毛蕊花苷和异毛蕊花苷对树突状细胞增殖的影响

目的观察大粒车前子提取物苯乙醇苷类化合物毛蕊花苷(verbascoside)和异毛蕊花苷(isoverbascoside)对小鼠骨髓来源树突状细胞增殖的影响。方法采用噻唑盐(MTT)法,以细胞因子(rmGM-CSF+rmIL-4)作为阳性对照,观察不同浓度的毛蕊花苷和异毛蕊花苷对小鼠骨髓来源树突状细胞增殖的影响。结果毛蕊花苷和异毛蕊花苷均可促进小鼠树突状细胞的增殖,与阳性对照组比较,毛蕊花苷在1.60×10-7～1.60×10-4mol·L-1内,异毛蕊花苷在所有浓度范围内作用效果均非常显著(P<0.05)。毛蕊花苷和异毛蕊花苷在1.60×10-6和1.60×10-5mol·L-1的浓度与细胞因子联用时,可显著刺激小鼠树突状细胞的增殖(P<0.05)。结论毛蕊花苷和异毛蕊花苷不仅可以直接促进小鼠骨髓来源树突状细胞的增殖,而且与细胞因子有明显的协同作用。

反相高效液相色谱法同时测定车前子中的毛蕊花苷和异毛蕊花苷

采用反相高效液相色谱法在Waters Symmitry C18 （5 μm，250 mm×4.6 mm）色谱柱上以甲醇：体积分数0.1%甲酸溶液（40：60，v：v）为流动相同时测定车前子中毛蕊花苷和异毛蕊花苷的含量，流动相流速为0.6 mL/min，检测波长为330 nm。毛蕊花苷线性范围为0.2～2.0 μg，相关系数R＝0.9982。异毛蕊花苷线性范围为0.2～2.0 μg，R＝0.9957。样品的平均回收率分别为99.70 %，101.18%。测得大粒车前子中毛蕊花苷含量为8.65 mg/g，异毛蕊花苷含量为1.36 mg/g。此方法准确、快速，适用于车前子中毛蕊花苷和异毛蕊花苷的定量分析。

基于UPLC-Q/TOF-MS的中药水蜜丸制剂二至丸多成分稳定性研究

目的在遵循人用药品注册技术要求国际协调会(International Conference on Harmonization of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use,ICH)制剂稳定性指导原则的指导下,在采用超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-Q/TOF-MS)联用技术对中药传统水蜜丸制剂二至丸进行多成分定性定量研究的基础上,进行二至丸长期稳定性和加速稳定性研究,并考察了制剂影响因素对制剂稳定性的影响。方法采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1mm,1.7μm),流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,体积流量0.2 m L/min,采用电喷雾电离源(ESI),正、负离子模式扫描。在遵循ICH制剂稳定性指导原则的指导下,进行了18个月的长期稳定性试验[温度(25±2)℃,相对湿度(RH)(60±5)%],加速稳定性试验[温度(40±2)℃,RH(75±5)%]和制剂影响因素试验(包装材料类型和密封条件)。结果采用以上方法共鉴定出二至丸中20个化学成分(红景天苷、蟛蜞菊内酯、10-羟基木犀榄苷二甲酯、木犀榄苷-11甲酯、马钱苷酸、松果菊苷、女贞苦苷、橄榄苦苷酸、毛蕊花苷/异毛蕊花苷、女贞苷、特女贞苷、ligustroflavone、特女贞苷异构体、阿富汗丁香苷F、异女贞苷、女贞酸、橄榄苦苷、女贞苷-G13、青藤碱、3-O-顺式-对-香豆酰委陵菜酸),并对其进行定量及归一化半定量研究。在长期稳定性研究中,20个成分均保持稳定;然而在加速稳定性试验条件下,11种成分(10-羟基木犀榄苷二甲酯、松果菊苷、女贞苦苷、橄榄苦苷酸、毛蕊花苷、女贞苷、特女贞苷、ligustroflavone、女贞酸、女贞苷-G13、青藤碱)的量明显下降。制剂影响因素试验结果显示采用钠钙玻璃包装材料替代现有市售聚酯包装,在密封或敞口条件下,制剂中各成分稳定性均显著提高。在采用相同包材时密封条件对制剂稳定性也存在显著性影响。结论通过较为系统的中药传统口服制剂类型水蜜丸的制剂稳定性研究,为中药制剂质量控制水平和临床用药安全提供技术支持。