基于转录组揭示底酸促进巴氏醋杆菌产酸的分子机制

以低体积分数底酸启动巴氏醋杆菌CICC 20001发酵醋酸,采用转录组学方法探讨底酸促进巴氏醋杆菌产酸的分子机制。研究结果表明,以0.5%底物醋酸启动醋酸发酵时,醋酸菌产酸效率明显提高,并筛选到482个显著差异表达基因,包括424个上调基因和58个下调基因。其中,在发酵早期和中后期,分别有412个和70个显著差异表达基因。添加0.5%底物醋酸时,巴氏醋杆菌可能通过尿素代谢、丙酸代谢、醋酸同化代谢强化醋酸耐受性,减少发酵过程中醋酸对菌体的毒害性作用,提高产酸效率。此外,巴氏醋杆菌还可能通过强化信号转导、膜运输和能量代谢,为醋酸发酵过程中营养物质转运和能量转化提供重要保障。研究结果将为底酸促进巴氏醋杆菌产酸机制提供新的认识,为提高醋酸发酵效益提供理论依据。

杉木和香樟酸雨酸解底物的分解格局

采用凋落物分解袋法,选取湘西地区两种人工林优势树种(香樟和杉木)的凋落叶作为分解材料,分析了两种凋落叶经酸解处理后凋落物分解及其微生物活性的变化。结果表明:酸解处理过程会使两种凋落叶损失一定的质量,随着酸解强度的增加质量损失增加,且酸解处理对香樟凋落物质量损失的影响较杉木凋落物大。不同物种凋落物对酸解强度的差异性反应产生了后续分解过程的差异格局:酸雨酸解作用的增强抑制了杉木凋落物分解过程中包括真菌生物量以及纤维素酶与木质素酶在内的微生物活性;而对于香樟凋落物分解过程,微生物活性对酸雨酸解的响应因变量不同、分解期不同而存在差异性。两物种凋落物的总失重率、木质素和纤维素分解率对酸解作用的响应及其在不同分解期的表现也存在差异性:对于杉木凋落物,在分解前期其失重率表现为T1>T2>T3,而在后期随酸解强度的增大而升高,即T3>T2/T1;香樟凋落物在分解的前期(T1<T2<T3)与后期(T1>T2>T3)情况则正好与杉木凋落物相反。总之,酸雨酸解凋落物不仅使底物有机组成发生了变化,在一定程度上导致凋落物物理结构紧密程度改变,而且也可能相应地改变了凋落物定殖微生物群落,这些复合影响从不同程度上决定了凋落物分解及其微生物活性对凋落物底物酸解的响应。

装药尺寸对高氯酸铵/端羟基聚丁二烯底排药烤燃特性的影响

为研究装药尺寸对高氯酸铵(AP)/端羟基聚丁二烯(HTPB)底排药烤燃响应特性的影响,基于AP/HTPB两步分解反应机理,建立底排药柱烤燃计算模型。分别选取装药长度为72 mm和内孔直径为43~53 mm、内孔直径为43 mm和装药长度为72~90 mm的圆环柱状底排药,在1.0~10.0 K/min加热速率下对某底排装置的烤燃特性进行数值模拟。结果表明:在相同加热速率和装药长度条件下,随着装药内孔直径的增大,底排药的烤燃响应时间缩短;当装药内孔直径不变,装药长度增加至90 mm,底排药的烤燃响应时间明显缩短;装药尺寸的变化对底排药的烤燃响应位置的影响较小;在1.0~2.5 K/min中速烤燃条件下,随着内孔直径和装药长度分别增大,底排药的烤燃响应温度逐渐增大;在5.0~10.0 K/min快速烤燃条件下,装药尺寸的变化对底排药的烤燃响应温度的影响较小。

基底组织对酸蚀预处理工艺及金刚石薄膜特性的影响

采用原子吸收光谱(AAS)标准曲线法对YG系列硬质合金刀具酸蚀后浸蚀溶液中的Co浓度进行了定量测试;采用洛氏硬度(HRC)计跟踪测试了不同酸蚀时间后刀具硬度的变化;采用扫描电子显微镜(SEM)观察了硬质合金刀具酸蚀前后的组织变化及金刚石薄膜的组织形貌。结果表明:YG类硬质合金刀具基底含Co量越高,基底晶粒越粗大,酸蚀速度越快,酸对基底组织刻蚀能力越强;随着酸蚀时间的延长,硬质合金刀具硬度不断降低,YG6、YG6X、YG8刀具分别在刻蚀300秒、420秒、180秒后出现刀具硬度急剧下降。镀膜结果显示,YG6、YG6X刀具最佳酸蚀预处理时间分别为300秒和420秒;对于YG8刀具,只有增加酸蚀时间以消除或减弱Co的不利影响,但这将导致刀具机械性能显著下降。

胰岛素受体酪氨酸激酶底物生物学功能的研究进展

胰岛素受体酪氨酸激酶底物(IRTKS)是逆向-二重-两性蛋白-RVS超家族成员之一,广泛表达于机体各组织、细胞中。该蛋白能够促进肌动蛋白装配参与板状伪足的形成,并与多种肿瘤相关基因产物相互作用,抑制肿瘤细胞凋亡,促进肿瘤细胞增殖、迁移及侵袭;IRTKS作为胰岛素受体适配器,参与调控IR-IRS1-PI3K-AKT信号通路,最终实现对血糖水平的调节;IRTKS还可抑制抗RNA病毒免疫反应,并且与IRSp53共同调节正常的胚胎和胎盘发育;IRTKS在肠出血性大肠杆菌的致病机制中参与形成细菌定植的肌动蛋白底座,促进黏附/脱落损伤。

基于钽酸锂薄膜衬底的声表面波谐振器

在5G通信时代,声表面波(SAW)滤波器作为射频前端滤波器的一种重要解决方案,面临着频率提升和带宽拓展的双重困难,其性能优劣直接影响整个通信系统的质量.近年来,随着离子切片技术的成熟,压电单晶薄膜技术给SAW滤波器带来了新转机.与传统的42°Y切钽酸锂(LiTaO3)衬底相比,基于离子切片技术的同切型钽酸锂-二氧化硅-硅(42°Y-cut LiTaO3-on-insulator,42-LTOI)衬底能有效提升器件的性能.通过研究基于42-LTOI衬底的SAW谐振器的设计参数与其各性能指标(性能系数、机电耦合系数、寄生模式抑制)之间的关系,可以为进一步设计满足5G通信频段要求的SAW滤波器提供指导.通过理论分析、有限元仿真与实验测试相对比的方法,在谐振器优化设计方面得到以下结论:增加谐振器的电极对数或者电极孔径,能够有效提升器件的性能系数,其中增加电极对数的作用更为明显;在具有相同静态电容的谐振器中,电极孔径与电极对数的比值越小(即谐振器的形状在声波传播方向上越狭长),器件的性能系数越高;谐振器的机电耦合系数随电极周期增加呈现先增大后减小的趋势,在本实验使用的衬底参数下,当电极周期为1.8μm时,具有10.8%的理论最大值;谐振器的寄生模式响应会随电极对数的增加而逐渐增强,采用赝电极结构可以有效抑制寄生响应.

单/双磷酸化酪氨酸底物与蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B相互作用分子动力学研究

目的:探索双磷酸化酪氨酸底物与蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B(PTP1B)亲和能力比单磷酸化酪氨酸底物高的原因。方法:利用分子动力学模拟的方法来研究上述两种底物与PTP1B相互作用的差异。结果:双磷酸化酪氨酸底物和单磷酸化酪氨酸底物对PTP1B骨架运动影响模式相近。但双磷酸化酪氨酸底物可以增强底物与PTP1B的Asp48之间的形成氢键的概率。能量分解分析表明双磷酸化酪氨酸底物两个双磷酸化酪氨酸与PTP1B之间的强静电作用是导致双磷酸化酪氨酸底物与PTP1B相互作用能的主要原因。结论:双磷酸化酪氨酸底物与PTP1B比单磷酸化酪氨酸底物亲和力高的主要原因是双磷酸化酪氨酸底物与PTP1B中Asp48强氢键作用以及双磷酸化酪氨酸底物的两个双磷酸化酪氨酸与PTP1B之间的强静电作用。

醋酸菌生长的营养需求及产酸的促进作用研究

醋酸生产菌(沪酿1.01)液体发酵过程中菌体生长速度缓慢,发酵终点的菌体湿重仅有0.4%左右,但单位菌体量的乙醇氧化能力强、产酸率高,一般可达15.21克醋酸/克湿菌体。初始发酵培养基中外加1%～2%乙酸作为底酸,对菌体产酸速率有明显的促进作用。除醋酸外,丙酸和醋酸盐也有促进作用,而盐酸和磷酸无促进作用,这些结果表明,底酸的促进作用来自醋酸根。

巴氏醋酸杆菌沪酿1.01乙醇氧化产醋酸关键酶的研究

乙醇脱氢酶（ADH）和乙醛脱氢酶（ALDH）是巴氏醋酸杆菌乙醇氧化产醋酸的关键酶系。在分批发酵实验中,乙醇脱氢酶（ADH）和乙醛脱氢酶（ALDH）随时间呈动态变化,均于36h达到酶活峰值,分别为8.21U/mg和2.52U/mg,在整个过程中ADH的酶活始终高于ALDH。同时,酶系酶活较高时,产酸速率相应较高,酶活较低时,对应的产酸速率也较低。研究了底物乙醇对酶系的影响：在没有乙醇的发酵条件下,酶系的酶活水平较低,分别为0.38U/mg和0.28U/mg;1%~3%（v/v）乙醇浓度内,酶系酶活随着浓度的升高而升高,超过该范围,随着乙醇浓度的升高,酶活又开始受到抑制。研究了底酸对酶系的影响：在没有底酸的发酵条件下,ALDH酶活较低,ADH与ALDH的酶活之比最高达到了3.3倍（36h）;底酸的存在缩短了发酵时间,产酸速率加快,ADH和ALDH的酶活水平提高,ALDH的酶活最高达到了7.46U/mg。

从底槽液位的变化分析酸站各系统的工艺运行状况

从酸站酸浴底槽液位的变化判断酸站各系统的运行状况。分析了造成酸浴底槽液位下降或上升的原因,提出相应的解决办法。

肝细胞生长因子调节的酪氨酸激酶底物过表达促进心肌细胞自噬

目的:构建和包装携带肝细胞生长因子调节的酪氨酸激酶底物(Hgs)全长基因的重组腺病毒,并研究Hgs过表达对心肌细胞自噬的影响。方法:PCR扩增Hgs全长cDNA,将其连接到pMD18-T载体上,测序确认正确后将其克隆到腺病毒穿梭载体pAd Track-CMV,该载体线性化后转化大肠杆菌BJ5183感受态细胞,与腺病毒骨架质粒pAd Easy-1同源重组,构建重组腺病毒质粒pAd-Hgs;将pAd-Hgs线性化后经脂质体转染293A细胞进行Ad-Hgs病毒的包装与扩增;用得到的Ad-Hgs腺病毒感染心肌细胞,通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达,Western印迹、real-time PCR确认病毒感染的有效性以及Hgs过表达情况;通过Western印迹检测自噬标志物LC3的转换(LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ),以分析Hgs过表达对心肌细胞自噬的影响。结果:包装了携带Hgs基因的重组腺病毒Ad-Hgs;Ad-Hgs重组腺病毒感染心肌细胞后,荧光显微镜观察到明显的GFP表达;real-time PCR、Western印迹结果显示Hgs在心肌细胞中得到过表达;Western印迹结果证明,Hgs过表达导致心肌细胞LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值明显升高。结论:通过包装携带Hgs cDNA的重组腺病毒,发现Hgs过表达促进心肌细胞自噬。

硫酸罐刷罐方案及实施中问题的解决

车间2台300m3浓硫酸储罐由于项目建设需要刷罐、拆除扩建,车间编写了刷罐方案,但在方案实施过程中遇到了一些问题,车间技术人员根据现场实际情况,通过利用车间现有的化学药剂、根据化学反应原理在现场进行了各种小计量实验,摸索经验,不断完善方案、在保证安全的前提下,中和罐底酸泥,消除了酸泥对环境的污染及对污水厂的冲击。

血液污染对自酸蚀粘接系统剪切强度的影响

背景:自酸蚀粘接系统是近些年发展起来的口腔科粘接材料,研究表明其对唾液污染有很强的耐受性,对血液污染的情况研究甚少。目的:观察血液污染对自酸蚀粘接系统剪切强度的影响。设计、时间及地点:对比观察实验,于2008-01/02在石家庄市科技大学机械学院材料实验室完成。材料:将60颗因正畸原因拔除的健康双尖牙分成6组,每组10颗。方法:①磷酸酸蚀组:磷酸→树脂加强型玻璃离子粘接剂(resin-modifiedglassionomercement,RMGIC)。②自酸蚀底胶(self-eachingpriner,SEP)酸蚀组:SEP→RMGIC。③磷酸酸蚀后血液污染组:磷酸→血污染→RMGIC。④SEP酸蚀后血液污染组:SEP→血污染→RMGIC。⑤SEP酸蚀前血液污染组:血污染→SEP→RMGIC。⑥SEP酸蚀后污染再用SEP酸蚀组:SEP→血污染→SEP→RMGIC。主要观察指标:将粘接处理后的试件浸泡于37℃人工唾液中,24h后测量剪切强度并评价粘结剂残余指数。结果:磷酸酸蚀组、SEP酸蚀组和SEP酸蚀前血液污染组的粘接强度高于磷酸酸蚀后血液污染组、SEP酸蚀后血液污染组和SEP酸蚀后污染再用SEP酸蚀组(P<0.001)。磷酸酸蚀组去除托槽时粘结剂残余指数值多为2或3分;SEP酸蚀组多为1分和2分;被血污染组多为0分或1分,少部分为2分;SEP处理前污染组分散在0,1,2,3分。结论:血液污染降低了磷酸和SEP处理后的RMGIC粘接强度,但是SEP处理前污染的RMGIC剪切强度影响不显著。

调控酶解底物初始pH制备低聚木糖

研究在木聚糖酶定向酶解纯木聚糖及木聚糖碱抽提液制备功能性低聚木糖时 ,酸和缓冲溶液调控底物的初始 pH对低聚木糖的影响。结果表明 ,木聚糖酶在 pH 5.0左右的活力最高 ;酸调控纯木聚糖底物的低聚木糖得率低于缓冲溶液调控的低聚木糖得率 ,但两者相差不大 ;而当底物为木聚糖碱抽提液时 ,由于木素的存在 ,两种调控方式的低聚木糖得率相差较大 ,酶解液出现浑浊状态 ;酸调控纯木聚糖、木聚糖碱抽提液时 ,低聚木糖得率最高的初始 pH分别为 4.8、6.0。

MARCKS磷酸化对冷刺激诱导人气道上皮细胞MUC5AC分泌的影响

目的:构建豆蔻酰化富丙氨酸激酶C底物(MARCKS)磷酸化位点(PSD)突变体,并探讨瞬时受体电位M8离子通道(TRPM8)及MARCKS在冷刺激诱导黏蛋白(MUC)5AC合成及胞吐过程中发挥的作用。方法:利用PCR克隆全编码MARCKS目的基因,并通过定点突变技术将PSD的4个丝氨酸突变为天冬氨酸编码基因。将野生型及突变体cDNA亚克隆至pcDNA3.0载体后用酶切及DNA测序鉴定。以TRPM8特异性阻断剂BCTC、重组突变质粒转染人气道上皮16HBE细胞为干预手段,用免疫荧光及ELISA检测二者对冷空气刺激诱导的16HBE细胞合成及分泌MUC5AC的影响。结果:成功构建了pcDNA3.0-MARCKS重组质粒及pcDNA3.0-MARCKS-PSD突变体。冷刺激组胞内合成及分泌MUC5AC水平显著高于未刺激对照组(P<0.05)。与冷刺激组比较,BCTC可显著抑制由冷刺激诱导的MUC5AC合成及分泌(P<0.05);与冷刺激组比较,转染MARCKS-PSD突变cDNA可显著下调由冷刺激诱导的MUC5AC高分泌水平(P<0.05),同时胞内的MUC5AC水平与对照组比较呈现显著升高状态(P<0.01),而转染载体及野生型MARCKS对冷刺激诱导的MUC5AC胞内合成及胞外分泌水平无显著影响(P>0.05)。结论:TRPM8及MARCKS-PSD的磷酸化过程介导了冷刺激诱导气道上皮细胞内MUC5AC的胞吐过程。

高温高酸浸出在传统炼锌工艺中应用的研究

在常规湿法炼锌系统中,对部分酸性底流采用高温高酸浸出工艺技术提高锌浸出率,回用浸出的铁离子,从而取消辅料亚铁的加入和锰粉的消耗,降低生产成本。

酸化压裂技术在北特鲁瓦油田的应用

北特鲁瓦油田目的层为石炭系浅海台地相碳酸盐岩储层,位于滨,里海盆地东南缘,包括KT-I与KT-II两套含油层系,地质条件复杂且非均质性强。KT-I储层的原始地层压力为正常压力系统,地层温度55℃左右为中等地温系统。其H7井和H4井经过常规压裂改造后效果不理想。因此,针对北特鲁瓦油田储层及油藏特征,提出利用连续油管带底封拖动酸压技术,并且在H8水平井中得到成功应用,表明该技术适用于北特鲁瓦油田碳酸盐岩储层的改造,为后续北特鲁瓦油田碳酸盐岩储层的改造提供技术支持。

胃癌组织中MARCKS、HIF-1α的表达水平与临床病理特征的关系

目的分析胃癌组织中豆蔻酰化的富含丙氨酸的蛋白激酶C底物(MARCKS)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达水平与临床病理特征的关系。方法回顾性分析2020年7月至2021年7月陕西中医药大学第二附属医院收治的80例胃癌患者的临床资料,以手术切除采集其病灶组织及癌旁组织,检测胃癌组织和癌旁组织中的MARCKS、HIF-1α表达水平,比较胃癌组织和癌旁组织中MARCKS、HIF-1α表达阳性率;比较不同临床病理特征患者胃癌组织中MARCKS、HIF-1α表达阳性率。随访1年,比较胃癌组织中MARCKS阳性及阴性患者、胃癌组织中HIF-1α阳性及阴性患者无进展生存期(PFS)和1年生存率。结果Ⅲ期、Ⅳ期患者胃癌组织中MARCKS阳性率分别为91.67%、90.91%,HIF-1α阳性率分别为91.67%、100.00%,明显高于Ⅰ期、Ⅱ期患者[MARCKS阳性率分别为57.89%、61.54%,HIF-1α阳性率分别为63.16%、73.08%],差异均有统计学意义(P<0.05);中分化和低分化者胃癌组织中MARCKS阳性率分别为80.00%、91.67%,HIF-1α阳性率分别为88.00%、95.83%,明显高于高分化者的54.84%、61.29%,差异均有统计学意义(P<0.05);有淋巴结转移患者胃癌组织中MARCKS、HIF-1α阳性率分别为93.10%、96.55%,明显高于无淋巴结转移患者的62.75%、70.59%,差异均有统计学意义(P<0.05);肿瘤浸润至浆膜层患者胃癌组织中MARCKS、HIF-1α阳性率分别为89.19%、94.59%,明显高于未浸润至浆膜层患者的60.47%、67.44%,差异均有统计学意义(P<0.05);胃癌组织中MARCKS、HIF-1α表达阳性率分别为73.75%、80.00%,明显高于癌旁组织的38.75%、43.75%,差异均有统计学意义(P<0.05);胃癌组织中MARCKS、HIF-1α阳性和阴性患者PFS和1年生存率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论胃癌组织中MARCKS、HIF-1α表达与患者胃癌分期、肿瘤细胞分化程度、淋巴转移情况、肿瘤浸润深度密切相关,可考虑作为辅助制定胃癌患者临床治疗方案的参考指标。

Marcksl1基因敲除对小鼠成年造血的影响

目的建立造血系统特异性Marcksl1敲除小鼠,探究该基因敲除对小鼠成年造血的影响。方法对E15.5 Marcskl1敲除小鼠进行胎肝竞争性移植实验,分析胎肝移植后不同月龄小鼠外周血中成熟功能谱系血细胞的占比。流式分选胎肝KSL细胞,利用RNA-Seq分析该基因敲除后差异基因表达。利用CRISPR/Cas9技术,构建Marcksl1条件敲除小鼠,并与Vav1-Cre小鼠杂交,获得造血系统特异性Marcksl1敲除小鼠。利用PCR和Sanger测序鉴定基因型。利用Real-time PCR检测小鼠骨髓和造血干细胞中Marcksl1 mRNA的表达。利用流式细胞技术分析小鼠骨髓、外周血、脾和胸腺中不同类型造血细胞的占比。通过竞争性骨髓移植实验分析Marcksl1敲除对造血重建的影响。结果Marcksl1敲除造成胎肝移植后B细胞占比下降、髓系细胞占比升高,骨髓中CLP和CMP占比下降、GMP占比升高。RNA-seq结果显示该基因敲除后导致胎肝KSL细胞中252个基因上调,400个基因下调。GO结果显示差异基因主要富集在免疫应答、质膜以及低压门钙离子通道活性等相关基因。KEGG结果显示差异基因主要富集在造血谱系分化和细胞因子受体互作相关信号通路。我们利用CRISPR/Cas9技术成功建立造血特异性Marcksl1敲除小鼠。流式结果表明Marcksl1缺失不影响小鼠成年造血,但影响骨髓移植后的造血重建能力。结论成功建立造血系统特异性Marcksl1敲除小鼠。造血系统敲除Marcksl1基因,不影响成年稳态造血,但影响成年造血重建能力。我们建立的Marcksl1条件敲除小鼠,为该基因的成年造血功能研究以及该基因的其他组织特异性功能研究提供了动物模型。

非小细胞肺癌组织的MARCKSL1水平及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织的肉豆蔻酰化富含丙氨酸的C激酶底物样蛋白1(MARCKSL1)水平和临床意义。方法采用实时定量PCR(qPCR)检测92对NSCLC组织和癌旁组织的MARCKSL1水平,分层分析组织MARCKSL1水平与临床病理特征和预后关系,结合Cox比例风险模型进行多因素分析。结果NSCLC组织的MARCKSL1水平为2.890±1.042,高于癌旁组织的1.194±0.484(t=14.159,P<0.001)。组织MARCKSL1水平与肿瘤最大径、TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.05),且MARCKSL1低水平者的中位总生存期为58.0个月,优于高水平者的41.0个月(P<0.05);组织MARCKSL1水平升高是预后不良的危险因素(HR=2.154,95%CI:1.245~3.754,P=0.016)。结论NSCLC组织中异常高表达的MARCKSL1参与了该肿瘤的恶性进展且与不良预后有关,有望成为NCSLC防治的潜在靶点。