血管内皮生长因子及其特异性受体蛋白和mRNA在垂体腺瘤中的表达与肿瘤血管形成和侵袭性的关系

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）及其特异性受体（KDR）蛋白和mRNA在垂体腺瘤中的表达与肿瘤血管形成和侵袭性的关系。方法采用免疫组织化学S-ABC法和RT-PCR检测58例人垂体腺瘤中的VEGF及KDR蛋白和mRNA的表达，并对血管进行染色及计数。将肿瘤的侵袭程度分为0、1、2、3级，分别为5例、14例、20例和19例。结果VEGF阳性蛋白主要位于胞浆，血管内皮很少表达，KDR蛋白主要表达在垂体腺瘤微血管内皮细胞胞浆中。随侵袭性程度的增加，VEGF和KDR蛋白、mRNA的表达相应增加，1级与0级、3级与2级比较P〈0．01，但1级与2级比较，P〉0．05。以VEGF和KDR表达的中位数为界分成高、低表达组，VEGF和KDR高表达组中的微血管密度明显高于低表达组（P〈0．01）。结论VEGF以旁分泌、自分泌形式，通过KDR协同促进垂体腺瘤血管的生成，并与垂体腺瘤的侵袭性密切相关。

病毒特异性受体的演化

最近的研究表明,即使病毒基因组仅发生细微的改变,病毒进入细胞甚至同一种细胞时,使用的受体也会发生相应的变化。病毒特异性受体的演化是多种因素共同作用的结果,包括:病毒致病机制、病毒的宿主范围、病毒介导的基因靶向性、器官移植与异种移植后的病毒适应以及病毒性疾病的发生等等。对病毒特异性受体演化的研究,将深化人类对病毒性疾病的认识和探索有效的预防、控制和治疗疾病的方法。

Slit分泌蛋白家族2/Slit分泌蛋白家族特异性受体1在骨髓增生异常综合征中的表达及意义

目的探讨Slit分泌蛋白家族2/Slit分泌蛋白家族特异性受体1(Slit2/Robo1)在骨髓增生异常综合征(MDS)中的表达及临床意义。方法以2017年8月至2019年6月就诊于徐州医科大学附属医院的51例初诊MDS病人为研究对象,采用Ficoll密度梯度离心法分离51例MDS病人治疗前后骨髓单个核细胞,并通过实时定量PCR检测细胞中Slit2/Robo1mRNA的表达水平,采用蛋白质印迹法(Westernblotting)测定其蛋白表达。将Slit2/Robo1mRNA表达水平与临床参数进行相关性分析。以对照组Slit2、Robo1 mRNA表达水平为基线,分别将Slit2、Robo1 mRNA的表达量分为高表达组和低表达组,Kaplan-Meier法绘制生存曲线,并分析Slit2/Robo1 mRNA基因表达水平与MDS预后关系。结果初治组Robo1表达量明显高于正常对照组[(2.595±0.395)比(1.422±0.485)],而Slit2表达量明显低于正常对照组[(2.453±0.185)比(2.729±0.136)](P<0.05);中高危病人治疗后,有效组Robo1表达量降低,无效组升高,Slit2表达量则相反,有效组较前升高,无效组较前降低(P<0.05)。相关性分析结果显示,Robo1 mRNA表达水平与IPSS-R分组、骨髓原始细胞数、年龄均呈正相关(r=0.36,r=0.41,r=0.36),Slit2 mRNA表达水平与IPSS-R分组、骨髓原始细胞数、年龄均呈负相关(r=−0.83,r=−0.78,r=−0.53)。生存分析显示Robo1 mRNA相对表达水平与病人的总生存期(OS)及无进展生存期(PFS)呈负相关,而Slit2mRNA水平与病人的总生存期(OS)及无进展生存期(PFS)呈正相关(P<0.05)。结论Slit2/Robo1在MDS病人骨髓单个核细胞中表达,其在MDS的发生、发展及预后中起重要作用。

以卒中样症状起病的肌肉特异性受体酪氨酸激酶抗体阳性重症肌无力一例

1病例报告患者男,63岁。主因“言语不利伴肢体无力半个月”入院。半个月前患者行走时突发左侧肢体无力,发音不清,伴饮水呛咳、双耳耳鸣、头昏沉感,不伴肢体麻木或头痛,就诊于作者医院门诊,行头颅CT检查显示“双侧基底节区及半卵圆中心多发腔隙灶,左侧半卵圆中心软化灶,左侧侧脑室扩张”;头颅MR检查显示“双侧基底节区、半卵圆中心多发腔隙灶”;颈椎MR检查显示“颈椎退行性骨关节病,C3/4椎间盘左后突,C4-C5至C5-C6椎间盘后突”。

感觉神经肽P物质特异性受体在表皮干细胞上的表达

近10年来，表皮干细胞（epidermal stem cells，ESCs）作为皮肤细胞发生、修复、改建的源泉，因其与上皮源肿瘤、皮肤变应性疾病的发生密切相关而成为研究的热点。体内实验结果显示，皮肤伤口中外源性感觉神经肽P物质可促进ESCs增殖并将其大量募集于创缘，加速修复过程。为进一步探讨P物质对ESCs生物学行为影响的机制，本实验分别从蛋白水平和mRNA水平观察体外培养的ESCs上P物质的两种特异性受体：神经激肽1受体（NK—1R）和NK-2R的表达情况。

HLA-G特异性受体KIR2DL4的研究进展

人类白细胞抗原-G（human leukocyte antigenG，HLA-G）分子属于非经典HLAI类分子，主要分布在母胎界面的绒毛膜滋养层细胞上。HLA-G以其独特的分子结构、剪接模式及表达方式在生殖免疫、肿瘤免疫、移植免疫、自身免疫和感染免疫中发挥重要的作用。HLA-G的生物学功能主要表现在免疫调节方面，

感觉神经元特异性受体rMrgD基因的克隆与表达

目的克隆rMrgD基因并于HEK293细胞中表达。方法利用聚合酶链反应技术,从总RNA中扩增出目的基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.1中,构建真核表达rMrgD载体,瞬时转染人胚肾293细胞得到重组质粒表达细胞株。通过免疫荧光和Western印迹检测对表达产物进行鉴定。结果直接和间接免疫荧光实验皆表明rMrgD主要定位于细胞膜上,Western印迹检测证实rMrgD在HEK293细胞主要以单体和二聚体形式存在。结论含有rMrgD基因的重组质粒在人胚肾293细胞中获得表达,主要定位于细胞膜上。本研究为进一步探究rMrgD受体的功能奠定了基础。

感觉神经元特异性受体rMrgE基因的克隆与表达

目的克隆感觉神经元特异性受体rMrgE基因并于HEK293细胞中表达。方法利用聚合酶链式反应技术,从大鼠背根神经节总RNA中扩增出目的基因rMrgE,克隆入真核表达载体pcDNA3.1/myc-hisB中,构建真核表达rMrgE载体,瞬时转染人胚肾293细胞得到重组质粒表达细胞株。采用RT-PCR、免疫荧光和Western印迹检测对表达产物进行鉴定。结果与结论含有rMrgE基因的重组质粒在人胚肾293细胞中获得表达,主要定位于细胞膜上。本研究为进一步探究rMrgE受体的功能奠定了基础。

HA 226/228双位点突变对H5N1禽流感病毒受体结合特异性和致病性的影响

禽流感病毒(AIV)主要识别SAα2,3Gal受体,而人源流感病毒主要识别SAα2,6Gal受体。本研究利用糖链受体结合特性检测方法检测表明,H5N1 AIV A/duck/Guangxi/35/2001(DK/35)可以同时识别SAα2,3Gal和SAα2,6Gal受体,然而HA 226位谷氨酸(Q)到亮氨酸(L)和228位甘氨酸(G)到丝氨酸(S)的双突变,可以导致DK/35更倾向于识别SAα2,6Gal受体。对BALB/c小鼠致病性试验显示,突变病毒株(rDK/35(Q226L/G228S))对小鼠的致病力比野毒株弱,其MLD50为4.7 log10EID50,而DK/35为1.8 log log10EID50。本研究表明H5N1 AIV通过突变可以获得优先与SAα2,6Gal受体特异性结合的能力,为H5N1 AIV的监测预防和对公共卫生风险评估提供一定的参考依据。

防感煎剂对甲1型流感病毒感染小鼠Th细胞特异性趋化因子受体的影响

[目的]研究防感煎剂对甲1型流感病毒感染小鼠Th细胞特异性趋化因子受体的影响。[方法]建立H1N1型流感病毒感染小鼠模型,流式细胞仪直接免疫荧光法检测Th细胞特异性趋化因子受体CXCR3、CCR4、CCR5,动态观察。[结果]在感染后第1、5、9天,防感煎剂各剂量组可提高下降的CD4+CCR5+%、CD4+CXCR3+%,第13天基本恢复正常;防感煎剂似可减少感染后9～13天染毒小鼠CD4+CCR4+%表达,中高剂量组明显。[结论]防感煎剂主要促进感染早期CCR5、CXCR3表达增加,Th1细胞活化并向炎症部位趋化,引起Th1型抗病毒免疫炎症反应,在感染后期减少CCR4表达,提示有一定的抑制高反应性哮喘和特异性过敏反应的作用。

从鸡和水禽分离到的新城疫病毒在细胞受体特异性上的差异

Toshihiro等人通过与不同动物种类红细胞的凝集试验 ,比较了从多种禽类体内 (包括鸡和野生水禽 )分离到的新城疫病毒受体的特异性的差异。所有从野生水禽分离到的毒株均可凝集马的红细胞 ,然而鸡源的分离株却不能凝集马的红细胞。其原因在于新城疫病毒的受体特异性不同 。

特异性AT_1受体阻滞剂卢沙坦对清醒大鼠AⅡ和NE介导的高血压及脂质过氧化反应的作用

目的 探讨阻断AT_1受体对AⅡ和去甲肾上腺素(NE)介导的高血压及脂质过氧化反应的影响。方法 成年Wistar大鼠36只,麻醉,颈动脉、颈静脉分别插入抗凝管并固定,清醒活动后按实验设计随机分6组(n=6)给予相应处理,处理前后均测定颈动脉平均压及血浆MDA、AⅡ及SOD水平。结果 1组给药前后各测定指标无明显变化,2、3组给药30分钟后血压上升显著且稳定持续至给药完毕,给药后血浆MDA明显升高,SOD明显下降,4、5两组给药后动脉血压均明显低于2、3组。但4组的降低幅度大于5组,且该组给药前后MDA及SOD水平并无显著改变,而5组给药前后的MDA仍然较高,SOD下降亦较明显,其上升或下降幅度均不及2组。6组虽未介入卢沙坦,但其给药后血压上升的幅度却明显低于2、3组,而该组MDA含量并无明显改变。结论 特异性AT_1受体阻滞剂卢沙坦对AⅡ介导的高血压及脂质过氧化反应有明显对抗作用,而对NE介导的高血压虽有降低效应,但对其引发的脂质过氧化并无对抗作用,提示AⅡ介导的高血压可能有其它因素参与,大剂量SOD输注不仅消除了AⅡ介导的脂质过氧化反应,同时也明显减弱了其升压作用,提示AⅡ的升压作用可能与脂质过氧化反应有关。且可能由AT_1受体所介导。

受体特异性骨髓干细胞诱导肝移植大鼠长期存活的研究

目的研究受体特异性骨髓干细胞在大鼠移植肝中的诱导分化情况及对大鼠长期存活的影响。方法雌性受体SD大鼠随机分成空白对照组、D-hanks液组、间充质干细胞组、造血干细胞组。空白对照组仅行原位肝移植术;D-hanks液组在肝移植术后大鼠门静脉注射D-hanks液0.5ml;间充质干细胞组在肝移植术后大鼠门静脉注射雄性SD大鼠骨髓间充质干细胞0.5ml(5×105个/mL);造血干细胞组注射骨髓造血干细胞0.5ml(5×105个/mL)。观察大鼠的中位生存时间及术后60dSry基因原位杂交和白蛋白免疫组化双标检测观察骨髓干细胞的分化情况。结果间充质干细胞组、造血干细胞组中位生存时间分别为大于180d、102d,较空白对照组、D-hanks液组明显延长(P<0.05);间充质干细胞组又较造血干细胞组明显延长(P<0.05);间充质干细胞组、造血干细胞组Sry基因原位杂交和白蛋白免疫组化双标检测呈阳性,且双阳性细胞百分率间充质干细胞组高于造血干细胞组(P<0.05)。结论受体特异性骨髓干细胞能诱导大鼠肝移植术后长期存活,并能在移植肝的环境中诱导分化为肝细胞,表达白蛋白,并逐渐替代移植肝本身的细胞;间充质干细胞在移植肝内诱导分化为肝细胞并替代的能力较强;移植的肝脏被受体特异性骨髓干细胞分化来的肝细胞替代,是大鼠长期存活的可能原因。

血管紧张素-(1-7)及其受体激动剂AVE0991治疗大鼠急性肺损伤的效果

目的探讨血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]及其特异性受体激动剂AVE0991用于治疗大鼠急性肺损伤(ALI)的效果。方法选择清洁级雄性SD成年大鼠45只,6~8周龄,体重250~300 g。采用随机数字表法将大鼠分为五组:对照组(C组)、ALI组(L组)和Ang-(1-7)组(LA组)、AVE0991组(LAV组)和Ang-(1-7)抑制剂(A-779)(LAN组),每组9只。L组静脉注射脂多糖(LPS)5 mg/kg,机械通气V T_(1)5 ml/kg,持续4 h;C组静脉注射与L组等容量的生理盐水,机械通气V T_(8)ml/kg,持续4 h;LA组、LAV组和LAN组静注LPS 5 mg/kg,机械通气V T_(1)5 ml/kg,持续2 h后分别静注Ang-(1-7)50 pmol·kg^(-1)·min^(-1)、AVE0991500 pmol·kg^(-1)·min^(-1)和A-779100 pmol·kg^(-1)·min^(-1),继续机械通气2 h。记录机械通气前(T_(0))、机械通气2 h(T_(1))、药物处理30 min(T_(2))、60 min(T_(3))、90 min(T_(4))、120 min(T_(5))时的肺动脉压(PAP);T_(1)和T_(5)时取肺动脉血行血气分析,记录LA组、LAV组和LAN组的PaCO_(2)、PaO_(2)。处死大鼠,对支气管肺泡灌洗液(BALF)采用瑞氏-姬姆萨染色行白细胞分类计数,采用ELISA法检测股静脉血TNF-α浓度,采用肺组织称重法计算肺湿/干重比(W/D),采用HE染色观察肺组织病理改变并评估肺损伤程度。结果与T_(1)时比较,T_(2)时LA组PAP明显降低(P<0.05),T_(2)—T_(4)时LAV组PAP明显降低(P<0.05),T_(5)时LA组PaO_(2)明显升高(P<0.05)。与C组比较,L组和LAN组BALF中白细胞计数明显增多(P<0.05),L组、LA组、LAV组和LAN组血清TNF-α浓度和W/D值明显升高(P<0.05)。与L组比较,LA组和LAV组BALF中白细胞计数、血清TNF-α浓度和W/D值明显降低(P<0.05)。与LA组比较,LAN组BALF中白细胞计数、血清TNF-α浓度和W/D值明显升高(P<0.05)。C组肺组织损伤轻微,L组肺组织损伤中度,LA组和LAV组肺组织损伤轻度,LAN组肺组织损伤严重。结论Ang-(1-7)及AVE0991可以减轻大鼠大潮气量通气合并LPS所致ALI的炎症反应,改善肺损伤,具有肺保护作用。

生长抑素受体特异性激动剂对人肝癌细胞生长影响的实验研究

目的探讨生长抑素受体特异性激动剂对体外培养的人肝癌细胞HepG2生长的影响。方法分别采用MTS、TUNEL、Transwell法检测生长抑素受体亚型特异性激动剂对体外培养的人肝癌细胞株HepG2增殖、凋亡、迁移的影响。结果与对照组相比,SSTR2~4亚型特异性激动剂对人肝癌细胞的增殖、凋亡、迁移没有明显影响,SSTR5亚型特异性激动剂L-817、818在剂量为1μg·mL-1时可以出现较明显的迁移抑制作用,剂量达到5μg·mL-1时,差异有统计学意义（P〈0.05）。其他不同浓度激动剂对HepG2的迁移抑制作用不明显。结论 SSTR亚型特异性激动剂对肝癌细胞的增殖、凋亡、侵袭没有明显的影响,L-817、818在高剂量时可以抑制HepG2的迁移。

辅调节因子NRIF3受体特异性之机理的研究

目的:研究新发现的核激素受体辅调节因子(coregulator) NRIF3 的受体特异性的分子机理。方法:酵母双杂合体转化分析,选择典型菌株作β 半乳糖苷酶定量分析。结果:我们的结果提示一个双区结合模型,即单个NRIF3分子同时利用C端的LXXIL(受体结合功能区,即 RID1)和 N端的 LXXLL(RID2)与 TR或 RXR作用,RID1和RID2之间的距离对受体和NRIF3相互作用的亲和力有重要影响。结论:辅调节因子 NRIF3 受体特异性与其结构有关。

人疱疹病毒6B感染人体的特异性受体

人疱疹病毒6B（HHv-6B）是一种明显区别于HHV-6A的T细胞p疱疹病毒，该病毒已被国际病毒分类委员会归为单独的一个种属。HHV-6B的初始感染能够引起幼儿急疹，甚至是严重的脑病，90％的人在儿童时期感染。一旦感染，病毒则以隐性感染的形式终生存在，对免疫抑制患者而言，HHV-6B的再生会引发脑炎。HHV-6B的分子受体目前仍未知。

流感病毒受体特异性红细胞检测试剂的制备及初步应用

为优化流感病毒受体特异性的检测方法,本研究利用霍乱弧菌神经氨酸酶(VCNA)对鸡红细胞(RBC)进行去唾液酸化处理后,再分别通过α2,3和α2,6唾液酸转移酶以CMP-唾液酸作为底物进行不同唾液酸受体的标记,使其分别仅含SAα2,3Gal和SA2,6Gal受体,利用血凝试验和流式细胞仪检测其标记效果。流式检测结果显示,经过α2,3唾液酸转移酶处理的红细胞只含有SAα2,3唾液酸受体,而α2,6唾液酸转移酶只将SAα2,6唾液酸受体标记到红细胞表面。将两种红细胞分别经过人流感病毒和禽流感病毒的检测,表明该方法可以快速鉴定流感病毒的受体特异性。本研究所建立的流感病毒受体特异性标记和检测方法为流感病毒宿主嗜性范围的检测提供了一种有效的技术手段。