SiRNA沉默NK细胞CD158b表达及对异体树突状细胞的杀伤作用

目的探讨特异性的SiRNA干扰人NK细胞CD158b基因表达对异体树突状细胞杀伤的影响。方法将特异性的CD158b-SiRNA导入人NK细胞后,qRT-PCR及流式检测NK细胞CD158b基因mRNA及其蛋白质的表达。LDH释放法检测RNA干扰NK细胞CD158b前后对异体DC细胞杀伤效果的影响。结果特异性siRNA片段能有效降低CD158b mRNA水平,最大干扰效率达72%;脂质体及阴性对照siRNA片段对NK细胞CD158b的表达无特异的干扰作用;流式细胞仪检测证明转染特异SiRNA-CD158b后CD158b蛋白表达明显下降。RNA干扰NK细胞CD158b的表达后能显著提高其杀伤异体DC的活性。结论特异性的CD158b-SiRNA可有效降低NK细胞中CD158b mRNA水平,明显下调CD158b蛋白表达。RNA干扰NK细胞CD158b后所产生的异源反应性NK细胞对异体DC细胞杀伤效果显著增加,证明通过人工改变NK细胞KIR基因的表达产生KIR-HLA错配的异反应性NK细胞有望应用于异基因骨髓移植中降低GVHD。