常山碱和异常山碱的合成研究进展

常山碱和异常山碱目前主要用于家禽抗球虫病,具有高抗疟性、无副作用的优点,属喹唑啉酮类化合物.最新研究发现,此类化合物可用于膀胱、前列腺、乳腺、皮肤、肺癌等恶性肿瘤的治疗,市场前景广阔.综述了常山碱和异常山碱的的合成发展,探讨分析了多种合成路线.

常山中常山碱和异常山碱的同步测定研究

建立常山中常山碱和异常山碱HPLC同步测定方法,并在此基础上探讨一测多评模式用于这2种生物碱测定的可行性。采用十八烷基键合硅胶色谱柱进行分离,乙腈-水-冰醋酸-三乙胺(9∶91∶0.36∶0.745)为流动相,检测波长225 nm,流速1.0 m L·min^(-1),柱温30℃。结果表明,常山碱和异常山碱分别在10.7~426 ng,10.6~424 ng线性关系良好,平均加样回收率分别为98.33%,100.4%,RSD分别为2.7%,1.8%。在此基础上,以常山碱为内参物,建立了异常山碱对常山碱的相对校正因子与相对保留值。采用一测多评质量评价模式,经一系列方法学考察,最终实现在同一色谱条件下,仅采用常山碱1个对照品就能同时对常山碱和异常山碱2个活性成分进行同步测定。研究结果为一测多评模式在同分异构体测定中的应用起到示范作用。

中药常山中常山碱和异常山碱的含量测定

目的建立高效液相色谱法同时测定中药常山中常山碱和异常山碱总含量的测定方法。方法采用HPLC测定常山药材和饮片中常山碱和异常山碱的总含量。色谱柱：Kromasil C18（4．6mm×250mm，5μm）；流动相：乙腈-水-冰醋酸-三乙胺（9：91：0．3：0．745），冰醋酸调pH值至5．2～6．2之间；流速：1mL·min^-1；检测波长：225nm；柱温：30℃。外标一点法定量。结果常山碱和异常山碱的混合物在0．021—2．18μg内呈良好线性关系，方法回收率介于95．16％～103．97％之间，回收率的RSD值为3．28％。结论本法简便、快捷、准确，可用于常山药材及饮片中常山碱和异常山碱的含量测定。

基于AMPK/mTOR信号通路研究异常山碱对EC9706细胞能量代谢的调控机制

目的通过观察异常山碱对食管癌EC9706细胞的增殖、凋亡、周期、能量代谢及能量代谢通路相关蛋白表达的影响,探讨其治疗食管癌的分子机制。方法常规培养ECC9706细胞,用MTT法检测细胞活性,筛选药物浓度,选择1、2μg/mL 2个质量浓度;流式细胞术检测异常山碱对EC9706细胞凋亡、周期的影响,能量代谢检测系统检测异常山碱对EC9706细胞能量代谢的影响,Westernblotting检测细胞中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、磷酸化乙酰辅酶A羧化酶(p-ACC)、腺苷磷酸激活蛋白激酶(AMPK)蛋白表达。结果不同质量浓度异常山碱作用48h后能有效抑制EC9706细胞增殖,呈剂量依赖性(P<0.01),可以将EC9706细胞阻滞于S期和G2/M期(P<0.05),有效促进细胞凋亡(P<0.05),且明显抑制细胞糖酵解及线粒体代谢能力(P<0.01),与对照组比较,异常山碱组细胞AMPK蛋白表达水平上升,mTOR、p-mTOR、p-ACC蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论异常山碱可能通过能量代谢调节EC9706细胞周期、凋亡,抑制EC9706细胞增殖。

常山叶中一种新的喹唑酮生物碱

从常山中分离得到一种新的生物碱，命名为新常山碱，还分离得到已知的常山碱、异常山碱、香豆素，双氢黄酮和香草醛。新生物碱的结构通过波谱解析和与自常山碱的半合成产品对照来确定。

不同产地不同部位常山的活性成分含量测定

目的采用高效液相色谱法测定贵州不同产地不同部位中药常山中常山碱和异常山碱两种活性成分的含量,比较贵州境内不同产地、不同药用部位的质量差异。方法采用色谱柱:AgilentXBD-C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相为乙腈-水-冰醋酸-三乙胺(9:91:0.3:0.745),冰醋酸调pH值在5.2~6.2之间;流速1ml/min;检测波长为225nm;柱温30℃。结果常山碱在0.025~1.0μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=1。平均加样回收率常山碱为97.63%,RSD为1.81%(n=6)。异常山碱0.025~1.0μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=1。平均加样回收率异常山碱为102.07%,RSD为2.16%(n=6)。对于不同产地,开阳桃坑和龙里小菁常山碱和异常山碱总含量相对较高,开阳马岔河总含量相对较低;对于不同药用部位,根的含量相对稳定,茎次之,叶的差异最大。结论中药常山中常山碱和异常山碱含量在产地方面有差异,在不同药用部位上内在质量差异更明显。

正交试验法优选酒常山炮制工艺

目的:基于正交试验法,应用高效液相(HPLC)法定量测定,从多指标评价建立酒常山的最佳炮制工艺。方法:采用HPLC定量分析,以常山碱和异常山碱含量作为考察指标;采用正交设计法考察闷润时间、烘干温度、料液比对酒常山炮制工艺的影响,优选出酒常山最佳炮制工艺。结果:色谱柱为YMC-Pack-ODS-A C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-0.3%冰醋酸水溶液,体积比为9∶91等度洗脱,冰醋酸水溶液用三乙胺调pH值至5.5~6.5;检测波长254 nm,柱温30℃,体积流量1 mL/min。结果表明,常山碱和异常山碱均在0.02~1μg线性关系良好,线性方程分别为Y=9721.8X-553.6,R^(2)=0.9998,Y=9493.5X-5950.9,R^(2)=0.9997,平均加样回收率分别为100.91%,99.74%,RSD分别为1.69%,1.22%;优选的酒常山最佳炮制工艺为闷润20 min,120℃烘干,料液比1∶1。结论:该研究同时测定常山碱和异常山碱的含量测定方法学考察结果符合要求,采用正交试验法优选的酒常山最佳炮制方案是可行的,为制定酒常山的质量标准和现代研究提供了科学依据。