猪-猕猴延迟性异种移植排斥反应的发生机制

目的 :探讨猪 猕猴延迟性异种移植排斥反应 (DXR)的发生机制。方法 :建立湖北白猪 云南猕猴的腹腔异位心脏移植模型 ,应用中华眼镜蛇毒因子 (Y CVF)完全清除受者体内补体 ,并应用环孢素A(CsA)、环磷酰胺 (CTX)和甲泼尼龙 (M .P)三联免疫抑制治疗。检测血清C3、C4、抗猪内皮细胞天然抗体 ,免疫组化方法染色检测移植物中C3、C5b 9、IgG、IgM、细胞间黏附分子 1(ICAM 1)、肿瘤坏死因子 α(TNF α)、单核巨噬细胞 (CD6 8)、NK细胞 (CD5 7)、CD4 +T细胞和CD8+T细胞的表达。结果 :移植心存活时间分别为 8、10、13和 13天 ,血清C3和补体总活性均下降为 0 ,抗猪内皮细胞天然抗体水平在移植后则有一个更为明显的下降 ,在移植心失功前 2～ 4天开始天然抗体稍有回升 ,但较术前正常时仍明显偏低。移植心有程度不等的C3、C4、C5b 9、IgG及IgM沉积 ,大量的单核细胞 (5 0 % ) ,少量的NK细胞 (8%～ 10 % )、CD4 +T细胞 (15 % )和CD8+T细胞(2 5 % )。移植物血管内皮细胞表面出现ICAM 1的表达上调 ,移植物间质中出现TNF α的表达增加。结论 :体液免疫和细胞免疫参与猪 猕猴DXR排斥反应的发生。

延迟性异种移植排斥反应机制及其对策研究进展

延迟性异种移植排斥反应是目前影响异种移植走向临床的主要免疫学障碍,其反应机制尚未完全清楚。目前研究认为主要与异种反应性抗体的结合、内皮细胞的激活及NK细胞的活性等相关,由此发展出了与之对应的一系列策略。本文就近年来延迟性异种移植排斥反应机制及其应对策略作一综述。

单核细胞、NK细胞和T细胞在猪-猕猴延迟性异种移植排斥反应中的作用

目的 观察单核细胞、NK细胞和T细胞在猪 猕猴延迟性异种移植排斥反应 (DXR)中的作用。方法 建立湖北白猪 云南猕猴的腹腔异位心脏移植模型 ,实验分为 2组 :对照组 (n =5 ) ,不使用中华眼睛蛇毒因 (Y CVF) ;实验组 (n =4)应用Y CVF完全清除受者体内补体。 2组受体猴均采用环孢素A(CsA) ,环磷酰胺 (CTX)和甲基强的松龙 (MP)三联免疫抑制治疗。免疫组织化学方法检测移植心组织中细胞间黏附分子 (ICAM ) 1、肿瘤坏死因子 (TNF) α、单核细胞、NK细胞和T细胞的表达。结果 对照组 3个移植心在 15～ 60min内发生超急性排斥反应 (HAR) ,另 2个分别存活 2 2h及 6d ,移植心均未见明显的炎性细胞浸润及ICAM 1和TNF α的表达。实验组移植心存活时间分别为 8、10、13和 13d ,移植物浸润细胞中可见大量的单核细胞 (5 0 % ) ,少量的NK细胞 (8%～ 10 % ) ,CD4+ T细胞 (15 % )和CD8+ T细胞 (2 5 % )。移植物血管内皮细胞表面出现ICAM 1的表达上调 ,移植物间质中出现TNF α的表达增加。结论 单核细胞、NK细胞和T细胞介导的移植物损伤 ,在应用Y CVF处理的猪 猕猴DXR发生中发挥重要作用。

HO-1在延迟性异种心脏移植排斥反应中的表达及意义

目的:探讨血红素氧合酶-1在延迟性异种心脏移植排斥反应中的表达及意义.方法:建立NIH Wistar颈部异位心脏移植模型,分别于移植前、移植后1h、6h、12h、24h、48h和72h切取移植心脏,应用RT-PCR、Western Blot检测HO-1mRNA、HO-1蛋白表达并检测HO 1酶活性;同时比较钴原卟啉(CoPP)诱导HO-1对延迟性异种心脏移植排斥反应的影响.结果:移植心脏均有HO-1表达,HO-1mRNA(t=2.5170,P＜0.05)、HO-1蛋白表达(t=2.3702,P＜0.05)及酶活性(t=2.246,P＜0.05)移植术后24～48h表达到达高峰;CoPP诱导的HO-1明显延长了移植心脏的存活时间(t=4.74442,P＜0.001).结论:HO-1表达在延迟性异种心脏移植后24～48h到达高峰;CoPP诱导的HO-1能延长延迟性异种心脏移植的存活时间.

信号传导蛋白和转录激活物3参与调节大鼠异种心脏移植延迟性排斥反应

目的探讨信号传导蛋白和转录激活物3（STAT3）在异种移植延迟性排斥反应（DxR）中的作用。方法构建小鼠供大鼠异种心脏移植模型，实验分为5组，空白对照组、移植组、DPP组[移植后给予STAT3磷酸化抑制剂5，15-Diphenylporphyrin（DPP）]、环孢素A（CsA）组（移植后给予CsA）、DPP＋csA组（移植后给予DPP＋CsA），采用免疫组织化学及蛋白质印迹法检测心肌组织中磷酸化STAT3（p-STAT3）的表达，采用实时荧光定量聚合酶链反应检测心肌组织中STAT3下游靶基因的表达，观察各组移植心的存活时间。结果随着移植时间的延长，移植心肌组织中p-STAT3的表达明显增加（P〈0．05）。与移植组比较，DPP及CsA处理可明显抑制p-STAT3的表达，延长移植心的存活时间（P〈0．05），二者具有协同效应；DPP及CsA处理可显著抑制STA T3靶基因Bcl—xl、Bcl-2、Cyclin D1、C-myc及血管内皮生长因子（VEGF）的表达（P〈0．05），DPP＋CsA处理可进一步抑制各靶基因表达。结论STAT3在异种移植心脏中持续活化，可能通过上调Bcl—x1、Bcb2、cyclinD1、C-myc及VEGF等相关基因表达，促进血管内皮细胞的增殖，并抑制其凋亡，在内皮细胞激活及DXR的发生中发挥重要作用。

供体血管内皮细胞对小鼠-大鼠移植心脏存活时间的影响

目的探讨供体血管内皮细胞对小鼠-大鼠移植心脏存活时间的影响。方法分离小鼠血管内皮细胞并于移植前14d注入大鼠阴茎背静脉2×106细胞/只或联合注射环磷酰胺20mg/kg.d。异位小鼠-大鼠心脏移植后观察供心存活时间。结果成功分离小鼠血管内皮细胞,注射小鼠血管内皮细胞14d后,移植心脏平均存活时间(10±1.414)min,组化染色显示供心有IgM、C3沉积,血浆IgM、IgG、C3、C4较未注射血管内皮细胞组明显增高;联合使用环磷酰胺能延长供心成活时间(19.44±2.6034)min(t=2.880,P<0.01)。结论外周静脉注射供体血管内皮细胞不能诱导延迟性异种移植排斥反应(DXR)的免疫耐受,却促使发生HAR。联合环磷酰胺可延长供心存活时间。