HPLC-DAD-ESI-MS技术分离鉴定啤酒中异α-酸顺/反异构体

建立了1种采用高效液相法测定啤酒中异α-酸顺/反异构体的方法。样品通过异辛烷液液萃取获得,然后使用Purospher STAR RP_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,在甲醇-乙酸铵缓冲液作为流动相条件下等梯度分离,分离在50 min内完成。依据ESI-MS的选择性,使用高效液相色谱-二极管阵列检测器-电喷雾质谱联用(HPLC-DAD-ESI-MS)操作区分各化合物。根据保留时间、UV和MS图谱鉴定各目的蜂。该方法准确可靠,最低检测限0.21 mg/L。

高效液相色谱法检查N-(反式-4-异丙环己基甲酰基)-D-苯丙氨酸中的顺式异构体杂质

目的 :探讨使用非手性柱通过反相液相色谱检查N - (反式 - 4-异丙环己基甲酰基 ) -D -苯丙氨酸中顺式异构体杂质的方法。方法 :选用NucleosilC1 8柱 ,以乙腈 - 0 0 5mol·L- 1 NH4H2 PO4(2 2 5∶77 5 ) (pH 7 4)为流动相 ,在 2 10nm下检测。色谱流分经电喷雾离子阱多级质谱分析证实。结果 :N - (反式 - 4-异丙环己基甲酰基 ) -D -苯丙氨酸及其顺式异构体的保留时间分别为 5 4 7min和 49 8min ,分离度为 1 5 1。结论 :该方法使用普通色谱柱 ,操作简单 ,可以作为常规的杂质检查手段。

亚麻酸甘油酯异构体形成动力学及不同酰化位置对热致异构体差异比较

研究亚麻酸甘油三酯在加热时反式亚麻酸形成的动力学的差异以及亚麻酸在甘油酯不同酰化位置对热致异构反式产物种类影响。采用GC-FID分析亚麻酸反式异构体,发现亚麻酸甘油三酯中有7种反式异构体生成,亚麻籽油有6种反式异构体生成,该反应为零级反应。对比亚麻酸甘油三酯和亚麻籽油的动力学参数:在亚麻酸甘油三酯和亚麻籽油中,C18:3-9t,12c,15c、C18:3-9c,12t,15c和C18:3-9c,12c,15t形成的活化能分别为79.39、106.49、82.33 kJ/mol和86.04、115.84、102.85 kJ/mol;C18:3-9t,12c,15t和C18:3-9t,12t,15c分别为180.57、233.55 kJ/mol和164.36、165.38 kJ/mol;C18:3-9t,12t,15t分别为211.79 kJ/mol和140.30 kJ/mol。对比monolinolenin、dilinolenin、1,3-dilinolenin的异构体种类含量可知,Sn-1和2位比Sn-1和3位更稳定;Sn-1位比Sn-1和3位还有Sn-1和2位更稳定。因此,亚麻酸甘油三酯基本比亚麻籽油跨越的能垒高;对于酰化位置,Sn-1和2位比Sn-1和3位更稳定,Sn-1位比Sn-1和3位还有Sn-1和2位更稳定。

不同煎炸温度下亚麻籽油中α-亚麻酸的反式异构化及其分布情况

在170℃和200℃下进行亚麻籽油煎炸薯条研究,比较不同温度煎炸过程中α-亚麻酸的反式异构化情况及α-亚麻酸反式异构体在煎炸油和煎炸薯条中的分布情况,并探究了α-亚麻酸反式异构体含量与其他油脂劣变指标(酸价、过氧化值、p-茴香胺值,总极性物质含量)的相关性。结果表明:煎炸使煎炸油中α-亚麻酸反式异构体含量显著增加(p<0.05),200℃煎炸温度下的增加趋势更明显,且温度是主要影响因素;煎炸薯条油脂的α-亚麻酸反式异构体含量小于煎炸油的,且170℃较200℃差异更显著;煎炸亚麻籽油中的α-亚麻酸反式异构体含量与酸价、总极性物质含量成显著正相关,且与前者的相关性更强,说明α-亚麻酸反式异构体的生成与煎炸油品质劣变有关,尤其是水解反应。

通过测定异α-酸的顺反比例来评价啤酒老化程度

建立了一种HPLC法，可以分离检测啤酒及麦汁中六种异α-酸，同时能实现α-酸中的加律草酮和律草酮、β-酸中的加蛇麻酮和蛇麻酮的分离检测。通过研究啤酒贮藏过程中异仅一酸的降解与啤酒老化程度之间的关系，表明啤酒贮藏过程中异α-酸的顺反比例对啤酒老化具有指示作用。

亚麻籽油煎炸薯条过程中不同构型反式α-亚麻酸的含量及分布

为研究不同煎炸温度下不同构型反式α-亚麻酸(TALA)在煎炸薯条和煎炸油中的分布情况,在170、200℃下进行亚麻籽油煎炸薯条实验,比较不同温度的煎炸过程中不同构型的TALA在煎炸油中的含量变化及TALA在煎炸薯条和煎炸油中含量的比值变化情况。结果表明:两个煎炸温度下煎炸油中均检测到6种构型的TALA,即9t,12c,15c-C18∶3、9c,12t,15c-C18∶3、9c,12c,15t-C18∶3、9c,12t,15t-C18∶3、9t,12t,15c-C18∶3和9t,12c,15t-C18∶3,而三反式构型的9t,12t,15t-C18∶3在整个煎炸过程中并未形成,6种构型的TALA均在200℃煎炸亚麻籽油中含量更多;煎炸亚麻籽油中TALA以单反式构型为主,约占TALA总含量的94%;3种单反式α-亚麻酸含量均随煎炸时间的延长和煎炸温度的升高呈显著增加趋势,3种双反式α-亚麻酸的含量从大到小依次为9t,12c,15t-C18∶3、9c,12t,15t-C18∶3、9t,12t,15c-C18∶3,且煎炸温度和煎炸时间对9t,12c,15t-C18∶3含量影响较大,对另外两种的影响较小;煎炸油中检测到的6种TALA在200℃煎炸薯条中均有检出,而在170℃煎炸薯条中仅检出了5种,未检出9t,12t,15c-C18∶3;薯条中各构型TALA的含量通常低于煎炸油的,170℃煎炸时,大部分TALA在薯条和煎炸油中的含量比值随煎炸时间延长逐渐变小,而200℃煎炸时,大部分TALA含量比值在整个煎炸过程中差异不显著。

根据异α-酸降解预测Lager啤酒的保质期

在实验室进行3L规模的啤酒生产和设计试验.采用高效液相色谱定量顺式/反式-异α-酸的浓度在4℃-50℃加速老化过程后,反式α-酸与顺式α-酸比例值从0.62变化至0.49浅色Lager啤酒中的反式-异α-酸的降解遵循一级反应并且符合阿伦尼乌斯方程,其反式-异合葎草酮的活化能（Ea）从69.2 kJ/mol变化至74.4 kJ/mol,频率因子（A）从1 88×1010days-1变化至1 3642×1011 days-1.Ea值越高说明反式异α-酸在加速贮存期间对温度越敏感 当温度从4℃增至40℃,浅色Lager啤酒的平均半衰期从471天减少到12天.如果已知啤酒中异α-酸的初始浓度,利用反式-异α-酸降解的活化能和加速老化的温度曲线,可以建立一个数学模型来预测异α-酸的减少量.对于暖期以及夏天温度可达40℃的热带国家来说,本研究的实验结果在预测啤酒苦味变化方面有极其重要的作用。

高效液相色谱-电喷雾电离质谱法分析不同时期金银花中酸性成分及含量变化

目的考察不同时期金银花中酸性成分的含量变化。方法采用高效液相色谱-电喷雾电离质谱法对金银花中酸性成分进行分析;高效液相色谱用梯度洗脱,质谱用负离子模式。结果不同时期绿原酸、异绿原酸及其同分异构体6种成分含量有一定变化。结论本方法简单、快速、重现性好,可为道地药材的评价研究提供依据。

亚麻籽油中不同构型反式亚麻酸的气相色谱测定方法

为了定量分析亚麻籽油中α-亚麻酸(ALA)顺反异构体,采用SLB-IL111色谱柱,对气相色谱法测定反式亚麻酸(TALA)的分析条件(载气流速和升温程序)进行优化,并对所建立的方法进行评价。结果表明:载气流速选择0.3 mL/min;升温程序为60℃保持5 min,以20℃/min升温至175℃保持15 min,以1℃/min升温至180℃保持28 min,以0.2℃/min升温至185℃保持40 min;该方法可实现9c,12t,15t-C18∶3和9t,12c,15t-C18∶3的较好分离,分离度为0.9,其余各TALA的分离度在1.6~8.7之间;所建立的方法重复性好,测定加热亚麻籽油样时各异构体日间相对标准偏差(RSD)为3.16%~5.65%,日内RSD为2.00%~4.13%,检出限为0.678 2~0.879 0 mg/L,定量限为2.260 6~2.930 1 mg/L;各ALA异构体含量与峰面积之间线性关系良好,相关系数均为0.999 8。综上,所建立的方法可用于亚麻籽油中8种不同构型ALA顺反异构体的定量分析。

LC-MS同时测定大型海藻中9个植物激素

目的:利用高效液相色谱-三重四极杆质谱(HPLC-QqQ MS)联用分析系统建立几种大型海藻中植物激素的分析方法。方法:冷冻干燥后的藻样用甲醇-水-甲酸(15∶4∶1,v/v/v)提取。9个中、酸性植物激素分别在Hypersil Gold C18色谱柱上实现分离,流动相为水(A)-甲醇(B),梯度洗脱,流速0.3 mL·min-1,柱温30℃。在电喷雾电离源正离子模式下,分别取m/z 130.0,204.1,136.1,220.0作为吲哚乙酸、异戊烯腺苷、异戊烯腺嘌呤和反式玉米素核苷的定量目标离子;在负离子模式下分别取153.3,91.3,93.2,143.2,59.5作为脱落酸、苯乙酸、水杨酸、赤霉素和茉莉酸的定量目标离子进行检测。结果:植物激素浓度在5～500μg·L-1范围内线性良好,检测限为0.0041～0.8622μg·L-1,回收率在61.33%～90.39%之间,RSD<11%(n=3)。结论:本法操作简单,准确可靠,适用于藻类植物激素的含量检测。

基于UPLC-Q/TOF-MS的中药水蜜丸制剂二至丸多成分稳定性研究

目的在遵循人用药品注册技术要求国际协调会(International Conference on Harmonization of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use,ICH)制剂稳定性指导原则的指导下,在采用超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-Q/TOF-MS)联用技术对中药传统水蜜丸制剂二至丸进行多成分定性定量研究的基础上,进行二至丸长期稳定性和加速稳定性研究,并考察了制剂影响因素对制剂稳定性的影响。方法采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1mm,1.7μm),流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,体积流量0.2 m L/min,采用电喷雾电离源(ESI),正、负离子模式扫描。在遵循ICH制剂稳定性指导原则的指导下,进行了18个月的长期稳定性试验[温度(25±2)℃,相对湿度(RH)(60±5)%],加速稳定性试验[温度(40±2)℃,RH(75±5)%]和制剂影响因素试验(包装材料类型和密封条件)。结果采用以上方法共鉴定出二至丸中20个化学成分(红景天苷、蟛蜞菊内酯、10-羟基木犀榄苷二甲酯、木犀榄苷-11甲酯、马钱苷酸、松果菊苷、女贞苦苷、橄榄苦苷酸、毛蕊花苷/异毛蕊花苷、女贞苷、特女贞苷、ligustroflavone、特女贞苷异构体、阿富汗丁香苷F、异女贞苷、女贞酸、橄榄苦苷、女贞苷-G13、青藤碱、3-O-顺式-对-香豆酰委陵菜酸),并对其进行定量及归一化半定量研究。在长期稳定性研究中,20个成分均保持稳定;然而在加速稳定性试验条件下,11种成分(10-羟基木犀榄苷二甲酯、松果菊苷、女贞苦苷、橄榄苦苷酸、毛蕊花苷、女贞苷、特女贞苷、ligustroflavone、女贞酸、女贞苷-G13、青藤碱)的量明显下降。制剂影响因素试验结果显示采用钠钙玻璃包装材料替代现有市售聚酯包装,在密封或敞口条件下,制剂中各成分稳定性均显著提高。在采用相同包材时密封条件对制剂稳定性也存在显著性影响。结论通过较为系统的中药传统口服制剂类型水蜜丸的制剂稳定性研究,为中药制剂质量控制水平和临床用药安全提供技术支持。

甘草废渣中1个新的香豆素类化合物

目的研究甘草Glycyrrhiza uralensis废渣的化学成分。方法采用硅胶吸附柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、高效液相色谱等分离手段进行分离纯化,根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果从新疆产甘草废渣75%乙醇提取物中分离得到了5个化合物,分别鉴定为槐香豆素C(1)、3β-O-对羟基-反-肉桂酰-齐墩果酸(2)、3-羰基甘草次酸(3)、3β,18-O-异丙叉-8(14),15-异右松脂烷二烯(4)、3β,18-O-异丙叉-7,15-异右松脂烷二烯(5)。结论化合物1为新的香豆素类化合物,命名为槐香豆素C;化合物2、4、5为首次从该属植物中分离得到。