GnRHa对离体培养异位、在位内膜间质细胞生长抑制及分泌VEGF的影响

目的研究GnRHa对子宫内膜异位症(简称内异症)患者离体培养异位、在位子宫内膜间质细胞生长抑制及分泌VEGF的影响。方法体外原代培养人内异症异位、在位子宫内膜间质细胞,用10-10M、10-8M和10-6M的GnRHa分别干预,用MTT法测定内膜间质细胞的生长增殖情况;用ELISA法测定其分泌的血管内皮生长因子(VEGF)浓度的变化。结果 GnRHa可抑制内异症异位及在位内膜间质细胞的生长增殖,呈剂量和时间依赖性(P<0.05),且对异位内膜间质细胞生长的抑制率明显高于在位(P<0.05);GnRHa可降低异位及在位内膜间质细胞分泌的VEGF的浓度,呈剂量依赖性(P<0.05),且高浓度(10-6M)对异位强于在位(P<0.05)。结论 GnRHa可明显抑制子宫内膜异位症患者异位、在位子宫内膜间质细胞的生长,降低其分泌VEGF的浓度。

GnRHa对子宫内膜异位症内膜间质细胞生长增殖及血管形成的影响

目的:研究GnRHa对子宫内膜异位症异位及在位内膜间质细胞增殖、凋亡及血管形成的影响。方法:体外原代培养人内异症异位及在位子宫内膜间质细胞,用不同浓度的GnRHa分别干预,四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法测定内膜间质细胞的生长增殖活力;Annexin V-FITC和PI双染、流式细胞仪(FCM)检测异位及在位内膜间质细胞凋亡及周期变化;免疫细胞化学检测血管内皮生长因子(VEGF)表达的改变。结果:GnRHa可抑制内异症异位及在位内膜间质细胞增殖且呈剂量依赖关系;GnRHa能明显增加异位及在位内膜细胞的凋亡率(P<0.05),且异位内膜细胞凋亡率明显高于在位内膜(P<0.05);不同浓度的GnRHa作用后,内膜间质细胞均发生细胞周期阻滞,G1期细胞增加,S期细胞减少,此作用随浓度增加而增强(P<0.05);免疫细胞化学测定表明,GnRHa可降低异位及在位内膜间质细胞VEGF的表达(P<0.05),且随GnRHa浓度增加而增强(P<0.05)。结论:GnRHa可明显抑制人内异症异位及在位子宫内膜间质细胞的生长并促进其凋亡,降低异位及在位内膜间质细胞VEGF的表达。

消症方含药血清对子宫腺肌病异位内膜间质细胞VEGF-CmRNA及MMP-9mRNA表达的影响

目的探讨消症方含药血清对子宫腺肌病异位内膜间质细胞血管内皮因子-C(VEGF-C)mRNA、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA表达的影响。方法将雌性SD大鼠分为5组:消症方高、中、低剂量组,孕三烯酮组,生理盐水组,药物灌胃后采血制备含药血清,采用胶原酶消化法培养人离体子宫异位内膜间质细胞,将传至P4代细胞,制备成单细胞溶液接种于96孔培养板后,分别加入不同浓度消症方含药血清、孕三烯酮含药血清和生理盐水含药血清,以CCK-8法检测含药血清对其增殖的影响,PCR法检测其对VEGF-C mRNA和MMP-9 mRNA表达的影响。结果与生理盐水组相比,孕三烯酮组和不同剂量消症方对异位内膜间质细胞增殖的影响,有差异显著性(P<0.05),其中消症方高剂量含药血清最具明显抑制作用。与生理盐水组相比,孕三烯酮对VEGF-C mRNA的表达,无显著性差异(P<0.05),消症方对VEGF-C mRNA的表达,有显著差异(P<0.05)。孕三烯酮和消症方对MMP-9 mRNA的表达均有不同程度的下降,有显著性差异(P<0.05)。结论消症方可通过降低异位内膜间质细胞VEGF-C mRNA和MMP-9 mRNA的表达,最终抑制子宫异位内膜的种植、侵袭和转移。

桂枝茯苓胶囊对内膜异位症患者异位内膜间质细胞增殖及Ang-2水平的影响

目的 探讨桂枝茯苓胶囊对内膜异位症（EM）患者异位内膜间质细胞增殖及促血管生成素-2（Ang-2）水平的影响.方法 将120例EM患者随机分为观察组与对照组,每组60例,对照组患者给予妈富隆（1片/d）联合达菲林（8 mg/d）治疗,观察组在对照组的基础上给予桂枝茯苓胶囊（3粒/次,3次/d）治疗,治疗时间为6个月,对比分析两组患者的治疗效果.分别于治疗前后应用MTT法测定两组间质细胞生长抑制率,应用ELISA法测定两组间质细胞分泌的Ang-2水平.结果 观察组总有效率为96.67%,对照组为83.33%,差异有统计学意义（P〈0.05）.两组治疗后总盆腔体症评分、总阳性体征评分、总主观体征评分显著低于治疗前,且观察组治疗后症状评分低于对照组（P〈0.05）.观察组治疗后异位内膜间质细胞吸光值（OD）值及Ang-2水平低于对照组（P〈0.05）.结论 桂枝茯苓胶囊能有效抑制内膜间质细胞增殖及Ang-2分泌,改善患者临床症状,提高治疗效果.

丹参对子宫内膜异位症间质细胞MMP-9mRNA及蛋白表达的影响

目的:观察丹参对子宫内膜异位症间质细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)m RNA和蛋白表达的影响,探讨其可能的机制。方法:用混合酶消化法进行间质细胞培养,分别加入空白对照(空白组),不同浓度丹参(1 mg/L,5 mg/L,10 mg/L,15 mg/L)(丹参1组、丹参2组、丹参3组、丹参4组)。细胞常规培养48 h后,用CCK-8法观察不同浓度的丹参对间质细胞增殖的影响,RT-PCR法检测其对MMP-9 m RNA表达的影响,Western blotting检测其对MMP-9蛋白含量的影响。结果:CCK-8法结果显示,除丹参1组外,其余丹参组间质细胞增殖与空白组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。与空白组比较,除丹参1组外,各丹参组MMP-9m RNA表达降低、MMP-9蛋白表达量减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:丹参可以抑制异位内膜间质细胞增殖,同时可以抑制MMP-9m RNA和蛋白的表达,从而降低对细胞外基质的降解,最终抑制子宫异位内膜的种植、侵袭和转移。