脂肪间充质干细胞与甲泼尼龙联合用药对小型猪异体皮肤移植的影响

旨在探究脂肪间充质干细胞(adipose derived mesenchymal stem cells,ADSCs)与甲泼尼龙(methylprednisolone,MP)联合用药对小型猪异体皮肤移植(allogeneic skin graft,ASG)所产生的免疫排斥反应与创口愈合的影响。对12头小型猪建立同种异体皮肤移植模型,根据术后对异体皮肤移植皮片不同的干预方式,将小型猪随机分为4组:异体皮肤移植组(ASG)、甲泼尼龙组(MP)、脂肪间充质干细胞组(ADSCs)、脂肪间充质干细胞与甲泼尼龙联合用药组(ADSCs+MP)。术前与术后7、14 d采集血液和组织样本,术后即刻及术后7、14、21 d拍照记录移植表皮临床变化情况。通过对移植皮片表观检查、病理组织学检测,血常规以及血清生化,移植皮片组织氧化应激、炎症、再生的指标检测,综合评价4组不同干预方式对小型猪异体皮肤移植所产生的免疫排斥反应与创口愈合方面的影响。从皮片表观与病理学分析可知,ASG组移植皮片存活时间在7 d左右、MP组移植皮片存活时间在7~14 d、ADSCs组与ADSCs+MP组存活时间为14~21 d。并且在7、14 d时ADSCs+MP组的GSH、SOD的表达量显著升高,在免疫排斥方面,ADSCs+MP组的CD4^(+)T细胞的数量,NF-κB的蛋白与基因表达量,IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-6促炎因子的表达量相对于ASG组显著降低。在创口愈合方面,ADSCs+MP组相对于ASG组VEGF、TGF-β的蛋白表达,SDF-1、CXCR4的表达显著上升。并且ADSCs+MP组相对于ASG组,PI3K、AKT、11β-HSD1的蛋白与基因的表达量显著降低。综上所述:ADSCs+MP组相对于ASG组与MP组,可以延长移植皮片存活时间。并且ADSCs+MP可以有效通过促进GSH、SOD的表达抑制氧化应激。在排异方面,ADSCs+MP可以通过抑制NF-κB的表达抑制IL-2、IFN-γ、IL-6、TNF-α等炎性因子的表达,从而抑制移植过后的免疫排斥反应。并且ADSCs+MP可以通过促进VEGF、TGF-β等愈合因子的表达促进创口愈合。进一步研究发现ADSCs可能通过PI3K/AKT来影响11β-HSD1的表达,进而抑制皮肤皮质醇含量,并促进TGF-β、VEGF等生长因子的表达来促进创口肉芽组织再生与血管迁移。

深低温冻存同种异体皮肤移植中转化生长因子β1的表达

背景:皮肤移植和创面覆盖是创伤、烧伤治疗的重要措施。目前,同种异体皮仍然是可利用的最佳创面覆盖物。目的:通过检测转化生长因子β1在深低温冻存后的大鼠同种异体皮肤移植后的表达,评估深低温贮存同种异体皮在创面上的应用。方法:取大鼠皮肤保存于低温-20℃(低温保存组)及-80℃深低温(深低温保存组),冻存1周、1,2个月后,皮片分组移植于同种大鼠背部进行实验,并以自体移植大鼠作为对照组。结果与结论:同低温保存组相比,深低温保存组转化生长因子β1的表达被抑制,移植皮肤排斥反应出现时间延迟及存活时间延长,排斥反应评分也较低。同低温冻存相比,深低温冷冻保存能使同种异体移植物的转化生长因子β1抗原表达降低。提示深低温冻存的异体皮作为一种创面临时覆盖物,在存在皮肤组织缺失或皮源不足的情况下具有广阔的应用前景。

异体皮肤移植后MIP-3α的表达及其抗体延长存活的研究

目的 研究异体皮肤移植后表皮MIP 3α的表达及其抗体延长移植皮肤存活的作用。方法 进行同种异体小鼠皮肤移植 ,免疫组化测定移植皮肤组织内MIP 3α的表达 ;局部应用MIP 3α抗体 ,观察其对移植皮肤存活的影响。结果 移植术后表皮MIP 3α表达增加 ,分别于术后 2 4h及第五天出现两个高峰 ,真皮及其皮下组织未见MIP 3α的表达 ;异体皮肤平均存活时间为 (7 5± 0 9)d ,MIP 3α单抗局部注射 1μg/ml治疗组存活 (8 3± 1 2 )d ,与对照组相比无明显差异 (P >0 0 5 ) ;10 μg/ml组与 5 0 μg/ml组分别为 (15 3± 2 3 )d与 (2 1 8± 1 6)d ,二者均显著延长移植皮肤的存活时间 (P <0 0 1)。结论 异体皮肤移植后表皮MIP 3α分泌增加 ,促进郎格罕细胞的迁移以进行抗原递呈 ,是移植排斥反应启动与进展的重要因素 ;应用MIP

黑鳗藤新苷K对大鼠佐剂性关节炎和同种异体皮肤移植排斥反应的治疗作用

目的:研究黑鳗藤新苷K对大鼠佐剂性关节炎和同种异体皮肤移植排斥反应的治疗作用。方法:采用完全弗氏佐剂(CFA)诱导大鼠佐剂性关节炎(AA)模型观察黑鳗藤新苷K对AA大鼠原发性炎症和继发性病变的治疗作用;采用大鼠同种异体皮肤移植排斥反应模型观察黑鳗藤新苷K对同种异体移植皮片存活时间的延长作用。结果:黑鳗藤新苷K对AA大鼠致炎足肿胀度、侧足肿胀度、尾部结节数及前足红肿程度均有显著的抑制作用(P<0.05,P<0.01或P<0.001),其作用强度与雷公藤多苷相当;黑鳗藤新苷K能明显延长大鼠同种异体移植皮片的存活天数(P<0.05),减少皮肤移植排斥反应。结论:黑鳗藤新苷K能有效防治大鼠佐剂性关节炎的原发性炎症和继发性病变;对大鼠同种异体皮肤移植排斥反应也有一定的治疗作用。

KSHV编码的趋化因子vMIPII在小鼠异体皮肤移植免疫排斥反应中的作用

目的 重组vMIPII在大肠杆菌中表达及其纯化。观察纯化的vMIPII蛋白对小鼠异体皮肤移植免疫排斥反应的抑制作用。方法 以 pET3 2a为vMIPII克隆基因的表达载体 ,以大肠杆菌BL2 1(DE3 ) plysS为表达菌 ,诱导表达出硫氧还蛋白 vMIPII的融合蛋白 (2 6× 10 3 D)。经金属离子亲和吸附、肠激酶消化以游离vMIPII、阳离子交换层析等步骤纯化目的蛋白。纯化的vMIPII从尾静脉连续 14d注入异体皮肤移植小鼠 (昆明鼠 /Balb/c)。结果 从 1L发酵菌液中可获得高纯度目的蛋白约 4mg。注射vMIPII的异体皮肤移植小鼠组移植皮存活时间较未注射对照组延长 7d。结论 纯化的重组vMIPII对小鼠异体皮肤移植免疫排斥反应有明显的抑制作用 。

同基因异体皮肤移植在危重烧伤病人治疗中的应用

目的 :探讨同基因异体皮临床应用效果。方法 :经术前准备 ,1例严重烧伤病人双手背深度创面切痂后 ,用同卵孪生子异体皮覆盖 ;其余切痂创面植自体微粒皮加大张同种异体皮。结果 :双手背植皮区未观察到排斥现象 ,而其余植皮区异体皮则最终排斥。结论 :同基因异体皮移植后 。

异体皮肤移植法测定鸡细胞免疫

为了研究隐孢子虫感染对鸡细胞免疫功能的影响，设计了鸡异体皮肤移植试验。受试鸡为ＳＰＦ鸡，饲养于隔离器内。感染组１～３日龄感梁隐抱于虫，并于感染后４ｄ粪便检查隐孢子虫卵囊，证明感染成功。２０日龄时进行皮肤移植试验。手术切口在鸡腿内侧，盼关节下方。移植皮片不缝合，采用创可贴包扎固定。同体移植皮片９６％（２５／２６）被接受，异体移植皮片，对照组１００％（１３／１３）被排斥，而感染组５８．３％（７／１２）被排斥，从而建立了异体皮肤移植测定鸡细胞免疫的方法。

脱细胞异体皮肤细胞外基质——医用组织补片在美容外科的应用

目的介绍脱细胞异体皮肤细胞外基质医用组织补片在美容外科中的临床应用经验。方法自2002年3月至2005年10月，应用脱细胞异体皮肤细胞外基质——医用组织补片，对患者不同部位进行填充的美容手术，其中头面部填充于皮下浅筋膜层，唇部、颏部、唇裂合并牙槽裂部填充于皮下深筋膜层或肌肉浅层，隆乳术中用于胸大肌减张。结果本组115例患者经1～27个月随访．1例唇裂合并牙槽裂者因补片填充量不足凹陷未完全矫正；1例鼻唇沟填充者其左侧出现血肿、局部出现硬结，于2个月后将左侧假体取出重新填充，但术后6个月仍有不平整，其余患者均获得良好的美容效果。结论脱细胞异体皮肤细胞外基质医用组织补片可以广泛地应用于美容外科的临床填充术。

水凝胶促进骨髓间充质干细胞在同种异体皮肤移植中的免疫调节作用

骨髓间充质干细胞（BMSCs）具有免疫调节作用，在皮肤移植方面已有一定的应用，但其治疗效果极大地受限于移植细胞的滞留率和存活率。水凝胶（Hydrogel）是种新型生物材料，已被实验证实可以促进干细胞的增殖和分化，我们将应用可注射性水凝胶作为载体输送BMSCs到移植皮肤中，促进移植细胞的定植与存活，从而提高移植皮肤的功能。

孪生异体皮肤移植治愈特重度烧伤一例并文献复习

在本刊文献报道中,同/异卵双生子皮肤移植治疗烧伤创面较为少见,为此,编者特请武汉市第三医院烧伤研究所谢卫国教授审阅此文,点评如下:"孪生子捐献皮肤移植是异体皮肤移植的特殊情况。同卵双胞胎之间的异体皮肤移植属同基因异体移植,相当于自体移植。孪生异体皮肤移植国内外虽均已有报道,但本文报道的孪生子有可能为异卵双胞胎,在无法行组织配型时,应采用自、异体皮混合移植,以确保不致出现严重后果,这一经验值得参考。在目前我国人体组织器官捐献供体不足的情况下,采用亲属捐献异体皮移植,尤其是孪生子间捐献,不失为一种值得考虑的治疗方法"。

同种异体组织工程复合皮肤移植修复大鼠皮肤缺损

目的 检测组织工程皮肤的生物活性及免疫原性 ,探讨临床可行性 .方法 以新生 SD大鼠皮肤为原材料培养组织工程复合皮肤并将其移植到成年 Wistar大鼠 ,通过大体观察、组织学检测对不同时间自体、异体及组织工程复合皮肤移植进行比较 ,研究了组织工程复合皮肤的存活及免疫排斥情况 .结果 异体皮肤移植组有明显的免疫排斥 ,组织工程皮肤组未见有明显排斥 ,且与自体皮肤结合良好 .结论 组织工程复合皮无明显的免疫排斥 ,是较好的皮肤移植替代品 。

重组趋化因子vMIPⅡ对小鼠异体移植皮肤存活时间的影响

目的 观察纯化的重组vMIPⅡ蛋白对小鼠异体皮肤移植免疫排斥反应是否有抑制作用及能否延长移植皮肤的存活时间。方法 pET3 2a为vMIPⅡ克隆基因的表达载体 ,在大肠杆菌中诱导表达出硫氧还蛋白 vMIPⅡ的融合蛋白 (2 6× 10 3 )。经金属离子亲和吸附、肠激酶消化以游离vMIPⅡ、阳离子交换层析等步骤纯化目的蛋白。用体外配体结合实验证实重组vMIPⅡ与趋化因子受体CCR5的结合能力。纯化的vMIPⅡ经尾静脉给药异体皮肤移植小鼠 (昆明鼠 /Balb/c)连续 14d。结果 经纯化可获得高纯度目的蛋白。vMIPⅡ与趋化因子受体CCR5结合的解离常数 (Kd)为 11 5 6± 1 98nmol/L。给药vMIPⅡ的异体皮肤移植小鼠组移植皮存活时间较未注射对照组延长至术后 7天以上。结论 纯化的重组vMIPⅡ对小鼠异体皮肤移植免疫排斥反应有明显的抑制作用 。

雷公藤甲素减轻同种异体植皮排斥反应及其机制探讨

目的 :探讨雷公藤甲素液局部应用对同种异体植皮的影响 ,并研究其影响机制。方法 :雷公藤甲素液浸泡供皮片后行同种异体移植 ,部分皮片行表皮郎克罕氏细胞 (Lc)计数及琥珀酸脱氢酶定性检测后观察皮片开始排斥时间、平均成活时限及组织学切片。结果 :浸泡过药液的供皮片行同种异体移植后其开始排斥时间推迟 ,平均成活时限延长 ,供皮片的Lc发生了质和量的改变。结论 :雷公藤甲素液 3 3μg/mL 37℃ 3h浸泡供皮片后再异体移植可减轻排异反应 ,其机制可能是Lc功能受抑 ,此方法值得临床应用推广。

异基因脂肪干细胞对皮肤移植免疫调节的影响

目的:探讨异基因ADSCs对大鼠同种异体皮肤移植抗免疫排斥的作用。方法:3-4周Wistar大鼠30只,雌雄不限,体质量150-300g,取新西兰大白兔肾周脂肪行传代培养ADSCs至第四代鉴定、备用;将30只大鼠随机等分三组,A组为自体皮肤移植组,B组为同种异体皮肤移植+PBS局部注射组,C组为同种异体皮肤移植+ADSCs局部注射组;术后3、7、14 d观察皮片成活情况、白细胞计数、巨噬细胞活化率、IL-2、IL-10、IFN-γ表达水平,行统计学分析。结果:A、B、C组大鼠移植皮片坏死时间、血液白细胞计数、巨噬细胞活化率及ELISA检测IL-2、IFN-γ、IL-10含量均表明C组与A、B组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:脂肪来源干细胞在体内具有较低的免疫原性,对大鼠同种异体皮片移植有抗免疫排斥的作用。

皮肤移植物及皮肤组织库的发展现状

烧（创）伤或先天性发育异常造成的皮肤组织缺损或畸形需要大量的皮肤组织移植修复重建,改善其结构与功能。对于治疗大面积烧伤患者而言,由于健康皮肤较少,很难实现自体皮肤移植,异体皮肤移植成为治疗首选方案。