表达A型产气荚膜梭菌FBA蛋白的延迟裂解型沙门菌载体的构建

利用PCR技术扩增FBA基因序列，并将其克隆到表达栽体pET-30a（＋）中，获得pET-30a—FBA重组质粒。将重组质粒转化到BL21感受态细胞中，经IPTG诱导表达His—FBA蛋白，通过His—tagNi柱亲和层析纯化后，免疫新西兰大白兔制备FBA特异性多克隆抗体。再利用PCR技术将FBA基因与表达载体pYA3681连接，构建了表达载体pYA5129，电转至延迟裂解性沙门菌x11802后以制备的FBA多抗为一抗进行免疫印迹试验，验证了其免疫原性；同时比较了不同浓度阿拉伯糖对重组沙门菌生长性能的影响，优化了阿拉伯糖最佳添加浓度，为后续研究其作为肉鸡坏死性肠炎疫苗的可行性奠定基础。