靶向神经纤毛蛋白-1的分子探针与小鼠异位胶质瘤结合的磁共振研究

目的通过磁共振成像技术检测靶向神经纤毛蛋白-1（neuropilin-1，NRP-1）的分子探针与小鼠异位脑胶质瘤的结合能力。方法应用碳二亚胺法合成以NRP-1为靶点，以tLyP-1为配体的分子探针USPIO—PEG-tLyP-1（靶向组）；通过胶质瘤组织移植法制备胶质瘤模型小鼠；30只荷瘤小鼠随机选取12只进行组织解剖学取材，其余18只随机分为3组：对照组（A组），探针对照组（B组）和探针组（C组），分别经小鼠尾静脉给予20μl生理盐水、20μl USPIO—PEG、20μl USPIO—PEG—tLyP-1，每组在0h、6h、12h、24h磁共振检测T2WI及T2MAPPING序列；成像结束后立即处死荷瘤鼠，取胶质瘤组织进行普鲁士蓝染色检测铁颗粒含量以观检测胶质瘤组织与新型分子探针的结合能力；取肝肾组织固定切片后行病理染色检测新型分子探针的生物毒性。结果胶质瘤组织NRP-1的表达量明显高于肝、肾、脑组织（P〈0．05）；C组荷瘤鼠胶质瘤组织24h弛豫时间[（14．19±0．87）ms]与B组24h弛豫时间[（25．94±0．77）ms]相比明显下降（Ｐ〈0．05），c组胶质瘤组织蓝染铁颗粒明显比B组多（P〈0．05）。结论在动物实验中，以NRP-1为靶点的分子探针有明显的靶向作用，具有良好的生物相容性，动物组织无明显的损伤。

神经纤毛蛋白-1靶向性分子探针在裸鼠异位脑胶质瘤分级诊断中的应用

目的观察神经纤毛蛋白-1(neuropilin-1,NRP-1)在不同级别脑胶质瘤细胞中的表达;通过磁共振成像(MRI)探讨新型分子探针(USPIO-PEG-tLyP-1)在裸鼠异位脑胶质瘤分级诊断中的应用价值。方法利用Western blot检测不同级别脑胶质瘤细胞系中NRP-1表达水平;利用碳二亚胺法合成USPIO-PEG-tLyP-1;建立U87-MG荷瘤鼠模型(U87-MG组)、CHG-5荷瘤鼠模型(CHG-5组)各10只,从两组中各选取移植瘤体积约0.6 cm3的荷瘤鼠6只,分别经尾静脉给予2 mg/kg分子探针,在0 h、6 h、12 h、24 h进行磁共振检测,计算出R2值;成像结束后处死荷瘤鼠,制作肿瘤组织切片,行普鲁士蓝染色检测铁颗粒含量,比较两组瘤组织与分子探针的结合能力。结果U87-MG、CHG-5细胞系中NRP-1表达水平明显高于人星形胶质细胞(HA),且NRP-1在U87-MG中的表达高于在CHG-5细胞中的表达(P<0.01)。MRI结果:注射分子探针前,两组瘤组织R2值比较,差异无统计学意义[U87-MG组:(10.35±0.52),CHG-5组:(9.86±0.43),t=1.779,P=0.106];注射分子探针后,与CHG-5组比较,U87-MG组瘤组织R2值较高[6 h:U87-MG组(11.63±0.85),CHG-5组(10.51±0.49),t=2.796,P=0.019;12 h:U87-MG组(14.23±0.68),CHG-5组(12.29±0.28),t=6.462,P=0.000;24 h: U87-MG组(13.36±0.92),CHG-5组(11.32±0.64),t=4.459,P=0.001]。普鲁士蓝染色结果:U87-MG组瘤组织蓝染颗粒明显多于CHG-5组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论神经纤毛蛋白-1靶向性分子探针可以对不同恶性程度的裸鼠异位脑胶质瘤进行分级诊断。