甲状腺肿瘤G蛋白α亚基mRNA表达的初步研究

为研究G蛋白α亚基 (Ga)mRNA在甲状腺肿瘤组织中的表达 ,收集手术切除 5例甲状腺乳头状癌(TPC)及 6例无功能甲状腺腺瘤 (NFTA)组织 ,利用RT PCR技术观察Gs和Giα亚基的表达。结果发现 ,GsamRNA在TPC的表达较正常甲状腺 (NT)和NFTA明显增高 (P <0 0 5 ) ,NFTAGsamRNA表达水平的增高与NT无显著性意义 (P >0 0 5 ) ;Gia 3mRNA在NFTA的表达明显高于NT(P <0 0 5 ) ,两种甲状腺肿瘤组织中 3种Gia的表达水平无显著性差异 (P >0 0 5 )。研究表明Gsa和Gia

甘蓝型油菜G蛋白β亚基基因的克隆和表达分析

根据拟南芥等G蛋白β亚基基因的DNA序列,采用RT-PCR技术从甘蓝型油菜中克隆了一个编码G蛋白β亚基基因的全长cDNA,命名为BnAGB1.BnAGB1含有1134 bp的完整开放阅读框,编码378个氨基酸,与其它植物的Gβ亚基氨基酸序列有很高的同源性,且具有保守的Gα、Gγ结合区域及WD-40结构域.对甘蓝型油菜矮化突变体及其野生型中不同组织和不同发育时期的BnAGB1表达进行实时定量PCR分析表明:BnAGB1在矮化突变体和野生型的各个组织中均有表达;在生长旺盛期的子叶期、抽薹期和荚果期有较高的表达,而在两片真叶期、四片真叶期和花期表达较低;而且,在所有分析的不同时期和组织中,矮化突变体中的表达均显著或极显著高于野生型.以上结果表明,BnAGB1参与了甘蓝型油菜的生长发育进程的调控,与油菜矮化突变性状表现可能相关.

5-羟色胺1A受体、G蛋白β3亚基基因多态性与卒中后抑郁的相关性

目的观察5-羟色胺1A受体（5-HTR1A）C（-1019）G基因与G蛋白β3亚基（GNβ3）基因C825T多态性在中国广州地区卒中后抑郁患者的分布情况及特点，探讨卒中后抑郁的遗传机制。方法选取159例首发脑卒中患者并根据汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评分分为卒中后抑郁组（53例）和卒中对照组（106例），采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）技术分析2组患者的5-HTR1AC（-1019）G和GN133C825T基因多态性。结果5-HTR1AC（-1019）G和GN[33C825T基因多态性在2组人群中的分布差异均有统计学意义，卒中后抑郁组5-HTR1A（-1019）GG基因型（8／53，15．1％）及G等位基因频率（44／106，41．5％）和GN[33825T等位基因频率（68／106，64．2％）均高于对照组（5／106，4．7％；35／212，16．5％；113／212，53．3％；x^2=23．204、23．655、3．392，均P〈0．05）。同时携带5-HTR1A（-1019）G和GN33825T等位基因者罹患卒中后抑郁的相对危险度（OR=4．980，95％CI2．429～10．210，P=0．00（3）比单独具有5-HTRIA（-1019）G等位基因者（OR=3．589，95％C12．113—6．096，P=0．000）或GN33825T等位基因者高（OR=0．638，95％C10．395～1．031，P=0．042）。结论5-HTR1AC（-1019）G和GN33C825T基因均可能是卒中后抑郁的易患基因，而且两者在卒中后抑郁的发病中存在微效协同作用。

GNB3C825T基因多态性与儿童血管迷走性晕厥相关性的初步探讨

目的 初步探讨GNB3C825T基因多态性与小儿血管迷走性晕厥（vasovagal syncope,VVS）的相关性.方法 晕厥组为不明原因晕厥患儿54例,其中男18例,女36例,平均11.8岁 对照组为同期健康体检儿童54名,其中男20名,女34名,平均11.2岁 入选病例均行直立倾斜试验（head-up tilt test,HUTT）,根据HUTT试验结果 ,分HUTT阳性组即VVS组和HUTT阴性组,各组病例均抽取外周血,应用聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）和基因测序的方法 检测GNB3C825T基因多态性.结果 晕厥组54例患儿,HUTT阳性者30例,其中血管抑制型15例（50.0%）、混合型9例（30.0%）和心脏抑制型6例（20.0%）,对照组皆为阴性 GNB3C825T等位基因T在对照组的频率低于晕厥组（18.5%vs 34.3%）,两组比较差异有统计学意义（x2=6.888,P＜0.05） GNB3C825T等位基因T在VVS组的频率高于HUTT阴性组（38.3%vs 18.7%）,两组比较差异有统计学意义（x2=4.905,P＜0.05） VVS组各临床分型间的等位基因频率的比较差异无统计学意义（x2=0.658,P＞0.05）.结论 GNB3C825T等位基因频率与VVS有相关性,可考虑作为小儿VVS的候选易感基因,提供临床早期筛查.

靶向RhoA基因的shRNA对卵巢上皮性癌裸鼠移植瘤的影响及作用机制

目的探讨靶向RhoA基因的短发夹状RNA（shRNA）对卵巢上皮性癌（卵巢癌）裸鼠移植瘤的影响及可能的抗肿瘤作用机制。方法建立卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型，应用随机数字表法将荷瘤裸鼠随机分为3组，即实验组（予携带靶向RhoA基因的shRNA慢病毒液治疗）、阴性对照组（予携带针对随机无关序列的shRNA慢病毒液治疗）、空白对照组（予磷酸盐缓冲液），比较3组裸鼠的移植瘤生长情况，包括移植瘤生长速度、肿瘤体积、肿瘤质量；光镜下观察3组裸鼠移植瘤及主要器官组织的病理形态学特征。采用实时荧光定量PCR技术、免疫组化SP法和蛋白印迹法检测移植瘤组织中RhoAmRNA和蛋白的表达；脱氧核苷酸末端转移酶介导的核苷酸缺口末端标记（TUNEL）法检测3组裸鼠移植瘤细胞的凋亡情况[以凋亡指数（AI）表示]。结果（1）自治疗开始的第9天起，实验组裸鼠移植瘤的生长速度滞后于阴性对照组和空白对照组，差异均有统计学意义（P〈0．01）。治疗结束后10d，实验组裸鼠的移植瘤体积为（338±114）mm^3，小于阴性对照组和空白对照组[分别为（1190±332）和（1101±396）mm^3]，分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）；实验组裸鼠平均肿瘤质量为（0．23±0．11）g，低于阴性对照组和空白对照组[分别为（0．79±0．19）、（0．74±0．17）g]，分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。而阴性对照组裸鼠移植瘤的生长速度、移植瘤体积、肿瘤质量分别与空白对照组比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。光镜下观察，实验组肿瘤细胞呈大片坏死区域且核固缩多见，而阴性对照组和空白对照组肿瘤细胞无明显变化。（2）实验组裸鼠移植瘤组织中，RhoAmRNA的表达水平为0．304±0．05，低于阴性对照组的0．95±0．06和空白对照组的1．00±0．11，分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）；RhoA蛋白的表达水平为0．14±0．06，低于阴性对照组的0．78±0．14和空白对照组的0．75±0．13，分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）；实验组肿瘤细胞的AI为（20．9±3．4）％，高于阴性对照组的（5．2±2．0）％和空白对照组的（6．04±2．1）％，分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。而阴性对照组裸鼠移植瘤组织中RhoAmRNA和蛋白的表达水平及A1分别与空白对照组比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论靶向RhoA基因的shRNA在体内有效下调卵巢癌裸鼠皮下移植瘤组织中RhoA基因的表达，抑制卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的生长，其机制可能与促进细胞凋亡有关。