异丹叶大黄素调控PI3K/Akt信号通路对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用

目的:验证异丹叶大黄素(Isorhapontigenin,ISO)通过调节磷脂酰肌醇3激酶(Phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路减轻缺血再灌注大鼠脑缺血半暗带神经元损伤的作用及机制。方法:随机选择60只SD级别雄性大鼠,分为假手术组、模型组、ISO组,每组20只。假手术组给予手术但未穿线,模型组采用线栓法建立脑缺血再灌注损伤模型,ISO组再灌注后2 h腹腔内注射ISO。参考Z-Longa 5级评分标准评估神经功能缺损情况,采用氯化三苯基四氮唑染色法测定脑梗死率,采用苏木素-伊红染色法、尼氏染色法观察脑组织及神经元损伤情况,采用酶联免疫吸附测定脑组织中白细胞介素(Interleukin,IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)及丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量,采用蛋白质印迹法检测磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化PI3K(p-PI3K)蛋白表达水平。结果:本研究中ISO组大鼠神经功能损伤程度、脑梗死率、炎症因子水平均显著低于模型组(P<0.05),SOD水平显著高于模型组(P<0.05),脑组织较模型组有较低的炎性细胞浸润及较完整的神经元结构。模型组p-Akt、PI3K蛋白表达显著下降,ISO组p-Akt、PI3K蛋白表达较模型组显著升高(P<0.05)。结论:ISO可能通过激活PI3K/Akt信号通路清除氧自由基、减轻炎症反应,进而减轻脑缺血再灌注对脑细胞造成的损伤。

异丹叶大黄素对肺腺癌A549细胞miR-654-3p表达及增殖、迁移、侵袭能力的影响

目的:探讨异丹叶大黄素(ISO)对肺腺癌A549细胞miR-654-3p表达及增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法:用不同浓度(0、5、10、20μmol/L)ISO培养A549细胞24 h,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,克隆形成实验检测克隆形成能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell小室检测细胞侵袭能力;采用实时荧光定量PCR法检测miR-654-3p表达水平,Western blot法检测E-cadherin、N-cadherin蛋白表达水平。取A549细胞,采用脂质体转染法分别转染miR-NC和miR-654-3p模拟物48 h,再加20μmol/L ISO孵育24 h,然后检测上述指标。另取A549细胞分别转染anti-miR-NC、anti-miR-654-3p,经20μmol/L ISO孵育后,检测上述指标。结果:ISO干预后,A549细胞中miR-654-3p表达量增加;细胞增殖抑制率升高,克隆形成数降低;侵袭细胞数、划痕愈合率、N-cadherin蛋白表达水平降低,E-cadherin蛋白表达水平升高;上述指标的变化均呈剂量依赖性(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-654-3p模拟物组克隆形成数减少,增殖抑制率升高(P<0.05);划痕愈合率、侵袭细胞数、N-cadherin蛋白表达水平降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05)。与anti-miR-NC组比较,anti-miR-654-3p组克隆形成数增高,增殖抑制率降低;划痕愈合率、侵袭细胞数、N-cadherin蛋白表达水平增高,E-cadherin蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:ISO可通过上调miR-654-3p表达抑制肺腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力。

异丹叶大黄素和白藜芦醇对小鼠腹腔巨噬细胞白细胞介素6mRNA表达的影响

目的：观察异丹叶大黄素和白藜芦醇对分别由炎性三肽（ｆＭＬＰ）和钙离子载体Ａ２３１８７（Ａ２３１８７）诱导的小鼠腹腔巨噬细胞白细胞介素６（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ６，ＩＬ６）ｍＲＮＡ表达水平的影响。方法：用半定量ｍＲＮＡ的ＲＴＰＣＲ。结果：异丹叶大黄素和白藜芦醇在２×１０－６和２×１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１浓度下，均能抑制ｆＭＬＰ和Ａ２３１８７诱导的小鼠腹腔巨噬细胞ＩＬ６ｍＲＮＡ的表达。结论：该２个化合物抑制ＩＬ６活性的作用机制之一是抑制ＩＬ６ｍＲＮＡ表达。

异丹叶大黄素与白藜芦醇对兔外周血中性粒细胞功能的影响

目的旨在研究异丹叶大黄素和白藜芦醇对中性粒细胞功能的影响。从兔外周血分离中性粒细胞，检测用炎性四肽（ｆＭＬＰＰ）诱导中性粒细胞趋化及β葡糖醛酸酶活性。结果显示：ｆＭＬＰＰ诱导中性粒细胞趋化的最适浓度为５×１０－１０ｍｏｌ·Ｌ－１。在１０－１０～１０－６ｍｏｌ·Ｌ－１的浓度范围内，ｆＭＬＰＰ能剂量依赖性地促进中性粒细胞β葡糖醛酸酶释放。异丹叶大黄素与白藜芦醇在一定浓度范围内均能抑制ｆＭＬＰＰ诱导的中性粒细胞的趋化。提示二者均能增强中性粒细胞的功能，可能是他们抗炎作用的机制之一。

异丹叶大黄素对人滑膜细胞白细胞介素-8生成及mRNA表达的影响

目的 研究异丹叶大黄素 (isorhapotigenin ,Iso)对肿瘤坏死因子α(TNF α)诱导的人滑膜细胞 (humansynovialcell,HSC)白细胞介素 8(IL 8)生成和mRNA表达的影响。 方法 用RIA方法测定IL 8的含量 ,以RT PCR法测IL 8mRNA。结果 Iso在 1× 10 -6 - 1× 10 -5mol·L-1浓度范围内对TNF α诱导的人滑膜细胞IL 8生成有抑制作用 ,并抑制TNF α诱导的HSCIL 8mRNA表达。结论 Iso抑制TNF α诱导的HSCIL 8生成 ,可能与影响IL

异丹叶大黄素的体外抗氧化作用

目的 异丹叶大黄素 (isorhapontigenin ,ISOR)是从中药射干中提取的化学成分 ,是与白藜芦醇化学结构相似的芪衍生物。通过多种模型研究ISOR的体外抗氧化作用。方法 采用Fe2 + 半胱氨酸 (Cys)、VitC ADP Fe2 + 和H2 O2 等自由基发生系统诱发大鼠肝微粒体、脑线粒体及突触体的氧化损伤 ,观察ISOR对此过程中MDA生成、GSH降低及超微弱化学发光增强的影响 ,并观察ISOR对用CuSO4 Phen VitC H2 O2 系统损伤DNA后 8 OH dG的特征性超微弱化学发光增强影响。结果 ISOR能显著抑制Fe2 + Cys诱导的大鼠肝微粒体、脑线粒体及突触体膜氧化损伤过程中MDA的生成 ,并能显著抑制H2 O2 诱导的脑线粒体及突触体GSH的降低 ;显著抑制VitC ADP Fe2 + 系统引起的微粒体膜氧化损伤时超微弱化学发光增强 ,并能显著降低DNA受氧化损伤后微弱化学发光的强度。经典抗氧化剂VitE 10 -4 mol·L-1抑制MDA生成及GSH降低的作用仅相当于ISOR10 -5或 10 -6mol·L-1的效果。结论 ISOR具有较强的抗氧化作用 ,且其活性明显强于经典抗氧化剂VitE。

异丹叶大黄素下调膀胱癌细胞中细胞周期蛋白D1表达的分子机制研究

目的:探索异丹叶大黄素(ISO)下调肿瘤细胞中细胞周期蛋白D1表达的分子机制。方法:以ISO作用于人源性膀胱癌UMUC3、RT12和RT4细胞后用Western blotting法检测细胞周期蛋白D1表达水平;以RTPCR法检测细胞周期蛋白D1 mRNA的表达水平。稳定转染细胞周期蛋白D1启动子萤光素酶报告基因至UMUC3细胞并筛选后,检测ISO预处理后萤光素酶活性。ISO预处理UMUC3细胞后,提取核蛋白检测核转录因子表达水平的变化。分别稳定转染GFP和GFP-细胞周期蛋白D1表达构建载体,筛选克隆;ISO预处理后,Western blotting法检测细胞周期蛋白D1的蛋白表达水平,贴壁依赖性细胞生长实验法检测细胞生长能力的变化,流式细胞术检测细胞周期的变化。分别稳定转染人源性细胞周期蛋白D1野生型和-163位点突变型萤光素酶报告基因质粒载体至UMUC3细胞并筛选,ISO预处理后检测细胞的萤光素酶活性。最后利用染色质免疫沉淀的方法,以抗Sp1抗体检测ISO对Sp1与细胞周期蛋白D1启动子结合力的影响。结果:ISO可从mRNA和蛋白水平显著抑制肿瘤细胞的细胞周期蛋白D1水平,并且是从内源性转录水平来抑制细胞周期蛋白D1的转录。ISO可抑制、下调核转录因子Sp1的表达,并抑制Sp1与细胞周期蛋白D1启动子区域的结合力,该结合位点主要位于启动子-92到+27bp的5’-非翻译区。结论:ISO可通过下调Sp1核转录因子表达及其与细胞周期蛋白D1启动子的结合,从内源性转录水平来抑制细胞周期蛋白D1的表达,从而诱导G0/G1细胞周期阻滞并抑制肿瘤细胞增殖。我们的研究将为临床中药单体ISO综合治疗肿瘤提供新的策略。

异丹叶大黄素下调膀胱癌细胞的细胞周期蛋白D1表达并诱导G0／G1细胞周期阻滞

目的:探索异丹叶大黄素(ISO)抑制膀胱癌细胞侵袭、转移和增殖活性的机制。方法:以ISO作用于人源性膀胱癌UMUC3细胞后,倒置相差显微镜下观察并以ATP生物荧光法检测癌细胞增殖活性;以RT-PCR和Western blotting法检测细胞周期蛋白D1表达;以流式细胞术检测细胞周期的变化;细胞划痕法检测细胞迁移活性。结果:20μmol/L浓度以上ISO可显著抑制UMUC3细胞的增殖,其IC50为(22.5±2.8)μmol/L。同时UMUC3细胞的细胞周期蛋白D1 mRNA和蛋白水平均显著降低。以低浓度5μmol/L ISO预处理UMUC3细胞后,与对照组(47.33%)进行比较,可分别在12 h(58.82%)和24 h(63.94%)显著诱导细胞G0/G1期阻滞(P<0.01)。细胞划痕法检测证实5μmol/L ISO可显著抑制膀胱癌细胞的迁移活性。结论:ISO可抑制膀胱癌细胞增殖,下调细胞周期蛋白D1表达,诱导G0/G1细胞周期阻滞,抑制细胞的迁移能力。

异丹叶大黄素对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的影响

目的探究异丹叶大黄素(ISO)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用及潜在机制。方法体外培养RAW264.7细胞,采用不同浓度ISO处理细胞,CCK-8法检测细胞活力。使用200 ng/ml LPS诱导RAW264.7细胞,以ISO、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)进行干预,Western blot检测各组细胞中炎症介质白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、P65、磷酸化P65(p-P65)、IκB、磷酸化IκB(p-IκB)、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)、环氧合酶2(COX-2)、高迁移率组蛋白B1(HMGB1)以及自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1、P62的表达,DCFH-DA探针检测各组细胞内活性氧(ROS)的变化。采用腹腔注射LPS(15 mg/kg)方法构建小鼠ALI模型,HE染色观察各组肺组织形态的病理变化,Western blot检测各组肺组织中炎症介质和自噬相关蛋白的表达,流式细胞术检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中ROS的含量。结果ISO可以抑制LPS诱导的RAW264.7细胞炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α、iNOS、COX-2、HMGB1的表达,抑制ROS的产生,促进LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1的表达,降低P62的表达,激活自噬通路(P均<0.05);当使用自噬抑制剂3-MA干预后可显著增加p-P65/P65、p-IκB、iNOS、COX-2、HMGB1的表达且降低IκB的表达(P均<0.001),并促进ROS的产生。ISO能够改善LPS诱导的ALI小鼠的肺组织病理变化,显著抑制肺组织中p-P65/P65、p-IκB、iNOS、COX-2、HMGB1的表达且促进IκB的表达(P均<0.001),减少BALF中ROS的含量,3-MA则会逆转ISO的保护作用。结论ISO对LPS诱导的ALI小鼠具有保护作用,其机制可能与ISO激活巨噬细胞自噬有关。

异丹叶大黄素抑制HepG2细胞生长及诱导其凋亡的实验研究

目的通过异丹叶大黄素抑制HepG2细胞的生长及诱导其凋亡,探讨异丹叶大黄素抗肿瘤作用的分子机制。方法我们采用FACS、Hochest33258、MTT等方法来检测HepG2细胞生长及凋亡的情况。结果异丹叶大黄素药物组的细胞凋亡明显大于对照组,药物组的细胞生长情况明显受到抑制,P<0.05,且还呈浓度依赖和时间依赖性。结论异丹叶大黄素药物可抑制Hep62细胞的增殖及诱导的HepG2细胞凋亡,表明异丹叶大黄素药物具有抗肿瘤的药理作用。

异丹叶大黄素抑制舌鳞癌侵袭转移的研究

目的:研究异丹叶大黄素对舌鳞癌细胞侵袭转移的影响。方法:选取对数期生长的UM1细胞,分为2组,实验组用异丹叶大黄素处理,对照组用PBS处理,采用CCK8实验检测细胞的增殖能力;划痕实验及transwell迁移实验检测2组细胞的迁移能力;transwell侵袭实验测2组细胞的侵袭能力;Western blot检测E-cad、Vimentin、Slug、pERK1/2及ERK1/2的表达情况。结果:异丹叶大黄素对舌鳞癌细胞株UM1的24~48h的半数抑制浓度(IC 50)为:48.2~60.3μmol/L,异丹叶大黄素可以抑制UM1细胞的增殖;异丹叶大黄素抑制舌鳞癌细胞株UM1的迁移及侵袭能力,差异具有统计学意义(P<0.05);UM1细胞经异丹叶大黄素处理后,与对照组相比,Vimentin、Slug、pERK1/2表达下调,E-cad表达升高,ERK1/2表达不变。结论:异丹叶大黄素可抑制舌鳞癌细胞的侵袭转移。

异丹叶大黄素对血小板源性生长因子-BB诱导的肺动脉平滑肌细增殖的影响研究

目的:观察异丹叶大黄素(Isorhapontigenin,ISO)对血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)诱导的SD大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响,并探讨其机制。方法:本研究采用20 ng·ml^(-1)PDGF-BB刺激SD大鼠原代PASMCs建立细胞增殖模型,通过不同浓度的ISO(5,10,20μmol·L^(-1))干预,分别在12,24,48 h后通过CCK-8和Brd U试剂盒检测细胞增殖与DNA合成,筛选ISO抑制PASMCs增殖的最适浓度,不同浓度的ISO孵育PASMCs后于12,24,48 h后通过0.4%台盼蓝染色法检测PASMCs存活率;选择20μmol·L^(-1)ISO与PDGF-BB共同孵育PASMCs 24 h后,通过流式细胞仪分析细胞周期,荧光酶标仪检测细胞内活性氧族(ROS)产生,采用超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒测定的SOD的含量,细胞丙二醛(MDA)检测试剂盒检测MDA的含量,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)与Western Blot检测细胞内还原型辅酶Ⅱ氧化酶1(Nox1)、细胞内还原型辅酶Ⅱ氧化酶4(Nox4)m RNA与蛋白的表达。结果:CCK-8和Brd U检测结果表明ISO可浓度及时间依赖性抑制PDGF-BB刺激的PASMCs增殖及DNA合成(P<0.05);流式细胞仪检测检测结果表明ISO可抑制PDGF-BB诱导的PASMCs分裂,阻滞PASMCs细胞周期于G0/G1期(P<0.05);荧光酶标仪检测结果表明ISO可抑制PDGF-BB诱导PASMCs内ROS的产生(P<0.05);SOD和MDA活性检测试剂盒检测结果表明ISO能够拮抗PDGF-BB诱导PASMCs内SOD的表达下调以及MDA的表达上调(P<0.05);RT-PCR与Western Blot显示ISO能够抑制PASMCs内Nox1/4 m RNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论:ISO能够抑制PDGF-BB诱导的PASMCs增值,其机制可能与抑制氧化应激有关。

异丹叶大黄素在体外对Cu^(2+)介导的人低密度脂蛋白过氧化的抑制作用(英文)

目的 研究异丹叶大黄素 (Iso)对Cu2 + 介导的人低密度脂蛋白 (LDL)过氧化及氧化LDL(ox LDL)对小鼠巨噬细胞毒性的抑制作用。方法 用序贯超离心法分离血脂正常的供血者血清LDL ,分离的LDL 1mg·mL- 1磷酸缓冲液 (pH 7 4) ,与 10μmol·L- 1CuSO4 于 3 7℃水浴温育 10h以引起LDL过氧化 ,给药组预先加入不同浓度Iso ,对照组加等量生理盐水 ,测定丙二醛(MDA)的生成量、维生素E的耗竭以及LDL电泳迁移率。另外测定用ox LDL处理小鼠腹腔巨噬细胞线粒体的膜电位、吞噬刚果红及释放NO的量。结果 1-10 0 μmol·L- 1Iso剂量依赖性地抑制Cu2 + 引起的人LDL氧化时MDA的生成量、维生素E的耗竭及电泳迁移率的升高。 10 μmol·L- 1Iso能防止 0 1mg·mL- 1ox LDL与小鼠腹腔巨噬细胞温育 4h后线粒体膜电位的损伤、吞噬刚果红功能以及NO释放量的降低。结论 Iso在体外对Cu2 + 介导的LDL过氧化以及ox LDL对小鼠巨噬细胞的毒性有保护作用。

异丹叶大黄素对前列腺癌细胞血管生成相关蛋白的影响

目的探讨异丹叶大黄素对前列腺癌细胞血管生成相关蛋白缺氧诱导因子1α(hypoxiainduciblefactor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factorα,VEGF-α)、上皮细胞激酶-2(erythropoietin producing human hepatocelluar A2,EphA2)、人基质金属蛋白酶2(Mateixmetalloproteinases 2,MMP2)表达水平的影响。方法选取LNCAP细胞,传代培养后进行siRNA转染,将细胞分为空白对照组、HIF-1αsiRNA组、VEGF-αsiRNA组、EphA2 siRNA组、MMP2 siRNA组、异丹叶大黄素组、异丹叶大黄素+HIF-1αsiRNA组、异丹叶大黄素+VEGF-αsiRNA组、异丹叶大黄素+EphA2 siRNA组,采用Western Blot检测HIF-1α、VEGF-α、EphA2、MMP2的蛋白表达水平。结果与空白组(0.6138±0.0316)相比,HIF-lαsiRNA组(0.0317±0.0019)、异丹叶大黄素+HIF-lαsiRNA组(0.0372±0.0172)HIF-1α蛋白表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与空白组(0.0678±0.0049)相比,VEGF-αsiRNA组(0.0159±0.0006)、异丹叶大黄素+VEGF-αsiRNA组(0.0112±0.0007)VEGF-α蛋白蛋白表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与空白组(0.1685±0.0125)相比,EphA2siRNA组(0.1365±0.0287)、异丹叶大黄素+EphA2 siRNA组(0.1655±0.0388)EphA2蛋白表达量差异无统计学意义(P<0.05)。HIF-lαsiRNA组、VEGF-αsiRNA组、EphA2 siRNA组MMP2蛋白表达量与空白组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论异丹叶大黄素通过抑制HIF-1α、VEGF-α、EphA2、MMP-2蛋白的表达,抑制前列腺癌的血管拟态形成,从而抑制前列腺癌的发生发展。

异丹叶大黄素对低氧肺动脉平滑肌细胞增殖的作用及机制

目的:观察异丹叶大黄素(ISO)对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响,并探讨其可能机制。方法:不同浓度的ISO在低氧或常氧培养条件下孵育大鼠PASMCs 24 h后,CCK-8试剂盒检测细胞增殖与细胞毒作用,流式细胞仪分析细胞周期,实时定量PCR(RT-PCR)检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期蛋白E(Cyclin E)、细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)、细胞周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)mRNA的表达,Western Blot检测总的及磷酸化的磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)与蛋白激酶B(Akt)表达,荧光酶标仪检测活性氧族(ROS)的产生。结果:CCK-8检测结果表明ISO能够抑制低氧PASMCs增殖(P<0.05),且实验浓度ISO对PASMCs无明显毒性作用(P>0.05);流式细胞仪结果表明ISO使处于G0/G1期的PASMCs比例增加(P<0.05),处于S期PASMCs比例减少(P<0.05);RT-PCR检测结果表明ISO能够抑制Cyclin D1、CyclinE、CDK2、4、6 mRNA的表达(P<0.05);Western Blot检测结果表明ISO能够抑制PI3K/Akt信号通路的活化(P<0.05);荧光酶标仪检测结果表明ISO能够抑制ROS的产生(P<0.05)。结论:ISO可抑制低氧PASMCs增殖,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路的活化及ROS的产生有关。

异丹叶大黄素下调XIAP基因的化疗增敏作用研究

目的观察异丹叶大黄素(ISO)对膀胱癌细胞增殖及X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)的影响,并观察异丹叶大黄素对化疗药物多西他赛诱导膀胱癌细胞凋亡及其细胞毒性的增敏作用。方法以异丹叶大黄素作用于人源性膀胱癌T24T细胞,以ATPase法检测异丹叶大黄素对膀胱癌细胞的细胞毒性,并以软琼脂集落形成实验,检测异丹叶大黄素对T24T增殖能力的影响。以逆转录-聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测异丹叶大黄素对膀胱癌细胞X染色体连锁凋亡抑制蛋白基因表达的影响。以ATPase法、倒置显微镜下以及流式细胞仪分别观察检测异丹叶大黄素对多西他赛诱导的膀胱癌细胞凋亡和细胞毒性的影响。结果异丹叶大黄素可显著抑制膀胱癌细胞的增殖和集落形成,其IC50约为(54.5±3.6)μmol·L-1。经蛋白印迹法和逆转录-聚合酶链反应法证实,异丹叶大黄素在作用于人源性膀胱癌T24T细胞后,其X染色体连锁凋亡抑制蛋白基因在蛋白和mRNA水平均显著性降低。经多西他赛处理T24T细胞后,IC50为(8.78±1.32)nmol·L-1;而联用异丹叶大黄素后,IC50仅为(1.02±0.38)nmol·L-1,两者之间有显著性差异(P<0.01)。经流式细胞仪检测,T24T细胞接受2.5 nmol·L-1多西他赛组凋亡率(21.07±2.79)%显著低于联用异丹叶大黄素治疗组的凋亡率(49.59±5.67)%(P<0.01)。结论异丹叶大黄素可抑制膀胱癌细胞增殖,并可通过下调X染色体连锁凋亡抑制蛋白基因表达,显著增强多西他赛诱导的膀胱癌细胞凋亡,并增强细胞毒性。

异丹叶大黄素在Caco-2细胞模型上转运机制的研究

异丹叶大黄素具有抗炎、抗氧化、抗癌等药理活性。该文研究了异丹叶大黄素在Caco-2细胞模型上的吸收转运机制。采用UPLC法,应用PDA检测器在310 nm处对异丹叶大黄素进行含量测定并计算表观渗透系数P_(app)。考察不同浓度异丹叶大黄素在Caco-2细胞上的毒性以确定转运实验的给药浓度。探讨了时间、浓度、温度、转运体抑制剂对异丹叶大黄素在体外细胞模型上跨膜转运的影响。实验结果表明,异丹叶大黄素在10~60μmol·L^(-1),孵育14 h内,对Caco-2细胞没有明显毒性。异丹叶大黄素在Caco-2细胞模型上的转运具有一定的浓度依赖性,其表观渗透系数P_(app)大于10×10^(-6)cm·s^(-1),易被Caco-2细胞吸收。BL侧的转运量在3 h达到最大值,6 h有所下降。4℃条件下,P_((app)(AP-BL))与P_((app)(BL-AP))均比37℃条件显著减小。加入P-gp转运体抑制剂维拉帕米后P_((app)(AP-BL))明显增大;加入MRP转运体抑制剂丙磺舒和MK-571后,P_((app)(BL-AP))明显减小。研究结果提示,异丹叶大黄素在Caco-2细胞模型上的转运方式主要是被动扩散,P-gp及MRP可能参与了异丹叶大黄素的外排转运。

异丹叶大黄素在抗肿瘤作用机制中的研究进展

作为一种从中药射干、买麻藤及葡萄中提取的天然中药单体,近来发现异丹叶大黄素(ISO)对膀胱癌、前列腺癌、神经胶质细胞瘤等肿瘤的生长增殖、凋亡、自噬等致瘤过程起重要作用。本文回顾了近几年异丹叶大黄素在抗肿瘤作用机制中的研究成果并展望了异丹叶大黄素今后研究与应用所面临的挑战。

异丹叶大黄素抑制膀胱癌细胞增殖的功能研究

利用不同浓度的异丹叶大黄素(Isorhapontigenin,ISO)处理膀胱癌细胞株5637后,通过MTT细胞毒性实验检测细胞增殖活性;用荧光定量RT-PCR方法检测UCA1基因表达;采用流式细胞术检测细胞周期的变化以及细胞划痕法检测细胞迁移活性;应用Western blotting检测ISO处理组与对照组细胞的迁移相关蛋白E-cadherin和N-cadherin的表达,最终揭示了ISO抑制膀胱癌的细胞株5637增殖与迁移的分子机制.结果表明:20μmol/L ISO对膀胱癌细胞株5637增殖具有明显抑制作用,与10μmol/LISO相比抑制作用显著提高.ISO可抑制膀胱癌细胞株5637迁移,并通过下调UCA1基因表达诱导G0/G1细胞周期阻滞从而抑制细胞增殖,且具有剂量依赖性.

勘误

2022年第44卷第5期794~801页《异丹叶大黄素对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的影响》一文,图7更改如下.