胃癌中异位病毒整合位点-1的表达及临床意义

目的探讨异位病毒整合位点-1(EVI-1)在胃癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学法检测胃癌组织和癌旁组织中EVI-1蛋白的表达情况;采用蛋白质印迹法(Western blot)和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应,分别检测人胃癌细胞株AGS、NCI-N87、MGC-803、HGC27和永生化正常胃黏膜细胞株GES-1中EVI-1的3个剪切变异体蛋白(MDS1/EVI-1、EVI-1、EVI-1△324)和EVI-1 mRNA(除MGC-803)的表达水平。结果胃癌组织中EVI-1蛋白的阳性表达率为76.7%(46/60),明显高于癌旁正常胃组织的41.7%(25/60),差异有统计学意义(P﹤0.01)。胃癌细胞中MDS1/EVI-1和EVI-1蛋白相对表达量均高于正常胃黏膜上皮细胞,差异均有统计学意义(P﹤0.05);MGC-803、AGS胃癌细胞中EVI-1△324蛋白相对表达量也高于正常胃黏膜上皮细胞,但差异无统计学意义(P﹥0.05)。HGC27、NCI-N87、AGS细胞株中EVI-1 mRNA相对表达量均高于GES-1细胞株,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论胃癌中EVI-1蛋白(除EVI-1△324亚型)和EVI-1 mRNA的表达均较癌旁正常胃黏膜组织高。EVI-1基因可能是潜在的胃癌原癌基因,尚有待进一步深入研究。

EVI1表达与食管癌细胞放疗敏感性的关系及机制

目的探讨异位病毒整合位点1(EVI1)对食管癌细胞放疗敏感性的影响及作用机制。方法选择在我院接受放射治疗的食管癌患者组织标本67例,qRT-PCR检测EVI1在食管癌组织中的表达水平,Spearman等级相关分析EVI1的表达与放疗敏感性的相关性。常规培养ECA109细胞,采用分次放疗递增法诱导建立放射抵抗型细胞株ECA109(ECA109R),MTS检测ECA109和ECA109R细胞48 h的放射剂量IC50值,western blotting检测ECA109和ECA109R细胞中的EVI1表达。ECA109R细胞分为对照组(si-NC组)和干扰EVI1表达组(si-EVI1组)并进行siRNA转染,采用western blotting检测各组细胞中EVI1的表达,MTS检测各组细胞48 h的放射剂量IC50值。si-NC组和si-EVI1组细胞经辐射后,平板克隆检测各组细胞平板克隆形成率,流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,western blotting检测各组细胞中凋亡相关蛋白活化caspase 3、Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果EVI1在放疗抵抗食管癌组织中的表达高于其在放疗敏感食管癌组织中的表达(P<0.05),EVI1的表达与食管癌患者分化程度和临床分期相关(P<0.05),EVI1的表达与放疗敏感性呈负相关(P<0.05)。与ECA109细胞相比,ECA109R细胞48 h的放射剂量IC50值和EVI1的表达增加(P<0.05)。siRNA转染ECA109R细胞后,与si-NC组相比,si-EVI1组细胞中EVI1的表达降低和放射剂量IC50值降低(P<0.05)。与辐射si-NC组相比,辐射si-EVI1组细胞平板克隆形成率降低,细胞凋亡率增加(P<0.05)。与辐射si-NC组相比,辐射si-EVI1组细胞中活化caspase 3和Bax蛋白的表达均增加,Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。结论EVI1可能通过调控凋亡相关蛋白增加食管癌细胞放疗敏感性,是治疗食管癌的潜在靶标。