamycin非核糖体肽合成酶最后一个模块中的硫酯酶(Skyxy-TE)基因,合成Skyxy-TE底物类似物,通过体外催化实验表征Skyxy-TE的底物杂泛性。【方法】采用Ligation Independent Cloning(LIC)方法,从一株含有Skyllamycin B生物合成基因簇的链霉菌Streptomycessp.PKU-MA01239中克隆和表达skyxy-TE,通过镍离子柱亲和层析纯化Skyxy-TE。运用固相多肽合成法合成2个底物类似物1和2,进行Skyxy-TE的体外催化实验。【结果】通过对Skyxy-TE的表达纯化,获得了纯度较好的可溶性蛋白;通过固相多肽合成,得到了能够模拟Skyllamycin B底物类似物的化合物1和2,硫酯酶蛋白体外催化化合物1和2得到了化合物3和4,化合物3和4通过核磁共振和高分辨质谱确认为环肽。【结论】Skyllamycin B生物合成中Skyxy-TE表现出一定的底物杂泛性,可以识别底物类似物催化环化反应,该研究为将来利用化学-酶联法制备更多环肽类似物提供了依据。
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关键词
化学-酶联法
Skyllamycin
固相多肽合成法
底物杂泛性
硫酯酶
原文传递
题名
紫金牛中一个新颖底物杂泛性O-甲基转移酶
1
作者
刘琦
闫锐琪
谢冰寒
隋颂扬
解可波
戴均贵
杨林
机构
中央民族大学生命与环境科学学院
中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所
出处
《药学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期1372-1382,共11页
基金
国家自然科学基金资助项目(81573317)。
文摘
O-甲基转移酶(O-methyltransferases,OMTs)是许多天然产物生物合成途径中的关键后修饰酶之一,O-甲基化不仅可降低化合物的化学反应活性,而且能显著改善其溶解性、稳定性等理化性质和生物活性等。本研究根据紫金牛转录组测序结果,首次从紫金牛中克隆获得1条OMT基因(命名为AjOMT1),并成功进行了大肠杆菌异源表达,体外酶催化活性结果表明重组AjOMT1能高效催化槲皮素发生O-甲基化反应。底物谱考察结果表明,AjOMT1能催化黄酮类、茋类、香豆素类、生物碱类、苯丙素类等不同结构类型的化合物进行甲基化反应,具有非常宽泛的底物谱;AjOMT1偏好于具邻二酚羟基的化合物,并表现出位置选择性。本研究结果表明,AjOMT1可用作O-甲基化工具酶实现不同类型化合物的O-甲基化、获取多样化的活性甲基化产物,可为药物发现提供新方法,并可为天然产物合成生物学研究提供普适性元件。
关键词
紫金牛
O-甲基转移酶
O-甲基化
底物杂泛性
位置选择
性
Keywords
Ardisia japonica
O-methyltransferase
O-methylation
substrate promiscuity
regio-selectivity
分类号
R931 [医药卫生—生药学]
原文传递
题名
非核糖体肽Skyllamycin B生物合成中Ⅰ型硫酯酶底物杂泛性的初步研究
被引量:
1
2
作者
宋娟
于佳慧
李安南
关梦铁
耿彤彤
张中义
杨东辉
马明
机构
北京大学药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室
出处
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第7期2374-2388,共15页
基金
国家自然科学基金(21877002)
国家重点研发计划(2019YFC0312502)。
文摘
【背景】Skyllamycins是一类从链霉菌中发现的具有血小板生长因子抑制和生物膜抑制作用的非核糖体肽类,其环肽环合反应是由非核糖体肽合成酶中的硫酯酶功能域催化完成。【目的】克隆和表达Skyllamycin非核糖体肽合成酶最后一个模块中的硫酯酶(Skyxy-TE)基因,合成Skyxy-TE底物类似物,通过体外催化实验表征Skyxy-TE的底物杂泛性。【方法】采用Ligation Independent Cloning(LIC)方法,从一株含有Skyllamycin B生物合成基因簇的链霉菌Streptomycessp.PKU-MA01239中克隆和表达skyxy-TE,通过镍离子柱亲和层析纯化Skyxy-TE。运用固相多肽合成法合成2个底物类似物1和2,进行Skyxy-TE的体外催化实验。【结果】通过对Skyxy-TE的表达纯化,获得了纯度较好的可溶性蛋白;通过固相多肽合成,得到了能够模拟Skyllamycin B底物类似物的化合物1和2,硫酯酶蛋白体外催化化合物1和2得到了化合物3和4,化合物3和4通过核磁共振和高分辨质谱确认为环肽。【结论】Skyllamycin B生物合成中Skyxy-TE表现出一定的底物杂泛性,可以识别底物类似物催化环化反应,该研究为将来利用化学-酶联法制备更多环肽类似物提供了依据。
关键词
化学-酶联法
Skyllamycin
固相多肽合成法
底物杂泛性
硫酯酶
Keywords
chemoenzymatic synthesis
skyllamycin
solid-phase peptide synthesis
substrate promiscuity
thioesterase
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
Q93 [生物学—微生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
紫金牛中一个新颖底物杂泛性O-甲基转移酶
刘琦
闫锐琪
谢冰寒
隋颂扬
解可波
戴均贵
杨林
《药学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
原文传递
2
非核糖体肽Skyllamycin B生物合成中Ⅰ型硫酯酶底物杂泛性的初步研究
宋娟
于佳慧
李安南
关梦铁
耿彤彤
张中义
杨东辉
马明
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
1
原文传递
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