糖尿病大鼠额叶脑神经细胞中ERK1/2及其下游底物Elk-1磷酸化表达状态的研究

目的研究糖尿病大鼠额叶神经细胞中细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK1/2)、底物磷酸化ets样基因1(Elk-1)的磷酸化表达状态,以探讨糖尿病脑病的发病机制。方法应用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导制备糖尿病大鼠模型,通过组织学、免疫组化染色,对比观察糖尿病大鼠额叶脑组织的病理改变及神经细胞中磷酸化ERK1/2及下游作用底物Phospho-Elk-1的表达情况。结果制模后第4周和第8周,糖尿病组大鼠额叶脑皮质神经细胞中磷酸化-ERK1/2以及大鼠额叶脑皮质、灰质核团神经细胞中的磷酸化-Elk-1的阳性率均高于同期对照组以及第3天、第2周糖尿病组大鼠(P<0.05),糖尿病组大鼠第8周额叶脑皮质核团神经细胞中磷酸化ERK1/2和磷酸化Elk-1表达的阳性率高于第4周(P<0.05)。制模后第2、4、8周的糖尿病组大鼠的额叶脑灰质神经细胞中磷酸化ERK1/2阳性率均高于同期对照组和制模后第3天(P<0.05),且随着制模时间的延长,磷酸化ERK1/2阳性率逐渐增高(P<0.05)。结论糖尿病大鼠在制模后第4、8周额叶神经细胞中存在ERK1/2信号转导通路的异常激活。

糖尿病脾脏中央动脉中细胞外信号调节激酶磷酸化的初步探讨

目的研究链脲佐菌素诱导的1型糖尿病大鼠脾脏中央动脉的病理改变及细胞外信号调节激酶ERK1/2及其下游作用底物转录因子Elk-1的磷酸化状态,从而探讨糖尿病血管的发病机制。方法应用链脲佐菌素制备1型糖尿病大鼠模型,对比观察制模后0.5、2、4、8 w脾脏中央动脉病变,通过HE染色、免疫组织化学,运用光镜观察高血糖状态下脾脏中央动脉Phospho-P44/P42MAPK及下游作用底物Phospho-ELK-1MAPK的表达情况。结果运用HE染色镜下均可见糖尿病、正常组脾脏组织被膜完整光润,小梁动脉、中央动脉及其周围的淋巴鞘、淋巴小结等组成的白髓、红髓中的边缘带、脾索及脾窦结构均无异常;在免疫组化中Phospho-P44/P42MAPK、Phospho-ELK-1在高血糖各时间点组间相应正常血糖组脾脏中央动脉中均有不同程度的表达,在高血糖8、4 w组脾脏中央动脉中表达明显上调,分别与高血糖2、0.5 w组及相应时间点正常血糖组两两比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论在糖尿病8、4 w组SD大鼠脾脏中央动脉中存在ERK1/2信号转导通路的异常激活。

姜黄素对阿尔茨海默病模型小鼠胰岛素受体底物-1的影响

目的观察姜黄素对阿尔茨海默病模型APP/PS1双转基因小鼠胰岛素受体底物-1(IRS-1)和磷酸化胰岛素受体底物-1(p-IRS-1)表达的影响,探讨姜黄素神经保护作用机制。方法将3月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、罗格列酮组、姜黄素高(400 mg/kg)、中(200 mg/kg)、低(100 mg/kg)剂量组,并以同窝阴性小鼠作为正常对照组。连续灌胃6个月后,应用免疫组织化学、Western blot和RT-PCR法进行检测。结果免疫组化染色,模型组小鼠大脑海马CA1区IRS-1阳性细胞较正常组明显增加(P<0.01),与模型组相比,各干预组IRS-1阳性细胞数减少(P<0.05或P<0.01),p-IRS-1结果与IRS-1结果相反。Western blot检测海马IRS-1和p-IRS-1的蛋白表达结果与免疫组化检测结果一致。RT-PCR检测IRS-1 mRNA表达结果与免疫组化和Western blot结果一致。结论姜黄素可以使APP/PS1双转基因小鼠海马增加的IRS-1和减少的p-IRS-1得以恢复,并调节IRS-1mRNA表达,改善APP/PS1双转基因小鼠胰岛素信号转导,提示姜黄素可能通过调节胰岛素信号转导机制发挥抗阿尔茨海默病作用。

姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠海马IRS-1和p-IRS-1表达的影响

目的:观察姜黄素对AD模型APP/PS1双转基因小鼠胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)和磷酸化胰岛素受体底物-1(p-IRS-1)表达的影响。方法:将3月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、阳性对照罗格列酮组(10 mg.kg-1.d-1)、姜黄素高、中、低剂量组(400,200,100 mg.kg-1.d-1),正常对照组为相同背景非转基因小鼠。灌胃3个月后,应用免疫组织化学、Western blot和RT-PCR方法进行检测。结果:IRS-1和p-IRS-1免疫组化染色,模型组小鼠大脑海马CA1区IRS-1阳性细胞较对照组明显增加(P<0.01),p-IRS-1明显减少(P<0.01);与模型组相比,姜黄素各干预组可减少IRS-1阳性细胞数(P<0.05或P<0.01),并升高p-IRS-1阳性细胞数(P<0.05或P<0.01)。Western blot检测海马IRS-1和p-IRS-1的蛋白表达结果与免疫组织化学检测结果一致。RT-PCR检测IRS-1 mRNA表达结果与免疫组织化学和Westernblot结果相反。结论:姜黄素可以使APP/PS1双转基因小鼠海马增加的IRS-1和减少的p-IRS-1得以恢复,并增加IRS-1 mR-NA表达,改善APP/PS1双转基因小鼠胰岛素信号转导,提示姜黄素可能通过调节胰岛素信号转导机制发挥抗AD作用。

组织构建过程中的运动效应①：本刊中文部

1有氧运动对小鼠骨骼肌结节性硬化复合物蛋白2基因表达及胰岛素受体底物1丝氨酸磷酸化的影响．见2011年第7期1232—1236页。

2型糖尿病合并骨质疏松大鼠胰岛素信号通路相关基因表达的变化

雌激素减少和2型糖尿病对骨代谢的损害是非常明确的，两者对骨代谢的影响部分可能是通过减少骨质中胰岛素受体底物1、2（IRS-1、IRS-2）及胰岛素样生长因子1（IGF-1）起作用的。但雌激素减少是否会加剧2型糖尿病对骨代谢损害的作用仍不明确。因此，本研究旨在确定卵巢切除后长期高脂高糖饮食加小剂量链脲佐菌素（STZ）诱导的2型糖尿病大鼠的骨密度（BMD）是否较单纯卵巢切除大鼠或2型糖尿病大鼠降低更为明显、卵巢切除的2型糖尿病大鼠的胰岛素信号通路中重要分子（如IRS-1、IRS-2和IGF-1）的表达是否会明显降低。