同种异体软骨细胞移植修复兔膝关节软骨缺损的免疫反应

目的 :探讨同种异体软骨细胞移植修复关节软骨缺损的免疫学变化。方法 :将兔分成软骨细胞移植组及骨基质明胶移植组 ,用免疫学及组织学方法 ,研究其免疫反应。结果 :软骨细胞移植组术后检到淋巴细胞增殖 ,植入物局部见到淋巴细胞浸润。结论

异体软骨细胞复合Pluronic修复关节软骨缺损

目的 探讨运用同种异体软骨细胞复合 Pluronic修复关节软骨缺损的可行性 ,并应用 3H- Td R放射自显影方法鉴别软骨缺损修复的细胞来源。 方法 取同种异体软骨细胞体外培养至第 2代 ,用 3H- Td R标记后复合Pluronic植入兔关节软骨缺损区作为实验组 ,并采用单纯Pluronic植入作为材料对照组 ,不作任何处理组为空白对照组 ,分别于 4、8及 16周取材 ,观察其修复效果 ,并应用放射自显影方法鉴别修复组织的细胞来源。 结果 实验组术后 8周 ,缺损表面可见新生软骨形成 ,术后 16周缺损完全修复 ,表面光滑 ,与周围界限模糊 ,放射自显影证实所修复组织的细胞来源于植入细胞。材料对照组及空白对照组缺损均未见明显修复。 结论 1同种异体软骨细胞复合 Pluronic修复关节软骨缺损是可行的 ;2 3H- Td R标记细胞可作为鉴别细胞来源的一种简便可行的方法。

转化生长因子β_1和同种异体软骨细胞及高孔隙率聚乳酸复合物修复兔耳廓软骨缺损

目的 观察加入转化生长因子 β1(transforminggrowthfactor beta 1,TGF β1)的同种异体软骨细胞 /高孔隙率聚乳酸 (poly DL lactide,PDLLA)支架复合物修复兔耳廓软骨缺损的效果。 方法18只大白兔随机分为同种异体软骨细胞 /PDLLA复合物加TGF β1组 (复合物组 )、同种异体软骨细胞 /PDLLA复合物组 (复合物对照组 )和不用任何修复材料的空白对照组 ,每组 6只。分别于 4、12、18周取材 ,行HE和甲苯胺蓝染色 ,观察各组兔耳廓软骨缺损修复情况。结果 术后 18周 ,TGF β1复合物组修复软骨缺损的效果无论从大体标本观察或是病理组织学检查都比复合物对照组的修复效果好 ,空白对照组为纤维组织修复。结论 同种异体软骨细胞 /PDLLA复合物移植可形成组织工程化软骨修复兔耳廓软骨缺损 ,TGF β1可提高同种异体软骨细胞 /PDLLA复合物移植修复兔耳廓软骨缺损的质量。

同种异体软骨细胞-聚羟基乙酸支架复合物修复甲状软骨缺损

背景:将聚羟基乙酸支架与软骨细胞复合,可获得组织工程人工骨。目的:观察同种异体软骨细胞-聚羟基乙酸支架复合物修复乳兔喉甲状软骨缺损的效果。方法:取新西兰成年大白兔20只,构建喉甲状软骨缺损模型后随机分组,实验组于缺损处植入同种异体软骨细胞-聚羟基乙酸支架复合物,对照组于缺损处植入聚羟基乙酸支架。植入后4,8周进行大体观察、组织学观察。结果与结论:(1)大体观察结果:植入后4周,实验组软骨缺损得到一定的修复,修复区域未出现坏死;对照组缺损区域填充有肌肉和结缔组织。植入后8周,实验组软骨缺损得到进一步修复,修复界限不明显;对照组软骨缺损未得到修复,与周围正常软骨之间存在明显界限。(2)免疫组织化学染色结果:实验组植入后4,8周的Ⅱ型胶原表达均高于对照组(P<0.05)。结果表明同种异体软骨细胞-聚羟基乙酸支架复合物可促进乳兔喉甲状软骨缺损的修复。

附加异体软骨支架矫正下睑瘢痕性外翻

目的:本研究在传统的下睑外翻矫正术中,采用异体软骨内置于外翻矫正中的下眼睑,观察其对瘢痕性下睑外翻的临床矫治效果。方法:于眼轮匝肌浅面或深面植入半月形异体软骨支架。结果:2000年1月至2003年12月间烧伤后下睑外翻患者18例,术后17例患者下睑外翻得到彻底矫正,另仅1例因植皮后皮片存活欠佳,导致异体软骨外露,取出后重新植皮修复,4月后再度下睑外翻,经上法修复。经过6个月以上的随访,眼裂启闭功能良好,下睑外翻未复发。结论:在传统的瘢痕性睑外翻矫正术中附加异体软骨支架支撑下睑,可以拮抗其表面皮肤组织的挛缩,防止再度出现下睑外翻。

羟基磷灰石-骨形态发生蛋白复合人工听小骨与同种异体软骨听骨赝复物修复听骨链损伤的比较

背景:在听骨链损伤的治疗过程中,使用何种修复材料尚存在较大的争议。目的:对比新型羟基磷灰石-骨形态发生蛋白复合人工听小骨与同种异体软骨听骨赝复物修复听骨链损伤的效果。方法:将60例慢性中耳炎患者分为对照组和试验组,每组30例。两组患者均行鼓室成形、听骨链重建治疗,对照组采用同种异体软骨听骨赝复物修复,试验组采用新型羟基磷灰石-骨形态发生蛋白复合人工听小骨修复,治疗后随访12个月,对比两组修复效果。结果与结论:(1)空气传导值与气骨间隙值:两组治疗后的空气传导值与气骨间隙值均较治疗前显著改善(P<0.05),试验组治疗后的空气传导值较对照组改善更明显(P<0.05);(2)植入物脱出率:试验组未发生植入物脱出,对照组3例发生植入物脱出;(3)听力提高情况:试验组28例听力得到提高,提高率为93%;对照组25例听力得到提高,提高率为83%,两组间听力提高率比较差异有显著性意义(P<0.05);(4)结果表明:新型羟基磷灰石-骨形态发生蛋白复合人工听小骨修复听骨链损伤,可获得与同种异体骨听骨赝复合物类似的修复效果。

冷冻保存异体软骨移植免疫排斥反应的研究状况

背景:目前多采用冷冻保存方法来降低异体软骨移植免疫排斥反应,但有关异体软骨的取材、冷冻保存方法、冷冻保存条件仍然需要深入的研究探讨。目的:对于冷冻保存异体软骨移植后免疫排斥反应机制的研究进行回顾分析,并对不同保存方法的特点进行比较分析。方法:由第一作者检索1990/2008 PubMed数据及万方数据库有关异体软骨移植后免疫排斥反应及冷冻保存方法对软骨移植影响等方面的相关文献。结果与结论:异体软骨组织移植治疗关节软骨缺损治疗效果明显优于其他治疗方法。冷冻保存异体关节软骨保持了软骨组织的性状和生物学活性,而且可择期完成关节重建,并且有充裕的时间完成多项指标检测,防止供体携带细菌病毒和传染性疾病的传播,并且降低了软骨组织的抗原性,具有较大的临床应用价值。但冷冻保存的各个环节,如:低温保护剂的应用、降温和复温速度等方面还存在诸多问题,软骨移植后仍然会出现软骨吸收、退变等现象。随着冷冻生物学的不断进步,冷冻损伤机制的不断揭示,这些问题终将会解决,软骨组织冷冻保存技术会得到进一步的完善。

几丁质凝胶与同种异体软骨细胞复合修复关节软骨缺损

背景：可注射性水凝胶-几丁质是国际上最新兴起的软骨组织工程材料，它提供了一类新的细胞固定机制。目的：实验拟观察采用同种异体软骨细胞复合几丁质凝胶修复关节软骨缺损的效果。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2004-11/2006-03在中国医科大学中心实验室完成。材料：2周龄新西兰白兔30只，体质量0.3kg左右，制备关节软骨缺损模型。方法：30只兔随机分为实验组：将体外培养的第2代软骨细胞与几丁质凝胶混合，最终细胞浓度为2．5×10^11L^-1，注射入所建立动物模型的关节囊内：软骨细胞悬液组：细胞浓度为2．5×10^11L^-1；对照组：不做任何处理。主要观察指标：分别于第4，8，12周取材，取膝关节外侧髁观察修复情况。苏木精-伊红染色后行大体、组织学及电镜检查。结果：①大体观察：各组动物膝关节未出现明显红肿等炎症迹象。②组织学观察：实验组术后12周时，缺损区可见新生透明样软骨组织，表面光滑，与周围软骨界面难以辨认。软骨细胞悬液组和空白对照组均未见明显修复。③透射电镜观察：实验组新生组织内软骨细胞呈圆形或椭圆形，胞质内含有丰富的粗面内质网、核糖体、高尔基复合体等细胞器；软骨细胞悬液组8-12周后新生组织以胶原纤维为主。空白对照组表现为大量胶原纤维。结论：同种异体软骨细胞复合几丁质凝胶修复关节软骨缺损效果明显，将几丁质凝胶作为移植载体是可行的。

同种异体软骨移植免疫排斥反应的研究进展

关节炎、颞颌关节疾病及关节机械损伤以及颌面部美容整形的发展，都使得软骨治疗成为倍受关注的对象，由于软骨组织中无血管、神经及淋巴等供应，而软骨细胞又为终末分化细胞，软骨缺损很难自身修复，故治疗以软骨移植为主。软骨移植包括自体、同种异体、异种移植，其中自体软骨移植来源有限、给患者带来二次创伤并增加患者疼痛而致应用受限，异种移植由于强烈的免疫排斥等问题研究还处在基础实验阶段，而同种异体软骨移植来源广泛，生物学性能良好，可望成为较理想的软骨移植物，但其存在的免疫排斥反应影响移植物在体内的长期存活，是目前研究不容忽视的问题。

用组织培养的同种异体软骨进行喉重建的实验研究

目的 观察用组织培养法保存的兔活性甲状软骨进行同种异体喉软骨移植重建的效果。方法 先取大小约 5mm× 2mm× 1mm兔甲状软骨块 ,分别用RPMI - 1640培养液及 4 %甲醛保存 2 0d ,然后将两种方法保存的软骨块同时移植于同一兔甲状软骨板中线两侧缺损处 ,培养软骨置于左侧 ,甲醛保存软骨置于右侧 ,分别于 7d、14d、30d、60d、90d、12 0d、180d、2 0 0d及 30 0d时取标本观察移植重建效果。结果 用组织培养软骨进行喉移植后与受体组织相容性好 ,移植排斥反应小 ,喉重建修复效果明显优于甲醛保存软骨。结论 用组织培养法保存的活性软骨进行同种异体喉软骨移植其排斥反应小 ,喉重建修复效果满意。

同种异体软骨细胞修复耳廓缺损的动物实验研究

目的探讨兔同种异体软骨细胞和自行制备生物材料高孔隙率聚乳酸(poly—DL-lactide,PDLLA)支架复合物修复兔耳廓软骨缺损的可行性。方法 18只大白兔分为软骨细胞/PDLLA复合物移植组、单纯PDLLA对照组和空白对照组,将体外培养的兔同种异体软骨细胞和自行制备的PDLLA支架形成复合物,修复兔耳廓软骨缺损。分别于植入后6周、12周、18周取材,HE和甲苯胺蓝染色了解兔耳廓缺损修复情况。结果术后18周,软骨细胞/PDLLA复合物移植组软骨缺损区为软骨组织修复,新生软骨与正常软骨问连接好,单纯PDLLA对照组和空白对照组为纤维软骨或纤维组织修复。结论同种异体软骨细胞/自制PDLLA复合物移植可较好地修复兔耳廓软骨缺损。

用弱甲醛处理后异体软骨移植的实验观察

将弱甲醛等渗液处理的异体软骨植入家兔背部皮下,用肉眼、光镜、透射电镜、^(35)S测定等观察植入后1—6个月该骨的生长情况,发现用此法保存的软骨,其细胞仍具有增殖活性。且抗原性降低。是一种简易保存异体软骨的方法。

异体软骨细胞移植修复关节软骨缺损免疫反应及处理

采用异体软骨细胞移植修复关节软骨缺损是当今研究热点。该文综述了异体软骨细胞移植产生免疫反应的原因及解决的方法。

异体软骨移植的超微结构观察

长期以来,在颌面部各种先天性或后天性缺损畸形的修复中,我们将异体软骨作为一种生物性充填支持材料应用于临床,经过长期观察所形成器官的外形、大小、形态无明显改变,取得了较为满意的临床效果。为了探讨异体软骨移植后,软骨在宿主体内组织结构的改变及归宿,我们在以往对异体软骨移植后不同时期的组织结构光镜观察的基础上,利用电镜对其超微结构的改变进行研究。

抑制同种异体软骨细胞复合支架免疫反应研究进展

损伤或疾病造成的关节软骨缺损在临床上较常见,许多用于修复关节软骨损伤的方法各有优点,但均存在一定缺陷。组织工程学技术为关节软骨缺损的再生与修复提供了新思路,利用体外培养扩增的同种异体软骨细胞复合支架修复软骨缺损已有大量报道。该文就同种异体软骨细胞复合支架修复关节软骨损伤的免疫反应,在软骨细胞免疫原性、免疫反应发生途径、降低免疫反应机制及方法等方面作一综述。

低温冷冻异体软骨支架全耳Ⅰ期再造

低温冷冻异体软骨支架全耳Ⅰ期再造安徽省立医院整形烧伤科（２３０００１）周铁政，余刚，杜晓杨安徽省立医院骨科童元，胡兴敏全耳再造所需耳支架材料的选择，长期以来是整形外科医生探讨的难题，迄今仍没有一种能令人满意的结果。我们从１９９０年以来，以异体低温冷冻...

异体软骨细胞移植修复猪膝关节软骨缺损的免疫学观察

目的应用同种异体软骨细胞移植修复猪膝关节软骨缺损,评估术后免疫学表现及其修复效果。方法供体为1月龄上海白猪2头,取其膝关节全层软骨片,0.25%胰蛋白酶和0.2%型胶原酶消化,分离培养软骨细胞。受体为2月龄巴马猪8头,在两侧股骨髁关节负重面造成0.5cm×0.5cm软骨缺损,深及软骨下骨。于受体猪双侧膝关节软骨缺损处注入软骨细胞悬液0.2ml,含软骨细胞(1.0～2.0)×106个,密封入口。术前、术后3、5、7、12周分离受体外周血淋巴细胞,检测其与异体软骨细胞混合后的刺激指数(stimulationindex,SI);术后5、7、24周取修复区软骨及软骨下骨观察局部组织学反应。结果术后3、5、7、12周受体外周血淋巴细胞SI分别为1.457±0.062、1.739±0.142、1.548±0.047和1.216±0.028,较术前(1.102±0.034)增高,且差异均有统计学意义(P<0.05);SI术后3周开始升高,5周达高峰,7、12周后开始逐渐下降;3、7、12周SI与5周比较差异均有统计学意义(P<0.05)。组织学观察:术后5周,出现较多的炎性浸润,分散于软骨下骨、修复组织与正常软骨的整合部等;7周,炎性浸润开始减退,仅在软骨下骨可见;24周,缺损处修复软骨与周围软骨整合良好。结论异体软骨细胞移植后,免疫反应一般在移植早期开始出现,并逐渐达到高峰,但随着软骨基质的重新合成,免疫反应也逐渐下降,并最终修复全层关节软骨缺损。

同种异体软骨听骨赝复物与羟基磷灰石听骨赝复物修复听骨链损伤的比较

背景:以往多采用同种异体软骨听骨赝复物作为听骨链重建的材料,近年来羟基磷灰石听骨赝复物已广泛地应用于鼓室成形术的临床工作中。而目前有关两种听骨赝复物在鼓室成形术、听骨链重建中的临床疗效比较尚无相关报道。目的:比较两种听骨赝复物的临床疗效,旨在探求更适宜临床推广应用的听骨赝复物。方法:将进行鼓室成形、听骨链重建术的慢性中耳炎患者60例分为同种异体软骨听骨赝复物组和羟基磷灰石听骨赝复物组,两组在术前、术后进行纯音听力测试,以语言频率区(0.5,1.0,2.0kHz)听阈气导平均值及气骨导差平均值统计,取最后一次(至少6个月以后)复查听力结果作为组间对比指标之一。同时记录两组病例移植鼓膜愈合情况,即移植鼓膜良好上皮化的时间,两组听骨赝复物的脱出率。结果与结论:在相同病变类型、相同术式患者中,同种异体软骨听骨赝复物与羟基磷灰石听骨赝复物植入后听力恢复水平方面差异不显著(P>0.05),术后移植鼓膜愈合情况方面差异不显著(P>0.05)。在相同病变类型、相同术式的术后赝复物脱出率均为0。提示同种异体软骨听骨赝复物与羟基磷灰石听骨赝复物在慢性中耳炎患者行鼓室成形、听骨链重建术中的临床疗效相似。

同种异体骨软骨移植治疗软骨损伤的历史

随着体育运动的快速发展,膝关节局限性关节软骨损伤患者不断增多。由于软骨损伤不能自我修复,临床上对青壮年局限性较大软骨损伤的治疗尤为棘手。同种异体骨软骨移植是治疗青壮年大面积软骨损伤比较满意的治疗方法,美国及欧洲一些国家对同种异体骨软骨移植的研究较多,也取得了较好的临床疗效,但我国对其研究尚未得到重视和发展。鉴于此,本刊开设“同种异体骨软骨移植”专栏,将对同种异体骨软骨移植发展历史和现状、软骨组织的获取和保存及临床应用等内容进行系统介绍,以期推动我国同种异体骨软骨移植的应用与发展。

同种异体骨软骨移植修复关节软骨损伤的手术技术

关节软骨缺乏神经、血管和淋巴,一旦损伤很难自愈^([1-4])。同种异体骨软骨移植(osteochondral allograft transplantation, OCA)用于治疗各种关节疾病,如骨坏死、剥脱性骨软骨炎和创伤后导致的大面积(>2 cm^(2))骨软骨缺损^([5-7])。多项研究报告了OCA术后的疗效,表现为患者疼痛程度显著缓解以及日常活动能力得到恢复^([8-12])。