开口箭总皂苷的含量测定

目的建立开口箭中总皂苷含量测定方法。方法采用比色法：香草醛-冰醋酸溶液为发色体系，检测波长为（458±2）nm。结果标准曲线在0．10～0．40mg范围内（r=09997）线性关系良好。平均回收率97．2％，方法的变异系数为4．57％，测得开口箭70％乙醇提取物中总皂苷平均含量为13．51％。结论方法简便，准确，重现性好，可用于开口箭总皂苷含量测定。

筒花开口箭4个居群的染色体核型分析

目的:确定筒花开口箭4个居群的染色体数目、倍性、核型公式及类型等特征,并初步讨论开口箭属和万年青属的关系。方法:以筒花开口箭4个居群根尖为材料,采用常规制片方法,进行染色体核型分析。结果:4个居群的染色体核型公式均为2n=2x=38=28m+8sm+2st,染色体基数x=19,核型类型均为2B型。染色体长度组成差异不大,核型不对称系数均为60%左右。结论:筒花开口箭在进化中属于比较原始的类型,与万年青属植物万年青染色体核型相似,开口箭属植物筒花开口箭和万年青属植物万年青亲缘关系非常近,推测筒花开口箭可能是开口箭属植物向万年青属植物进化的过渡类群。

开口箭属一新种及其核型和花粉形态

文章报道了新种屏边开口箭T.pingbianensis J.L.Huang et X.Z.Liu及其核型和花粉形态。屏边开口箭的核型公式为2n=38=14m+10sm+8st+6t,具明显的二型性,属3C型。花粉粒为球形,无萌发孔沟,外壁具皱块状纹饰。从花结构、核型和花粉形态上看,屏边开口箭和伞柱开口箭T.fungilli-formis Wang et Liang亲缘关系近,而且伞柱开口箭比屏边开口箭在一系列特征上都较特化。

开口箭提取物的抗肿瘤作用研究

目的:研究开口箭正丁醇提取部位Z1和Z2,以及总皂甙的体内外抗肿瘤作用。方法:测定Z1、Z2和总皂甙灌胃8天对S180荷瘤小鼠肿瘤重量的抑制作用;MTT法或CCK-8法测定Z1、Z2、以及总皂甙对培养的HepG2和S180细胞增殖的抑制作用。结果:Z10.75 g/kg和1.5 g/kg对S180肿瘤重量的抑制率分别为24.9%和31.5%(P<0.05),但1.5 g/kg给药有30%动物死亡。Z22.0 g/kg和4.0 g/kg的抑制率分别为44.8%(P<0.01)和51.0%(P<0.01),总皂甙0.5 g/kg和1.5 g/kg的抑制率分别为34.5%(P<0.01)和52.2%(P<0.01),均无动物死亡。Z1抑制HepG2和S180细胞生长的IC50分别为33.77μg/m l和22.59μg/m l;Z2的IC50分别为131.20μg/m l和100.38μg/m。l总皂甙对HepG2细胞有强的细胞毒活性,IC50为4.92μg/m。l结论:开口箭提取物Z1、Z2以及总皂甙均有显著的体内、外抗肿瘤作用。

开口箭皂甙抑制小鼠S-180肉瘤细胞增殖及实体瘤生长的实验研究

目的研究开口箭皂甙(STCB)体内外抗S-180肉瘤活性的强度及其作用机制。方法MTT法检测S-180细胞的增殖程度;制备昆明种小鼠S-180移植实体瘤模型,观察STCB的抑瘤作用;光镜和电镜下观察药物作用后S-180细胞形态及超微结构变化;以不同浓度STCB处理S-180细胞,经碘化丙啶染色后应用流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡情况。结果STCB体外明显抑制S-180细胞增殖,IC50为34.64μg/ml。经灌胃给药,STCB对荷S-180实体瘤小鼠表现出良好的抑瘤作用,低剂量(0.5g/kg体质量)时,抑瘤率已超过30%,高剂量(2g/kg体质量)时,抑制率达到54.86%。电镜观察和FCM检测证明肿瘤细胞凋亡率随STCB浓度增加而增加。STCB的浓度为10和30μg/ml时,S期细胞百分率上升,G2/M期细胞百分率下降;当STCB的浓度达到60μg/ml,G0/G1期细胞百分率下降,G2/M期细胞百分率上升;提示低浓度STCB阻止S-180细胞从S期进入G2期;高浓度时,STCB还干扰S-180细胞的有丝分裂。结论STCB在体内外对S-180肉瘤细胞均有抑制作用,其作用机制与诱导肿瘤细胞的凋亡和干扰细胞周期有关。

开口箭提取物对采后香蕉抗炭疽病菌活性的研究

为探讨植物提取物对香蕉采后病害的防治,采用孢子萌发法和菌丝生长速率测定百合科植物开口箭的甲醇提取物及其乙酸乙酯分部萃取物和正丁醇分部萃取物对香蕉炭疽病菌的离体抗菌活性,选用正丁醇分部萃取物进行耐高温(121℃处理20 min)、紫外光照射(30 W紫外灯距50 cm直射15 h)和酸处理(调节pH 3)的抗菌稳定性研究,并进行了提取物处理香蕉的贮藏防病试验。结果表明,开口箭甲醇提取物及其乙酸乙酯分部萃取物和正丁醇分部萃取物抑制香蕉炭疽病菌孢子萌发的半效应浓度(EC50)分别为1490.27,638.40,1112.65μg/mL,抑制香蕉炭疽病菌菌丝生长的EC50分别为1262.16,451.02,955.58μg/mL,正丁醇分部萃取物的抗菌活性不受热、紫外线和酸等因子的影响,用开口箭提取物处理采后香蕉果实,具有明显降低其潜伏性炭疽病发病率的作用。

开口箭酸性多糖对小鼠免疫功能的调节作用及抗肿瘤作用的初步研究

目的:初步探讨开口箭酸性多糖TCBAPⅡ的免疫调节作用及其抗肿瘤的作用机制。方法:采用DEAE-Sepharose fast flow柱层析分离开口箭酸性多糖,MTT法检测免疫细胞活力,ELISA法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)、白介素2(IL-2)的含量,动物移植性实体瘤的瘤重实验法研究对S180荷瘤小鼠的抑瘤作用,鸡红细胞吞噬法检测S180荷瘤小鼠巨噬细胞的吞噬功能。结果:TCBAPⅡ(200、100、50μg/mL)可显著促进小鼠脾细胞的活力及促进脾细胞分泌TNF-α,但对IFN-γ、IL-2的分泌无明显影响;显著增强腹腔渗出细胞活力,促进腹腔渗出细胞分泌TNF-α。TCBAPⅡ(200、100 mg/kg)能显著抑制S180荷瘤小鼠肉瘤的生长,提高荷瘤小鼠血清TNF-α的含量。TCBAPⅡ(200、100、50 mg/kg)能显著增强荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞(CRBC)的吞噬率和吞噬指数。结论:TCBAPⅡ能增强小鼠巨噬细胞吞噬功能,促进TNF-α的分泌,抑制S180荷瘤小鼠肿瘤生长,提示TCBAPⅡ可能通过活化或增强巨噬细胞的功能,促进TNF-α的分泌发挥抗肿瘤作用。

开口箭提取物对荔枝霜疫霉菌的抑制作用及其对荔枝果实的贮藏效果

目的寻找植物源抗菌物质用于果蔬采后病害的控制。方法对开口箭(Tupistrachinensis)根茎甲醇提取物进行了液-液分部萃取,利用生长速率法和果实接种病原菌的方法测定了提取物(萃)对荔枝霜疫霉菌(Peronophythoralitchii)的离体与活体抗菌活性,并用提(萃)取物处理荔枝进行了贮藏试验。结果开口箭甲醇提取物及其乙酸乙酯分部萃取物和正丁醇分部萃取物抑制荔枝霜疫霉菌菌丝生长的EC50分别为1598.10、662.86和1147.31μg.ml-1,用甲醇提取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物溶液处理,荔枝果实接种感病率明显降低,并且上述提(萃)取物具有防治荔枝贮藏病害发生和延缓主要品质性状劣变的作用。结论开口箭甲醇提取物及其乙酸乙酯分部萃取物和正丁醇分部萃取物对荔枝霜疫霉菌具有明显的离体和活体抗菌活性,对荔枝果实具有较好的贮藏效果。

开口箭与筒鞘蛇菰提取物醒酒作用的实验研究

目的探讨开口箭、筒鞘蛇菰提取物的醒酒作用。方法采用行为学指标,探讨酒精对小鼠的致醉量及开口箭、筒鞘蛇菰提取物对急性酒精中毒小鼠的翻正反射和自发活动的影响。结果39度白酒对小鼠的致醉量为0.34 m l.(20 g)-1;小鼠给酒致醉后,开口箭、筒鞘蛇菰提取物对其翻正反射维持时间的影响明显,与模型组相比有显著性差异(P<0.05)。自发活动实验显示,开口箭、筒鞘蛇菰醇提取物的醒酒效果均比水提取物的效果要好。结论开口箭、筒鞘蛇菰提取物具有醒酒作用,值得进一步研究。

开口箭甾体皂甙元的分离鉴定及其抗荔枝霜疫霉菌活性

在以荔枝霜疫霉菌为指示菌的生物活性测定导向跟踪下,运用TLC、硅胶柱层析、反相硅胶柱层析和凝胶柱层析等分离纯化方法,从开口箭(Tupistra chinensis)甲醇提取物的乙酸乙酯分部萃取物中分离纯化得到2个抗菌化合物。经现代光谱(MS、IR、1D NMR和2D NMR)分析,确定化合物1为1β,2β,3β,4β,5β,7α-六羟基螺甾-25(27)-烯-6-酮,化合物2为螺甾-25(27)-烯-1β,2β,3β,4β,5β,6β,7α-七醇。离体抗菌活性测定化合物1和化合物2抑制荔枝霜疫霉菌(Peronophythora litchii)孢子囊萌发的EC50分别为100.28 mg.mL-1和124.37 mg.mL-1。用质量浓度为500 mg.mL-1的两个化合物分别处理后接种霜疫霉菌,供试荔枝果实的发病率分别为16.7%和18.9%。

开口箭不同提取部位对异丙肾上腺素致小鼠心肌缺血损伤的影响

目的:研究开口箭不同提取部位对异丙肾上腺素(ISO)致小鼠心肌缺血损伤的保护作用。方法:将105只小鼠随机分为正常组、模型组、开口箭石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水部位组和地奥心血康组;各给药组分别灌胃给予相应的药物,正常组及模型组给予等容量的0.5%CMC-Na灌胃,给药7d后,随后3d在给药后30min,模型组、开口箭提取物组和地奥心血康组皮下注射ISO 5.0mg/kg,正常组则皮下注射同体积的生理盐水。给药结束次日取血处死小鼠,测定心脏脏器指数;左心室匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)水平;血浆中谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同功酶(CKMB)、羟丁酸脱氢酶(HBDH)活力,另取心脏组织,分别进行心脏组织形态学和超微结构分析。结果:开口箭不同提取部位均可显著逆转ISO升高的心脏脏器指数,心肌中异常的MDA含量及SOD、GSH-Px水平,明显降低血液中升高的AST、LDH、HBDH、CK、CKMB水平,降低心肌炎性浸润、溶解坏死和胶原纤维面积,与模型组比较,开口箭正丁醇和乙酸乙酯部位均具有统计学差异(P<0.05,P<0.01),其治疗效果与地奥心血康相当;石油醚部位在改善HBDH、SOD等方面有统计学差异(P<0.05);水部位除LDH、CK、GSH-Px外,均具有统计学差异(P<0.05)。结论:开口箭不同提取部位对ISO致小鼠心肌缺血损伤具有较强的保护作用,其作用效果由强至弱依次为:开口箭正丁醇部位、乙酸乙酯部位、水部位和石油醚部位。

开口箭提取物治疗急性咽炎的实验研究

目的:评价开口箭对急性咽炎的治疗效果并筛选其有效部位。方法:采用15%氨水局部刺激建立大鼠急性咽炎模型,通过测定血常规以及炎症介质PGE2评价开口箭提取物抗急性咽炎作用。结果:开口箭甲醇总提物、正丁醇萃取物以及水相总皂苷高剂量组大鼠血液中的白细胞及粒细胞数明显少于模型组,开口箭甲醇总提物、正丁醇萃取物以及水相总皂苷均能显著抑制PGE2的释放。结论:开口箭提取物对急性咽炎有良好的治疗效果,其抗炎作用与其能抑制炎症介质PGE2的合成与释放有关。

开口箭中甾体皂甙元含量的测定

利用香草醛-高氯酸作为显色剂,使用可见分光光度法测定了神农架民间习用药物开口箭中 甾体皂甙元的含量.

开口箭与筒鞘蛇菰提取物醒酒作用机制的研究

目的探讨开口箭、筒鞘蛇菰提取物的醒酒作用机制。方法以康华酒友解酒晶作为对照,采用白酒灌胃造模,分别检测给药组和对照组小鼠肝脏乙醇脱氢酶(Alcohol dehydrogenase,ADH)、乙醛脱氢酶(Aldehyde dehydrogenase,AL-DH)、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)活力。结果开口箭、筒鞘蛇菰提取物及复方组ADH,ALDH,SOD,GSH-Px活力均比模型对照组要高,具有统计学意义。结论开口箭、筒鞘蛇菰提取物可以提高ADH,ALDH,SOD,GSH-PX的活性,加快乙醇在体内的代谢,减少自由基在体内的蓄积,降低脂质过氧化物的含量,从而起到保肝护肝的作用。

开口箭属植物研究进展

本文综述了开口箭属植物在组织学、花粉形态、染色体组型、化学成分及药理作用等方面的研究进展,并对开口箭属植物的发展前景作了展望。

弯蕊开口箭中的新甾体配糖体

从百合科植物弯蕊开口箭 (TupistrawattiiHook .f .)的根茎中分离得到 4个新的甾体配糖体 ,分别命名为弯蕊苷 (wattoside)B -E (1- 4 )。其中 ,3个为多羟基呋甾烷型配糖体 ,另1个为强心苷。经化学降解和光谱分析 ,其化学结构分别鉴定为 :2 2 -O -甲基 - 2 5 (R ,S)-呋甾烷 - 1β ,3β ,4 β ,5 β ,2 2 ξ,2 6 β -六醇 - 2 6 -O - β -D -葡萄吡喃糖苷 (1) ;2 2 -O -甲基 - 2 6 -O - β -D -葡萄吡喃糖基 - 2 5 (S ) -呋甾烷 - 5 -烯 - 1β ,3β ,2 2 ξ ,2 6 β -四醇 - 3-O-〔O - β -D -葡萄吡喃糖基 (1- 4 )〕 - β -D -半乳吡喃糖苷 (2 ) ;2 2 -O -甲基 - 2 5 (S)-呋甾烷 - 1β ,2 β ,3β ,4 β ,5 β ,2 2 ,2 6 β -七醇 - 2 6 -O - β -D -葡萄吡喃糖苷 (3)和夹竹桃苷元 - 3-O -〔O - β -D -葡萄吡喃糖基 (1- 2 )〕 -α -L -鼠李吡喃糖苷。弯蕊苷E为开口箭属植物中首次分离到的强心苷。

开口箭皂苷对人神经胶质瘤细胞作用及相关机制研究

目的探讨开口箭皂苷体外对人神经胶质瘤U251细胞的作用和其相关机制。方法开口箭皂苷作用于U251细胞后检测其IC50值。溶血实验观察开口箭皂苷对细胞膜的影响。提取U251细胞的DNA分析条带。RT-PCR技术检测开口箭皂苷对U251细胞的bax和bc l-2基因表达的影响。利用激光共聚焦显微技术研究开口箭皂苷对U251细胞内游离钙浓度和pH值的影响。结果开口箭皂苷对U251细胞的IC50值为8.5μg/m l。不能引起肉眼可见的溶血现象。开口箭皂苷诱发了肿瘤细胞的凋亡,并引起了bax基因表达量的升高和bc l-2基因表达量的下降,并可引起U251细胞内游离钙浓度和pH值的降低。结论开口箭皂苷体外可以诱导U251细胞凋亡,其机制可能与上述实验结果有关。

开口箭皂苷体外抗肿瘤作用的初步实验研究

目的通过体外细胞培养技术,探讨开口箭皂苷的细胞毒活性及其机制,为进行深层次研究提供依据。方法MTT比色法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡。结果MTT结果显示,开口箭总皂苷、30%皂苷和70%皂苷对Hela和HepG2细胞的抑制作用显著,与阴性对照组相比有非常显著性差异(P<0.005)。开口箭总皂苷、30%皂苷和70%皂苷和环磷酰胺对Hela细胞IC50分别为1 372.92,3 138.51,729.72,3 459.08μg/m l;对HepG2细胞IC50分别为1 221.39,2 657.53,562.70,3 668.51μg/m l。流式细胞仪检测结果显示,开口箭总皂苷、30%总皂苷在浓度为2 500μg/m l时,70%总皂苷和环磷酰胺在浓度为1 250μg/m l时主要将Hela细胞细胞周期阻滞于S期,且能够诱导肿瘤细胞凋亡。结论开口箭皂苷对Hela和HepG2细胞较环磷酰胺具有明显的抑制作用,其中对HepG2细胞株较为敏感,且能将Hela细胞细胞周期阻滞于S期从而诱导Hela细胞凋亡。

开口箭皂苷抗炎活性的研究

目的评价开口箭总皂苷的抗炎活性。方法采用系统溶剂萃取,运用角叉菜胶所致小鼠足肿胀模型和脂多糖刺激小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮细胞模型对开口箭不同提取部位的抗炎活性进行研究。结果开口箭水溶性浸膏、正丁醇萃取物、石油醚萃取物对角叉菜胶所致小鼠足肿胀及肿胀足中前列腺素E2含量升高均具有显著抑制作用(P<0.01)。其总皂苷经大孔树脂吸附,30%,70%,95%乙醇洗脱,各洗脱部分对脂多糖刺激腹腔巨噬细胞产生NO均有显著抑制作用(P<0.01)。结论开口箭具有良好的抗炎作用,具有良好的开发利用价值。皂苷是其抗炎的重要物质基础之一。抑制炎症介质PGE2,NO的产生是其作用机理之一。

开口箭不同提取部位对异丙肾上腺素致小鼠心肌肥厚的保护作用

目的研究开口箭不同提取部位对异丙肾上腺素(ISO)诱导的小鼠心肌肥厚的影响及其作用机制。方法采用皮下注射ISO致小鼠心肌肥厚模型,分别用开口箭不同提取部位和卡托普利灌胃给药,每天1次,连续14 d。于末次给药的次日进行实验,计算小鼠全心重量指数和左心重量指数,观察心肌病理学改变;测定心肌组织中羟脯氨酸(Hyp)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧物酶(GSH-Px)活性,丙二醛(MDA)含量,一氧化氮合酶(NOS)活性和一氧化氮(NO)含量,心肌细胞直径和横截面积、心肌间质胶原容积分数。结果与正常组相比,模型组小鼠心脏重量指数、心肌组织中iNOS活性和MDA、Hyp、NO含量明显升高,SOD、GSH-Px和cNOS活性显著降低,心肌细胞直径和横截面积、心肌间质胶原容积分数明显增加(均P<0.01)。经开口箭4个不同提取部位治疗后,上述异常的指标得到了明显改善,与模型组比较,开口箭正丁醇和乙酸乙酯部位均具有显著性差异(P<0.05和P<0.01),其作用效果与卡托普利相当;石油醚部位在改善SOD、Hyp、cNOS、NO和心肌横截面积、心肌间质胶原容积分数等方面有显著性差异(P<0.05);水部位除GSH-Px、iNOS和心肌细胞直径外,均具有显著性差异(P<0.05)。结论开口箭不同提取部位对ISO致小鼠心肌肥厚具有较强的保护作用;在开口箭的4个提取部位中,其作用效果以正丁醇部位最为显著,其余依次为乙酸乙酯部位、水部位和石油醚部位。实验结果表明,清除自由基、抗脂质过氧化及逆转NOS系统异常的表达水平,提高机体的抗氧化能力可能是其抗心肌肥厚的作用机制之一。