响应面法优化金线鱼胃蛋白酶提取条件的研究(英文)

研究了鱼体体重对金线鱼胃蛋白酶总活力的影响,并利用响应面法对金线鱼胃蛋白酶的提取条件(提取温度、提取时间和pH值)进行了优化.研究表明:在金线鱼的胃中,蛋白酶活力和种类随着鱼体重的增加而增加;响应面法优化获得的最佳提取条件为:提取温度23℃、提取pH5、提取时间10 h,提取的胃蛋白酶活力可达到1 881 U/g.min.

草鱼消化道碱性蛋白酶的提取及鉴定

用丙酮将草鱼肠脱脂，磷酸盐缓冲溶液提取粗酶液，再用10％-40％饱和度的硫酸铵分级沉淀制取粗草鱼消化道碱性蛋白酶。粗草鱼碱性蛋白酶的比活力为2800U／g，最适作用温度为37℃，最适作用pH为10．3。在50℃保温30min后还保留60％以上的酶活力，要使其损失约80％的活力，需要在60℃保温30min。50mmol／L的甲苯磺酰赖氨酸氯甲酮（TLCK）、甲苯磺酰氟（PMSF）和50μmol／L大豆胰蛋白酶抑制因子（SBTI）分别抑制78．92％、75．98％和80．23％的酶活力。SDS-底物-聚丙烯酰胺凝胶电泳表明碱性蛋白酶的活性成分有4种，一种为非丝氨酸蛋白酶，相对分子质量为105000；另外三种为胰蛋白酶，相对分子质量分别为26400、30750和43000。