开心散类方配伍及抗抑郁作用研究

目的:探索记载于《太平惠民和剂局方》、《千金要方》、《古今录验》中开心散类方的抗抑郁作用。方法:根据三首方剂的配比,采用分煎组合和合煎提取两种方法,以经典抗抑郁模型———小鼠强迫游泳模型和小鼠悬尾模型进行观察,对小鼠的不动时间进行统计学分析。结果:三本医书中药物相同而比例不同的开心散类方剂均可不同程度降低小鼠强迫游泳及小鼠悬尾不动时间,其中以《太平惠民和剂局方》所记录的“开心散”作用最好,且合煎组优于分煎组,其中合煎低剂量组与对照组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:三首方剂均有一定的抗抑郁作用,以《太平惠民和剂局方》所记载方剂的作用最好,且合煎提取的作用效果优于分煎提取。

开心散类方对慢性应激大鼠行为学及中枢单胺类神经递质的影响

开心散类方治疗抑郁症的疗效已得到多项研究证实,为研究组方相同、配比不同的6个开心散类方对慢性应激大鼠大脑单胺类神经递质的影响,并结合类方的入血成分差异,比较其抗抑郁作用,探讨药效-配伍的关系及可能的药效机制。利用经典孤养结合慢性不可预知性温和应激(CUMS)抑郁模型,并建立HPLC和UPLC-Q-TOF-MSE检测方法,研究大鼠海马和皮层单胺类神经递质(NE,DA,5-HT)的含量变化和部分类方的入血成分。结果显示,《备急千金要方》之定志小丸显著增加了模型大鼠的行为学得分,并且明显增加了模型大鼠海马NE,5-HT的含量以及皮层NE,DA,5-HT的含量,抗抑郁作用最显著;《古今录验》之定志丸明显增加了模型大鼠的糖水偏嗜度和旷场得分,显著增加了模型大鼠海马NE的含量以及皮层NE,DA,5-HT的含量,显示了一定的抗抑郁作用;《医心方》之开心散显著增加了模型大鼠的体重,明显增加了模型大鼠海马NE和皮层DA的含量;《千金翼》之补心汤明显增加了模型大鼠海马5-HT和皮层DA的含量;《医门方》之开心丸只显著增加了模型大鼠皮层DA的含量;《千金要方》之开心散未见抗抑郁作用。结果表明,类方抗抑郁作用的不同可能与入血成分的差异有关。

6首开心散类方对阿尔兹海默病模型小鼠的药理作用及机制研究

该文研究组方相同配比不同的6个开心散类方对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠学习记忆能力的改善作用,以及对阿尔茨海默病模型小鼠海马中的海马中脑源性神经营养因子(BDNF),Tau蛋白,p-Tau蛋白,Aβ,乙酰胆碱(Ach),乙酰胆碱酯酶(Ach E)及血清中N端前脑钠肽前体(NT-pro BNP)的影响,选用昆明小鼠,腹腔注射D-半乳糖和亚硝酸钠,建立阿尔茨海默小鼠模型后,连续灌胃35 d,其中阳性药为石杉碱甲(0.05 mg·kg-1),各开心散类方给药组高、中、低剂量分别为3.570,1.785,0.892 g·kg-1,采用Morris水迷宫评价各组动物学习记忆能力;Western blot方法检测各组小鼠海马中BDNF的含量;Elisa方法检测各组小鼠海马中Tau蛋白,p-Tau蛋白,Aβ,Ach,Ach E及血清中NT-pro BNP的含量。结果显示,《千金要方·卷十四》之开心散显著改善AD模型小鼠学习记忆能力,明显升高其海马中BDNF,Ach含量,显著降低其海马中Ach E,Aβ,Tau蛋白,p-Tau蛋白,NT-pro BNP含量,作用最为全面,在Tau蛋白方面作用较突出;《医心方》之开心散、《医门方》之开心丸、《备急千金要方》之定志小丸和《古今录验》之定志丸对AD模型小鼠各指标的影响各有侧重,部分剂量显著优化了评价学习记忆能力的各项指标,明显升高AD模型小鼠海马中BDNF,Ach含量,显著降低AD模型小鼠海马中Aβ,Tau蛋白,p-Tau蛋白含量及Ach E活性,明显降低AD模型小鼠血清中NT-pro BNP含量,作用较为显著;《千金翼》之补心汤的高、中、低剂量均基本未见其对阿尔茨海默病模型动物的影响。结果表明,《千金要方·卷十四》之开心散对阿尔茨海默病模型小鼠的作用最为全面,且在Tau蛋白方面的作用较为突出。

基于网络药理学和实验验证探究养心开窍开心散类方补心汤调控PI3K/AKT信号通路保护心脏的机制

该研究通过构建EA.hy926细胞心肌缺血模型,对比2个开心散类方(补心汤和定志小丸)3个剂量组(500、200、100μg·mL-1)对EA.hy926细胞活力的影响。而后基于TCMSP、TCMID、SYMMAP、STRING等公共数据库和KEGG通路分析等网络药理学基本方法,初步寻找开心散优效类方补心汤发挥心脏保护作用的分子机制。在异丙肾上腺素(isoprenaline, ISO)诱导的大鼠心肌缺血模型上,进行补心汤药效学再评价,并采用蛋白印迹(Western blot, WB)法测定磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase B, PI3K/AKT)信号通路相关蛋白的表达。体外模型筛选研究发现,开心散不同配伍的2个类方中,补心汤显著提高缺血后EA.hy926细胞的活力,且效果优于定志小丸。网络药理学分析预测该方可能通过PI3K/AKT信号通路发挥心脏保护作用。动物实验验证研究中确证,补心汤治疗后模型大鼠心脏超声射血分数(ejection fraction, EF)和短轴收缩率(fractional shortening, FS)明显升高,左心室舒张前壁厚度(diastolic left ventricular anterior wall, LVAWd)、左心室收缩前壁厚度(systolic left ventricular anterior wall, LVAWs)和左心室舒张后壁厚度(diastolic left ventricular posterior wall, LVPWd)明显变大,心率(beat per minute, BPM)和左心室舒张内径(diastolic left ventricular diameter, LVIDd)明显降低,心电图ST段得到明显改善;Masson染色显示补心汤恢复心肌厚度,减少胶原纤维,增加肌纤维,减少梗死面积,改善心肌缺血;同时补心汤抑制心肌缺血诱导的血清炎症因子[tumor necrosis factor-α(TNF-α)和interleukin-6(IL-6)]和心肌酶[creatine kinase(CK)和lactate dehydrogenase(LDH)],增加大鼠心肌细胞p-AKT/AKT的比例,增加相关下游通路PI3K、NF-κB、IKK-α、Bcl-xl蛋白的表达,降低凋亡蛋白Bax蛋白表达。综上,补心汤显示出良好的心脏保护作用,其机制可能与PI3K/AKT信号通路关键靶蛋白相关。