T细胞大颗粒淋巴细胞白血病伴单克隆IgM相关轻链型淀粉样变性1例报道

T细胞大颗粒淋巴细胞白血病(T-LGLL)是一种少见的T淋巴细胞增殖性疾病,年发病率约(0.2~0.72)/100万[1]。而轻链型淀粉样变性(AL)是来源于单克隆浆细胞或B细胞的淋巴增殖性疾病,年发病率约(5.1~12.8)/100万[2],一般AL中,最常见的单克隆免疫球蛋白(Ig)为IgA、IgG,而单克隆IgM相关AL(IgM-AL)少见,仅占AL 5%~7%[3]。T-LGLL和IgM-AL均为罕见病,并存者则更为罕见,目前国内尚未见报告,我科近期诊治1例,现报道如下。

嗜人类T淋巴细胞病毒Ⅰ型核心蛋白P24基因的克隆与表达

目的 从感染HTLV-1的中国患者外周血单核细胞（PBMCs）中扩增编码HTLV-1核心蛋白P24的cDNA,并在大肠杆菌中进行表达。方法 提取感染者PBMCs基因组DNA,应用巢式PCR方法扩增出HTLV-1核心蛋白P24的cDNA并测序,与pGEX-20T载体构建重组质粒,在大肠杆菌BL21中表达,采用ELISA和Westernblot分析重组蛋白活性。结果HTLV-1核心蛋白P24基因序列高度保守,构建重组载体后,在大肠杆菌中表达的重组蛋白,经检测具有较强的抗原活性。结论 成功地表达了HTLV-1型病毒的核心蛋白P24基因,为国产诊断试剂和疫苗的研发打下了基础。

抗T淋巴细胞单克隆抗体治疗骨髓增生异常综合征

用抗T淋巴细胞单克隆抗体SMU3(抗CD3)和SMU8(抗CD8)治疗10例骨髓增生异常综合征(MDS),结果表明:2例明显进步,5例进步,白细胞和血红蛋白显著升高。治疗前CD4^+细胞少,CD8^+细胞多,CD4/CD8比值降低或倒置,HLA-DR抗原高表达,与对照组比较均有显著差异,治疗后T淋巴细胞亚群比例恢复,HLA-DR表达降低。T淋巴细胞各亚群比例失调和功能异常是MDS的诱发因素之一。

猪圆环病毒2型ORF1和ORF3T淋巴细胞抗原表位的克隆与原核表达

根据Stevenson筛选出来的3个具有活性的T淋巴细胞抗原表位(T lymphocyte epitope,TCE)合成tce基因(180 bp),成功插入到pMD18-T Simple载体中,筛选获得重组质粒,命名为pMD-TCE.将tce酶切产物亚克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,获得重组质粒,命名为pET-TCE.用IPTG进行诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE检测,结果显示合成基因在pET-32a(+)中获得了高效融合表达,其表达蛋白相对分子质量约为25 000,Western-blot分析结果表明,获得的融合蛋白可与猪圆环病毒2型(PCV2)阳性血清发生特异性反应,具有良好的免疫原性.

直肠癌肿瘤浸润性淋巴细胞中T细胞受体基因谱型特征

目的 分析直肠癌肿瘤浸润性淋巴细胞 (tumor -infiltatinglymphocytes ,TIL)克隆的TCRβ基因谱型及CDR3区氨基酸序列 ,了解直肠癌TIL抗肿瘤细胞克隆的基因特征。方法 采用RT -PCR方法扩增直肠癌肿瘤组织、术前外周血和术后外周血T淋巴细胞TCTβ基因的 2 4个不同V基因片段 ,经过特殊的测序凝胶分离和银染色后 ,确定它们的TCRβ基因表达谱型。通过对PCR产物直接测序的方法 ,分析克隆性增殖的特征和CDR3区氨基酸序列。结果 直肠癌肿瘤组织TIL的TCRβ基因谱型中具有克隆性表达 ,表明直肠癌TIL是呈寡克隆性增生的淋巴细胞 ;来自 2例不同患者的肿瘤组织TIL中单克隆性表达的TCRβV11基因具有安全相同的DNA和氨基酸序列 ;其余四个寡克隆的CDR3区存在共同保守的氨基酸序列G/xGGN/xY(D)EQ ,这些序列可能直接接触直肠癌肿瘤组织相关抗原。结论 直肠癌肿瘤组织TIL细胞中存在特异性识别肿瘤相关抗原肽的T淋巴细胞克隆。

T淋巴细胞异常活化与再生障碍性贫血

越来越多的证据表明,再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)是一种以造血组织为靶细胞的自身免疫性疾病。AA骨髓T细胞功能性亚群的分布和活化均有明显的异常。T细胞受体谱形呈现寡克隆性偏移,产生过多的负性造血调控因子,介导造血干/祖细胞免疫损伤和凋亡。深入研究T淋巴细胞异常活化对阐明再障的免疫病理机制及指导免疫治疗具有重要意义。

降落式PCR和SSCP检测淋巴细胞白血病单克隆T细胞受体γ基因重排

目的以降落式PCR和单链构型多态性(SSCP)方法检测淋巴细胞白血病单克隆T细胞受体(TCR)γ基因重排,探讨其在淋巴细胞白血病诊断中的价值。方法盐析法提取淋巴细胞白血病患者外周血白细胞DNA,TCR-γ基因重排通用引物和降落式PCR扩增基因重排。分别采用琼脂糖凝胶电泳、SSCP和DNA直接测序方法检测PCR扩增产物。阳性细胞系DNA模板与反应增生性淋巴组织DNA按不同比例混合后扩增,检测降落式PCR的灵敏度。结果琼脂糖电泳中,18例T淋巴细胞白血病中有15例、4例B淋巴细胞白血病中有2例为阳性,阳性标本经SSCP进一步分析,呈不连续条带。DNA直接测序证实扩增产物为TCR-γ基因重排。阳性对照模板占1%以上时可得到阳性扩增结果。结论TCR-γ基因重排通用引物结合降落式PCR可有效扩增T淋巴细胞白血病基因重排,可用于T淋巴细胞白血病的辅助诊断。

单纯疱疹病毒Ⅰ型潜伏感染的研究——兔三叉神经节致敏T淋巴细胞检测研究

报告应用抗兔致敏T淋巴细胞的单克隆抗体和ABC免疫组织化学技术对22只实验性单纯疱疹病毒性角膜炎的家兔三叉神经节致敏T淋巴细胞检测的结果。首次揭示在角膜原发感染HSV-Ⅰ过程中三叉神经节内致敏T淋巴细胞的出现。致敏T淋巴细胞在角膜接种后第13天出现,第85天消失。结果表明:T淋巴细胞在TG内HSV-Ⅰ潜伏感染的建立过程中起重要作用。本研究对指导临床治疗提供了理论依据。

白癜风患者外周血T淋巴细胞亚群检测及其意义

用单克隆抗体技术测定 5 2例进展期白癜风患者及 32例正常人血中T淋巴细胞亚群 ,并用流式细胞仪进行定量分析。结果 :①与正常人相比 ,进展期白癜风患者外周血CD4 + T细胞明显减少 ,CD8+ T细胞增加 ,CD4 + CD8+ 值降低 ,存在明显差异 (P <0 .0 1)。②各类型白癜风中 ,泛发型CD8+ T细胞增加明显 (P <0 .0 0 1)而局限型的T淋巴细胞亚群变化不明显 (P >0 .0 5 )。进展期白癜风患者外周血T淋巴细胞失调 ,细胞免疫功能异常 ,支持白癜风患者体内存在自身免疫功能异常学说。

抗4-1BB单克隆抗体诱导肿瘤细胞致敏的小鼠腹股沟淋巴结T细胞在体外表达IFN-γ

目的 研究肾癌细胞致敏的小鼠腹股沟淋巴结T细胞在体外经抗4 - 1BB(肿瘤坏死因子受体家族成员)单克隆抗体诱导刺激后IFN γ的表达水平。方法 以BCG和高聚生作为佐剂,用6 0 Co射线灭活的小鼠肾癌细胞Renca刺激小鼠腹股沟淋巴结,致敏后的淋巴结(肿瘤引流淋巴结tumor draininglymphnode,TDLN)T淋巴细胞在体外联合使用IL 2、抗CD3、抗CD2 8、抗4 1BB小鼠单克隆抗体激活,然后利用流式细胞术(FACS)检测细胞内IFN γ(干扰素Ⅱ型)的表达水平。结果 应用4 - 1BB单抗刺激的实验组有抗瘤活性的T细胞比例明显提高,其中T淋巴细胞分泌IFN γ的水平达到4 8.2 3% (P <0 .0 1)。结论 抗4 1BB单抗体外刺激肿瘤细胞致敏的小鼠腹股沟淋巴结T细胞后,T淋巴细胞内表达IFN γ水平提高。

急性甲型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群检测

急性甲型肝炎患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群检测山东省栖霞县人民医院（２６５３００）谢光亮为探讨Ｔ淋巴细胞亚群与急性甲型肝类（简称急性甲肝）是否存在联系，我们对已确认诊的３６例急性甲肝病人进行了Ｔ淋巴细胞检测。报告如下：急性甲肝病人３６例，男２５例，女１１例...

麻风患者外周血中T淋巴细胞亚群的检测

对40例现症麻风患者和26例麻风治愈者的T细胞亚群进行了分析。在现症患者中T细胞总数及各个亚群的比率均显著低于对照组。29例治愈者的T细胞也显著低于对照组(P<0.01)。在ENL患者中,OKT^+_4细胞的比率显著上升,OKT^+_8细胞的比率明显下降,OKT^+_4/OKT^+_8细胞的比值便明显高于现症患者(P<0.01)和对照组。在治愈者和各型现症患者之间,各T细胞亚群的比率和OKT^+_4/OKT^+_8细胞的比值均无明显差异(P>.05),表明抗麻风治疗对患者的免疫调节功能无明显影响。

戊型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群的变化

随着戊型肝炎病毒(HEV)分子克隆技术的成功。戊型肝炎特异性实验诊断方法有了很大进展,但对戊型肝炎肝细胞损伤的机制仍不十分清楚。本文检测30例戊型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群及其比例,旨在了解细胞免疫在戊型肝炎发病中的作用。 资料和方法 一、一般资料 戊型肝炎患者30例,男24例,女6例,平均年龄32.4±7.8岁,同期住院甲型肝炎20例,男12例,女8例,平均年龄29.5±8.2岁,正常对照24例,男14例,女10例,平均年龄34.1±7.4岁。

检测T淋巴细胞亚群在小儿脾虚证诊断上的意义

1987年9月在成都会议上制定的小儿脾虚证诊断标准（草案）中,在细胞免疫方面只提到“玫瑰花结试验（ERT）低于正常值”一项。为进一步了解小儿脾虚证的细胞免疫情况对符合诊断标准的小儿脾虚证患儿,检测了 T淋巴细胞亚群的单克隆抗体（单抗）OKT3、OKT4、OKT8,同时检测了 ERT、免疫球蛋白（Ig）,结果报道如下:

鼻咽癌细胞株体外诱导同种异体T细胞TCR Vβ CDR3谱型和细胞毒性分析

目的用鼻咽癌细胞株CNE2体外负载同种异体树突状细胞(dendritic cell,DC)诱导T淋巴细胞,使之活化为细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL),观察其体外特异性杀伤和克隆性增殖。方法用GM-CSF,IL-4和TNF-α体外诱导健康志愿者外周血单核细胞,用CNE2负载,使之分化为成熟DC,流式细胞仪检测负载前后DC的表型特征。在IL-2的作用下,用负载CNE2抗原的DC诱导自身T细胞生成特异性CTL。乳酸脱氢酶释放法检测其特异性杀伤活性;采用免疫谱型分析技术分析T细胞的克隆性。结果健康志愿者外周血单核细胞体外在GM-CSF,IL-4和TNF-α诱导下获得具有典型表型特征的成熟DC,其诱导的CTL对CNE2有明显的特异性杀伤作用;PBMC的TCRVβCDR3谱型呈高斯分布,而诱导后的T细胞部分家族出现优势表达。结论负载鼻咽癌抗原的同种异体DC所诱导的CTL在体外对鼻咽癌细胞有特异性杀伤作用,优势表达的TCRVβCDR3家族对鼻咽癌治疗有潜在的临床应用价值。

骨髓增生异常综合征T淋巴细胞异常与克隆造血

目的 了解T淋巴细胞异常在骨髓增生异常综合征（MDS）克隆造血中的作用。方法对76例MDS患者的染色体核型、T淋巴细胞亚群及激活状态进行分析。结果正常核型36例，异常核型40例，异常发生率52．6％。40例异常核型中，三体8（＋8）24例，占异常核型的60．0％。与健康对照组比较，MDS患者CD；CD-19、CD＋3；CD＋3；CD＋8；以及CD＋3HLA—DR^＋细胞百分率显著升高，CD-3（CD16CD56）^＋细胞的百分率明显降低。将MDS患者进行核型分组，异常核型组CD＋3（CD16CD56）^＋细胞的百分率显著高于正常对照组。将＋8核型从MDS异常核型中独立出来进行分析，CD＋3CD＋4CD-8细胞的百分率明显低于正常核型以及其他异常组，CD4／CD8的比值明显低于健康对照组。结论MDS存在T淋巴细胞异常，异常核型MDS可能恶性克隆增殖更为优势，预后更差。＋8核型MDS存在更为严重的免疫监视功能下降，导致恶性克隆过度增殖与残存造血过度受抑。

银屑病患者外周T细胞亚群及白细胞介素2受体的研究

银屑病患者外周Ｔ细胞亚群及白细胞介素２受体的研究湖南医科大学第二附属医院皮肤科（４１００１１）陆前进，张其亮，文海泉湖南医科大学第二附属医院中心实验室黄力人近年来，国内外对银屑病患者细胞免疫及免疫调节功能进行了大量的研究，但研究结果不尽一致［１～４］...

染料法实时荧光PCR检测慢性乙型重型肝炎患者外周血克隆特异性αβT淋巴细胞

以染料法（SYBR GreenⅠ）实时荧光PCR并结合基因熔解曲线峰形来监测慢性乙型重型肝炎（慢乙重肝）患者（健康献血者为对照）外周血T细胞受体β链基因（TCRBV）克隆特异性扩增情况，从而可能反映慢乙重肝患者对HBV感染的免疫应答状态。

HTLV-1病毒蛋白Tax对U-2 OS骨肉瘤细胞有丝分裂的影响

目的研究人1型T淋巴细胞白血病病毒(HTLV-1)所编码的病毒蛋白Tax对骨肉瘤细胞生长周期的影响。方法通过构建慢病毒表达载体在人骨肉瘤细胞株U-2 OS中表达Tax;荧光显微镜检测表达Tax所引起的骨肉瘤细胞形态和细胞分裂的变化;流式细胞方法分析表达Tax对骨肉瘤细胞周期产生的影响。结果与亲本骨肉瘤细胞比较,表达Tax的骨肉瘤细胞形态由正常的椭圆形转化为长梭形;出现了胞质分裂异常;有双核或多核细胞形成;细胞的生长周期在G2/M期发生了停滞。结论 Tax的表达破坏了骨肉瘤细胞有丝分裂的胞质分裂过程,造成异倍体现象的出现,使细胞停滞在有丝分裂的晚期。这或许是HTLV-1感染导致正常细胞转化为癌细胞的原因之一。