通脉开窍丸治疗血管性痴呆模型大鼠海马区神经元的铁死亡变化

背景:研究表明铁死亡与血管性痴呆存在密切联系,通脉开窍丸对于改善血管性痴呆患者的认知功能有一定疗效,但其作用机制不明确。目的:基于核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)/血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)/谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)信号通路调控铁死亡探讨通脉开窍丸对血管性痴呆干预作用以及分子机制。方法:84只雄性SD大鼠,其中12只大鼠用作假手术组,其余大鼠用改良2-VO法制备成血管性痴呆的模型,成模后随机分为模型组、通脉开窍丸高、中、低剂量(27.6,13.8,6.9 g/kg)组、联合组[通脉开窍丸高剂量+ML385(20 mg/kg)]、盐酸多奈哌齐组(0.45 mg/kg),灌胃给药1次/d,联合组同时腹腔注射Nrf2抑制剂ML385,1次/d,连续4周。采用Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力;苏木精-伊红染色观察各组大鼠海马组织中神经元病理学变化;比色法试剂盒检测大鼠血清中还原型谷胱甘肽、Fe^(2+)、丙二醛的浓度;普鲁士蓝染色法检测大鼠海马组织中铁沉积情况;透射电镜观察大鼠海马组织中神经元线粒体超微结构变化;蛋白免疫印迹法检测大鼠海马神经元Nrf2、HO-1、GPX4、XCT、铁蛋白重链1(ferritin heavy chain 1,FTH1)蛋白的表达。结果与结论:(1)与假手术相比,模型组大鼠逃避潜伏期时间明显延长(P<0.05),穿越平台次数明显减少(P<0.05);海马组织松散,神经元细胞核深染,染色质固缩甚至裂解;CA1区铁离子聚集;线粒体萎缩变小,线粒体嵴溶解消失,线粒体膜密度增厚;血清中Fe^(2+)、丙二醛水平上升,还原型谷胱甘肽水平下降(P<0.05);海马组织GPX4、HO-1、XCT、Nrf2、FTH1蛋白表达显著降低(P<0.05)。(2)与模型组相比,通脉开窍丸各剂量组和盐酸多奈哌齐组大鼠平均逃避潜伏期均明显缩短(P<0.05),穿越平台次数增加(P<0.05);海马神经元恢复明显,CA1区神经元铁离子聚集明显减少,线粒体结构和功能好转;血清Fe^(2+)、丙二醛水平显著降低(P<0.05),血清还原型谷胱甘肽浓度及海马组织中GPX4,HO-1,XCT,Nrf2,FTH1蛋白表达显著升高(P<0.05)。(3)与通脉开窍丸高剂量组相比,盐酸多奈哌齐组治疗效果差异无显著性意义(P>0.05),联合组大鼠水迷宫逃避潜伏期时间延长(P<0.05),穿越平台次数减少(P<0.05),大鼠CA1区神经元病理改变情况不明显,铁沉淀增加,血清中丙二醛、Fe^(2+)浓度增加(P<0.05),还原型谷胱甘肽浓度减少(P<0.05),海马组织神经元线粒体萎缩变小,且Nrf2、XCT、HO-1、GPX4、FTH1蛋白的表达减少(P<0.05)。在一定范围内,通脉开窍丸剂量越高效果越好,且高剂量治疗效果不亚于盐酸多奈哌齐。(4)结果说明,通脉开窍丸可以减轻大鼠海马组织神经元病理改变,改善血管性痴呆大鼠的认知功能,其作用机制可能与Nrf2/HO-1/GPX4信号通路的激活抑制铁死亡有关。

耳聋左慈丸合复聪通脉开窍针刺法治疗神经性耳聋耳鸣疗效及对血清NO、Connexin 26的影响

目的观察耳聋左慈丸合复聪通脉开窍针刺法治疗神经性耳聋耳鸣疗效及对患者血清一氧化氮(NO)、连接蛋白26(Connexin26)的影响。方法将112例神经性耳聋耳鸣患者随机分为2组,对照组56例应用耳聋左慈丸治疗,研究组56例应用耳聋左慈丸合复聪通脉开窍针刺法治疗,2组均连续治疗4周。记录2组治疗前后测听值和耳鸣评分,统计2组治疗后耳聋和耳鸣临床疗效,检测2组治疗前后血清NO和Connexin26水平。结果治疗后,2组电测听值和耳鸣评分均较治疗前显著降低(P均<0.05),且研究组显著低于对照组(P均<0.05);研究组耳聋和耳鸣临床治疗总有效率显著高于对照组(P均<0.05);2组NO和Connexin26水平均较治疗前显著升高(P均<0.05),且研究组均显著高于对照组(P均<0.05)。结论耳聋左慈丸合复聪通脉开窍针刺法治疗神经性耳聋耳鸣能明显升高血清NO和Connexin26水平,疗效显著。

“解肌通脉、醒神开窍”手法配合颈椎牵引治疗颈性眩晕临床研究

目的观察"解肌通脉、醒神开窍"手法配合颈椎牵引治疗颈性眩晕临床效果。方法将88例颈性眩晕患者按随机数字表法分为治疗组和对照组,各44例。治疗组给予"解肌通脉、醒神开窍"手法加颈椎牵引;对照组给予盐酸氟桂利嗪胶囊加颈椎牵引,两组均以14 d为1疗程.1疗程后分别观察两组患者临床疗效、临床症状积分并进行对比。结果治疗组总有效率为95.45%,高于对照组的83.36%(P<0.05)。治疗组患者治疗2周后眩晕、恶心、头痛、呕吐、视物模糊、耳鸣、颈项部疼痛积分均改善(P<0.05)。结论 "解肌通脉、醒神开窍"法配合颈椎牵引治疗颈性眩晕安全有效,临床疗效满意,患者依存性好。

基于HIF-1α/BNIP3信号通路调控线粒体自噬探讨通脉开窍丸治疗血管性痴呆大鼠的机制

目的:观察通脉开窍丸对血管性痴呆(VD)大鼠海马体缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/腺病毒E1B19kD相互作用蛋白3(BNIP3)信号通路及线粒体自噬的影响。方法:将90只雄性SD大鼠适应性喂养1周后,随机抽选10只作为假手术组,仅分离颈总动脉不结扎,剩余大鼠将采用颈总动脉分次结扎法制作VD大鼠模型。剔除死亡和造模不成功的大鼠后,将造模成功的大鼠随机分为模型组、通脉开窍丸高、中、低剂量组(27.6、13.8、6.9 g·kg^(-1))、盐酸多奈哌齐组(0.45 mg·kg^(-1))、联合组(通脉开窍丸高剂量27.6 g·kg^(-1)+HIF-1α抑制剂YC-12.5 mg·kg^(-1)),各组对应治疗4周后取材。尼氏染色法观察海马区神经元丢失情况;苏木素-伊红(HE)染色观察海马区病理学变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马组织HIF-1α、BNIP3、自噬效应蛋白-1(Beclin-1)、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)蛋白表达水平;透射电镜观察海马组织线粒体超微结构及自噬小体数量;免疫荧光(IF)观察海马组织HIF-1α、BNIP3、LC3B的荧光强度。结果:与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长(P<0.01),穿越平台次数减少(P<0.01),海马区神经元层次减少,数量骤减,结构排列不齐,尼氏小体数量减少,丢失严重,线粒体嵴紊乱,线粒体双模结构破坏,损伤加重,自噬小体数量增加,HIF-1α、BNIP3、Beclin-1、LC3B蛋白表达增加(P<0.05,P<0.01),HIF-1α、BNIP3、LC3B的荧光强度增强(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,通脉开窍丸各治疗组、盐酸多奈哌齐组大鼠寻找平台时间缩短(P<0.01),穿越平台次数增加(P<0.01),HE染色显示,海马神经元细胞数量增多,形态正常,排列整齐,尼氏小体丰富,丢失减少,损伤减轻,自噬小体数量增多,HIF-1α、BNIP3、Beclin-1、LC3B蛋白表达明显增加(P<0.05,P<0.01),HIF-1α、BNIP3、LC3B的荧光强度增强(P<0.05,P<0.01)。与通脉开窍丸高剂量组比较,联合组大鼠逃避潜伏期显著延长(P<0.01),穿越平台次数显著降低(P<0.01),海马神经元细胞数量减少,损伤加重,尼氏小体数量下降,自噬小体数量有所减少,HIF-1α、BNIP3、Beclin-1、LC3B蛋白表达显著降低(P<0.01),HIF-1α、BNIP3、LC3B的荧光强度显著下降(P<0.01)。结论:通脉开窍丸可能通过激活HIF-1α/BNIP3信号通路,促进线粒体自噬的发生,清除功能受损的线粒体,为健康细胞提供能量,减少神经细胞死亡,促进脑功能的恢复,从而减轻大鼠海马组织的缺血性损伤,提高大鼠学习记忆能力,从而发挥对VD的治疗作用。

全国名中医毛德西治疗中风后认知障碍的经验总结

中风后认知障碍是中风病患者最常见的后遗症之一,也是临床治疗难度较大的一种中风后遗症,常导致患者执行力、记忆力、智能等下降,影响患者相关疾病康复的依从性和康复治疗效果,导致康复效果不佳,病情反复,迁延难愈,加重患者家庭经济负担。毛德西教授有多年的临床经验,认为痰瘀阻窍是中风后认知障碍的主要病机,主张临床治疗应以化痰祛瘀、醒神开窍为治则贯穿始终,临证需兼顾凉血清心、解郁安神,创制验方通脉开窍汤,灵活加减,常用以治疗中风后认知障碍和血管性痴呆,均获得较好临床疗效。笔者从病机要领、治法方药等方面阐述毛德西教授以通脉开窍汤加减治疗中风后认知障碍的学术思想和遣方用药经验,以供临床医生学习传承。

褚双喜治疗胸痹心痛临床经验

目的:总结褚双喜治疗胸痹心痛临床经验。方法:通过整理褚双喜的医案医话,总结其治疗经验及特色。结果:褚双喜治疗胸痹心痛以辨别阴阳之不同,痰浊瘀血之差别,五脏生克之关系为重点,以开窍通脉为主要治法,兼以活血、化痰、开通等治法,用药以芳香开窍为主,有其独特的临床经验。结论:褚双喜治疗胸痹心痛临床经验可资临床参考。