STAT蛋白异常活化与恶性淋巴瘤

信号转导子与转录激活子(Signal transducer and activator of transcription, STAT)广泛参与细胞因子的信号转导,从而对细胞增生、分化和存活等进行调节.在生理条件下,细胞因子与靶细胞膜上的受体结合后,受体发生二聚化,进而激活受体相关性激酶JAKs.受体上的特异位点的酪氨酸残基被JAKs磷酸化后,为胞质中的STATs提供结合位点.

T淋巴细胞异常活化与再生障碍性贫血

越来越多的证据表明,再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)是一种以造血组织为靶细胞的自身免疫性疾病。AA骨髓T细胞功能性亚群的分布和活化均有明显的异常。T细胞受体谱形呈现寡克隆性偏移,产生过多的负性造血调控因子,介导造血干/祖细胞免疫损伤和凋亡。深入研究T淋巴细胞异常活化对阐明再障的免疫病理机制及指导免疫治疗具有重要意义。

T细胞异常活化对系统性红斑狼疮造血系统的影响

目的研究T淋巴细胞活化因子对系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者造血系统生长的影响。方法采集15例SLE患者及对照组的骨髓标本,测定其免疫表型(CD3-PC5、CD34-PE/CD38-FITC,CD69-PE/HLA-DR-FITC)及培养骨髓单个核细胞。结果SLE患者骨髓T细胞上CD69、HLA-DR表达较对照组增高(P<0.05),骨髓单个核培养结果无显著性差异(P>0.05)。结论SLE患者T细胞自身功能出现了异常活化,但对造血系统并无明显影响。

CD28／B7信号在再生障碍性贫血T淋巴细胞异常活化中的作用

目的通过淋巴细胞输注诱导自身免疫性再生障碍性贫血动物模型，探讨CD28／B7信号在淋巴细胞异常活化中的作用及可能机制。方法将来自父本的淋巴细胞悬液（40×10^6个／L左右）通过尾静脉注入CBYB6 F1代受鼠体内，采用CFDA—SE标记法跟踪淋巴细胞在体内的分布，尾静脉注射CD80和CD86阻断性单克隆抗体（单抗），不同时段检测受体小鼠外周血象的变化，病理切片观察骨髓及主要脏器的变化。将骨髓造血细胞与淋巴结淋巴细胞进行共培养，通过计数造血细胞的集落形成数来观察不同数量淋巴结淋巴细胞对骨髓造血细胞的影响。体外测试不同浓度环孢菌素A（cyclosporine A，CsA）对骨髓造血细胞的影响。结果输注淋巴细胞后可诱导受体小鼠在第5天出现骨髓衰竭的表现，主要是白细胞、血红蛋白、血小板下降，21d左右受体鼠出现死亡。不同时间段受体小鼠主要脏器冰冻切片显示荧光标记的淋巴细胞主要分布在骨髓组织中；病理切片显示有骨髓组织的破坏。同时注射CD80及CD86阻断性单抗的受体鼠同样出现上述表现；体外集落形成试验证实B6淋巴结淋巴细胞数量和F1造血细胞为5：1时，红系集落形成单位（CFU—E）和粒细胞集落形成单位（CFU—G）集落形成数目与空白组比较差异无统计学意义（P〉0．05）；将比例提高至10：1，CFU—E集落形成数目明显减少（P〈0．05）；至50：1时，则可完全抑制CFU—E集落的形成，CFU—E和CFU-G集落形成数目的减少呈现淋巴细胞剂量依赖性，加入CsA可显著提高CFU—E和CFU-G形成率。结论通过模型证实T细胞在再生障碍性贫血的发生过程中起重要作用，仅通过阻断CD28／B7信号并不能阻断T淋巴细胞的异常活化。

Gab2在SHP-2激活突变导致的小鼠肥大细胞异常增殖活化及其导致器官损伤中的作用

目的 观察接头蛋白Gab2对激活突变SHP-2导致的肥大细胞异常增殖活化是否具有调控作用,对激活突变SHP-2小鼠器官损伤有无影响.方法 用Gab2-/-、SHP-2D61G/＋小鼠杂交建立四种基因型（SHP-2＋/＋、Gab2-/-、SHP-2D61G/＋、SHP-2D61G/＋/Gab2-/-）小鼠为研究对象;取小鼠骨髓细胞用IL-3诱导建立肥大细胞,用MTS法检测不同基因型小鼠肥大细胞对细胞因子刺激增殖反应性;用ELISA法检测小鼠血清及肥大细胞分泌炎症因子水平,放射免疫法检测小鼠血清中丙氨酸转氨酶（ALT）和心肌肌钙蛋白I（cTnI）的水平;用病理组织学技术检测小鼠组织白细胞浸润及器官损伤情况.结果 Gab2缺失后,SHP-2激活突变导致的小鼠肥大细胞异常增殖及活化现象明显改善,对细胞因子增殖反应性下降,相应细胞因子分泌减少,心脏及肝脏组织损伤减轻.结论 Gab2缺失降低了SHP-2激活突变导致的小鼠肥大细胞异常增殖活化和心脏及肝脏组织损伤.

2型糖尿病患者活化血小板糖基化复合物活性与脂代谢异常的相关性

探讨 2型糖尿病患者血小板活化与脂代谢异常的关系。将 12 0例 2型糖尿病患者按有无脂代谢异常分为有脂代谢异常组 (n =6 2 )和无脂代谢异常组 (n =5 8) ,并选择 2 5例正常者作对照。应用流式细胞仪分别测定各组的活化血小板糖基化复合物活性 ,比较两组糖尿病患者活化血小板糖基化复合物活性的差异 ,并分析其与甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇水平的相关性。结果发现 ,两组糖尿病患者的活化血小板糖基化复合物活性均明显高于正常对照组 ,且有脂代谢异常的糖尿病组活化血小板糖基化复合物活性高于无脂代谢异常组 ,低密度脂蛋白胆固醇水平与活化血小板糖基化复合物活性显著正相关 (r=0 .6 4,P <0 .0 5 )。结果提示 ,2型糖尿病患者脂代谢异常是导致血小板活化水平增高的重要因素。

重建线粒体动态平衡对NK细胞NK2型活化影响

目的立于“线粒体功能紊乱-细胞异常活化”视角,探讨NK细胞NK2型活化机制。方法将NK-92MI细胞分为空白组、TSLP组、1、5、10μmol·L^(-1) Mdivi-1组。ELISA法测定各组IL-4、IL-5、IFN-γ水平;蛋白印迹法分析各组p-Drp1、MnSOD蛋白表达;DHE染色及流式检测各组ROS水平;激光共聚焦观察各组线粒体形态。结果ELISA显示,与对照组比较,TSLP组IL-4、IL-5水平明显升高,IFN-γ水平下调(P<0.05);与TSLP组比较,5、10μmol·L^(-1) Mdivi-1组IL-4、IL-5水平降低,10μmol·L^(-1) Mdivi-1组IFN-γ浓度有所回升(P<0.05)。DHE染色及流式显示,TSLP组ROS水平较对照组升高;而5、10μmol·L^(-1) Mdivi-1组ROS水平较TSLP组降低(P<0.05)。共聚焦显示,TSLP刺激后,细胞内大量圆球状线粒体生成,5、10μmol·L^(-1) Mdivi-1干预后该现象得到改善。蛋白印迹显示,TSLP组p-Drp1水平明显上调,MnSOD表达下降,Mdivi-1干预则有效逆转了上述变化。结论线粒体动态失衡可能是NK细胞异常活化内在机制之一,其或是调控NK细胞NK2型活化介导的变应性炎症反应的重要靶点。

自身免疫疾病与动脉粥样硬化性心脏病相关研究进展

自身免疫疾病是以T、B淋巴细胞异常活化和自身抗体产生为主要特征，导致机体免疫紊乱而使多器官受损的疾病，以类风湿关节炎（RA）和系统性红斑狼疮（SLE）最为常见。研究表明自身免疫疾病患者心血管病的发生率和死亡率高于一般人群，且主要以动脉粥样硬化（AS）为主[1]。AS是一种由多种免疫细胞启动的慢性炎症反应性疾病，自身免疫疾病与AS的发生发展息息相关。1992年Grundtman[2]就提出了动脉粥样硬化是自身免疫疾病这一理论。免疫机制已被证实在AS的形成和发展中起重要作用，在RA和SLE患者发生AS时，其机制与自身免疫紊乱密切相关。

造血干细胞移植治疗狼疮性肾炎

狼疮性肾炎（lupus nephritis，LN）是系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）常见的重要脏器损害和死亡原因。LN的发病机制归结于SLE的免疫系统功能紊乱，T、B淋巴细胞异常活化，产生多种自身抗体和免疫复合物，导致LN多种形式的免疫损伤。随着糖皮质激素和免疫抑制剂的临床应用，LN的预后有明显改善。

再生障碍性贫血患者的淋巴细胞表型变化

目的 研究再生障碍性贫血(AA)患者骨髓(BM)及外周血(PB)淋巴细胞及其活化相关分子的表达及临床意义。方法 采用双色免疫荧光标记、流式细胞仪分析AA患者的BM和PB中淋巴细胞膜分子表达。结果 AA患者BM和BP中CD8+细胞增加,CD4/CD8比例下降,BM中CD25+细胞和HLA-DR+细胞增多,急性AA增加尤为显著(P<0.01),BM中CD16+或CD56+细胞也明显增多(P<0.05);双标记分析提示T细胞主要为CD8+细胞;急性AA患者CD8+-CD25+细胞显著增多(P<0.01),AA患者BM中淋巴细胞活化相关分子表达增多,尤其是4-1 BB+、CD95L+和CD40L+细胞显著增多(P<0.01)。结论 AA患者BM中淋巴细胞活化相关膜分子增多,是AA免疫功能异常及最终导致造血功能衰竭的原因之一。

川崎病患儿精细免疫分型分析及其临床意义

目的分析急性期川崎病(KD)患儿淋巴细胞各亚群的数量变化,探讨对临床诊治的意义。方法前瞻性分析重庆医科大学附属儿童医院收治的20例急性期KD患儿的临床资料以及外周血淋巴细胞各亚群(CD3^+、CD4^+及各亚群、CD8^+及各亚群、TCRαβ^+DNT、TCRγδ^+、CD4/CD8、CD19^+及各亚群、CD16^+CD56)的数量,并选取20例健康儿童为对照组,比较2组间的变化并分析临床指标与淋巴细胞各亚群的关系。结果 20例患儿的临床表现均符合典型KD的诊断标准,与对照组相比,KD组的CD8 naive、TCRαβ^+DNT、CD4/CD8、CD19^+及各亚群水平均明显升高(P<0.05),而CD4 EM(CD4^+CD45RA-effector memory T cells)、CD4 Temra(CD4^+CD45RA^+effector memory T cells)、CD8^+T、CD8 CM(CD8^+CD45RA-central memory T cells)、CD8 Temra(CD8^+CD45RA^+effector memory T cells)、CD16^+CD56水平明显降低(P<0.05)。有冠状动脉损害的KD患儿与未出现冠状动脉损害的KD患儿相比,TCRγδ^+T细胞水平明显升高(P<0.05),CD4 Temra细胞水平有下降趋势。合并呼吸道或消化道系统并发症的KD患儿与未合并呼吸道或消化道系统并发症的KD患儿相比,CD3^+T、CD8 CM、CD8 EM、CD8 Temra细胞水平明显下降(P<0.05),Transitional B细胞水平明显升高(P<0.05)。结论急性期KD患儿的T、B淋巴细胞均处于异常活化的状态,其中TCRγδ^+T和CD4 Temra细胞与川崎病合并冠状动脉损害相关,CD3^+T、CD8 CM、CD8 EM、CD8 Temra和Transitional B细胞与川崎病合并呼吸道或消化道系统并发症相关。

JAKsSTATs信号转导途径的阻遏方法及其应用前景

JAKs蛋白酪氨酸激酶和“信号转导子和转录激活子”(SignalTransducerandActivatorofTran scription ,STATs)广泛参与各种细胞因子的信号转导过程 ,JAKs、STATs异常活化与肿瘤、白血病和心血管系统疾病等许多病理生理过程有着密切的关系。本文就阻遏异常活化的JAKs

川崎病患儿血清白细胞介素-6的变化及意义

川崎病（KD）又名皮肤黏膜淋巴结综合征,是主要发生在婴幼儿的发热性疾病,表现为全身的中小血管炎,最易侵犯冠状动脉,引起冠状动脉扩张、冠状动脉瘤,甚至导致猝死。该病呈逐年增加趋势,在中国、美国、日本已替代风湿性心脏病,成为小儿后天性心脏病的主要原因。KD的病因和发病机制尚未明确,目前普遍认为T细胞异常活化是导致KD病血管免疫损伤的始动环节。

芍药甘草汤对MRL/Lpr小鼠CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞的影响

系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus,SLE)是临床常见的自身免疫性疾病,表现为T、B淋巴细胞异常活化产生各种针对自身的抗体,不仅临床诊治困难,并发症多而复杂,而且治疗手段有限。

再生障碍性贫血患者淋巴细胞表型变化

目的 研究再生障碍性贫血 (AA)患者骨髓 (BM)及外周血 (PB)淋巴细胞及其活化相关分子的表达及临床意义。方法 采用单色和双色免疫荧光标记法、流式细胞仪分析AA患者的BM和PB中淋巴细胞膜分子的表达。结果 AA患者BM和BP中CD8+细胞增加 ,CD4 CD8比例下降 ,BM中CD2 5 +细胞和HLA DR+细胞增多 ,急性AA增加尤为显著 (P <0 .0 1) ,BM中CD16 +或CD5 6 +细胞也明显增多 (P <0 .0 5 ) ;双标记分析提示T细胞主要为CD8+细胞 ;急性AA患者CD8+ CD2 5 +细胞显著增多 (P <0 .0 1) ,AA患者BM中淋巴细胞活化相关分子表达增多 ,尤其是 4 1BB+、CD95L+和CD40L+细胞显著增多 (P <0 .0 1)。结论 AA患者BM中淋巴细胞活化相关膜分子增多 。

再生障碍性贫血患者骨髓及外周血T、NK细胞膜分子和可溶性分子动态变化

目的 研究T淋巴细胞及免疫分子在再生障碍性贫血 (AA)致病中的作用及其与临床疗效的相关性。方法 应用免疫荧光染色技术和流式细胞仪分析AA骨髓及外周血T淋巴细胞表型 ,ELISA测定骨髓和外周血白介素 2及其可溶性受体 (IL 2 ,sIL 2R)、可溶性Fas配体 (sFas L)和Flt3配体(FL)的水平。结果 (1)AA病人骨髓和外周血CD8+细胞百分率增加 ,CD4/CD8比例下降 ;骨髓血CD2 5 +和HLA DR+细胞百分率增多 ,急性AA增加尤为显著 (P <0 .0 1) ;骨髓血中CD16 +或CD5 6 +细胞百分率也明显增多 (P <0 .0 5 )。 (2 )所有AA患者骨髓及外周血IL 2含量均显著升高 ,绝大部分患者的sFas L含量增加 ,FL水平升高尤为显著 ,高达正常水平的 2 0倍。IL 2、sFas L和FL的含量与临床疗效密切相关 ,经治疗有效的患者骨髓和外周血的IL 2、sFas L和FL水平明显下降 ,但FL仍不能降至正常水平。结论 T细胞的异常活化 ,多种免疫分子表达的异常升高 ,以及产生针对自身造血干 /祖细胞的细胞毒效应 。